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白背飞虱10个转氨酶基因的克隆与2个丙氨酸转氨酶的功能验证

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-11页
英文缩略词第11-13页
第一章 文献综述第13-25页
 1. 白背飞虱的发生和危害第13-14页
 2. 昆虫体内的共生菌第14-18页
   ·共生菌的形态特征及分布第15-16页
   ·传递方式第16页
   ·共生菌基因组第16-17页
   ·系统进化第17-18页
 3. 昆虫营养与共生菌的关系第18-19页
 4. 转氨酶研究进展第19-22页
 5. BAC-TO-BAC系统第22-24页
 6. 本实验研究的背景、目的及实验意义第24-25页
第二章 白背飞虱转氨酶基因的分子克隆第25-55页
 摘要第25-26页
 1. 材料与方法第26-37页
   ·供试昆虫第26页
   ·主要试剂和仪器设备第26-27页
   ·白背飞虱转氨酶基因片段的筛选和验证第27-32页
   ·白背飞虱氨基酸代谢过程中相关的转氨酶基因的全长克隆第32-36页
   ·系统进化树及密码子偏性分析第36-37页
 2. 结果与分析第37-50页
   ·白背飞虱转氨酶基因的克隆及序列分析第37-48页
   ·白背飞虱转氨酶基因的密码子偏性分析第48-50页
 3. 讨论第50-55页
第三章 白背飞虱丙氨酸转氨酶和支链氨基酸转氨酶基因的序列分析及时空表达第55-67页
 摘要第55页
 1. 材料与方法第55-59页
   ·供试昆虫第55-56页
   ·主要试剂和仪器设备第56页
   ·多重序列比对与进化分析第56页
   ·实时定量PCR检测白背飞虱转氨酶基因的时空表达第56-59页
 2. 结果与分析第59-65页
   ·白背飞虱丙氨酸转氨酶基因的序列分析第59-61页
   ·白背飞虱支链氨酸转氨酶基因的序列分析第61-62页
   ·白背飞虱丙氨酸转氨酶基因的时空表达第62-64页
   ·白背飞虱支链氨酸转氨酶基因的龄期表达第64-65页
 3. 讨论第65-67页
第四章 白背飞虱丙氨酸转氨酶和支链氨基酸的真核表达及丙氨酸转氨酶酶活性测定第67-89页
 摘要第67-68页
 1. 材料与方法第68-81页
   ·实验试剂第68页
   ·实验仪器设备第68-69页
   ·白背飞虱转氨酶基因真核表达供体质粒构建第69-70页
   ·PCR产物的纯化、连接转化与测序第70-72页
   ·双酶切、T4连接、转化与测序第72-75页
   ·重组杆状病毒质粒的构建第75-76页
   ·提取重组病毒Bacmid DNA及其鉴定第76-77页
   ·昆虫细胞的培养第77页
   ·重组病毒Bacmid DNA对昆虫细胞的转染及感染第77-78页
   ·异源蛋白表达及Western免疫杂交第78-80页
   ·丙氨酸转氨酶酶活性测定第80-81页
   ·数据处理第81页
 2. 实验结果与分析第81-86页
   ·重组杆状病毒Bacmid的获得第81-83页
   ·Bacmid DNA第83页
   ·重组Bacmid感染SF9细胞第83-84页
   ·蛋白杂交检测第84-85页
   ·丙氨酸转氨酶的酶活性第85-86页
 3. 讨论第86-89页
全文总结第89-91页
参考文献第91-105页
攻读硕士学位期间发表的论文第105-107页
附录第107-117页
致谢第117页

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