摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
英文缩略词 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
1. 白背飞虱的发生和危害 | 第13-14页 |
2. 昆虫体内的共生菌 | 第14-18页 |
·共生菌的形态特征及分布 | 第15-16页 |
·传递方式 | 第16页 |
·共生菌基因组 | 第16-17页 |
·系统进化 | 第17-18页 |
3. 昆虫营养与共生菌的关系 | 第18-19页 |
4. 转氨酶研究进展 | 第19-22页 |
5. BAC-TO-BAC系统 | 第22-24页 |
6. 本实验研究的背景、目的及实验意义 | 第24-25页 |
第二章 白背飞虱转氨酶基因的分子克隆 | 第25-55页 |
摘要 | 第25-26页 |
1. 材料与方法 | 第26-37页 |
·供试昆虫 | 第26页 |
·主要试剂和仪器设备 | 第26-27页 |
·白背飞虱转氨酶基因片段的筛选和验证 | 第27-32页 |
·白背飞虱氨基酸代谢过程中相关的转氨酶基因的全长克隆 | 第32-36页 |
·系统进化树及密码子偏性分析 | 第36-37页 |
2. 结果与分析 | 第37-50页 |
·白背飞虱转氨酶基因的克隆及序列分析 | 第37-48页 |
·白背飞虱转氨酶基因的密码子偏性分析 | 第48-50页 |
3. 讨论 | 第50-55页 |
第三章 白背飞虱丙氨酸转氨酶和支链氨基酸转氨酶基因的序列分析及时空表达 | 第55-67页 |
摘要 | 第55页 |
1. 材料与方法 | 第55-59页 |
·供试昆虫 | 第55-56页 |
·主要试剂和仪器设备 | 第56页 |
·多重序列比对与进化分析 | 第56页 |
·实时定量PCR检测白背飞虱转氨酶基因的时空表达 | 第56-59页 |
2. 结果与分析 | 第59-65页 |
·白背飞虱丙氨酸转氨酶基因的序列分析 | 第59-61页 |
·白背飞虱支链氨酸转氨酶基因的序列分析 | 第61-62页 |
·白背飞虱丙氨酸转氨酶基因的时空表达 | 第62-64页 |
·白背飞虱支链氨酸转氨酶基因的龄期表达 | 第64-65页 |
3. 讨论 | 第65-67页 |
第四章 白背飞虱丙氨酸转氨酶和支链氨基酸的真核表达及丙氨酸转氨酶酶活性测定 | 第67-89页 |
摘要 | 第67-68页 |
1. 材料与方法 | 第68-81页 |
·实验试剂 | 第68页 |
·实验仪器设备 | 第68-69页 |
·白背飞虱转氨酶基因真核表达供体质粒构建 | 第69-70页 |
·PCR产物的纯化、连接转化与测序 | 第70-72页 |
·双酶切、T4连接、转化与测序 | 第72-75页 |
·重组杆状病毒质粒的构建 | 第75-76页 |
·提取重组病毒Bacmid DNA及其鉴定 | 第76-77页 |
·昆虫细胞的培养 | 第77页 |
·重组病毒Bacmid DNA对昆虫细胞的转染及感染 | 第77-78页 |
·异源蛋白表达及Western免疫杂交 | 第78-80页 |
·丙氨酸转氨酶酶活性测定 | 第80-81页 |
·数据处理 | 第81页 |
2. 实验结果与分析 | 第81-86页 |
·重组杆状病毒Bacmid的获得 | 第81-83页 |
·Bacmid DNA | 第83页 |
·重组Bacmid感染SF9细胞 | 第83-84页 |
·蛋白杂交检测 | 第84-85页 |
·丙氨酸转氨酶的酶活性 | 第85-86页 |
3. 讨论 | 第86-89页 |
全文总结 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-105页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第105-107页 |
附录 | 第107-117页 |
致谢 | 第117页 |