| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-30页 |
| ·真核细胞的跨核膜运输概述 | 第13-17页 |
| ·真核细胞的核被膜结构 | 第14页 |
| ·核孔复合物、核孔蛋白与物质跨核膜运输 | 第14-16页 |
| ·NPC介导的大分子物质跨核膜运输的方式 | 第16-17页 |
| ·Karyopherin与其介导的蛋白跨核膜转运 | 第17-23页 |
| ·Karyopherin的分类 | 第17-18页 |
| ·Karyopherin介导的蛋白跨核膜转运机制 | 第18-21页 |
| ·Karyopherin的表达调控 | 第21页 |
| ·Karyopherin转运效率的调控 | 第21-23页 |
| ·Karyopherin的生理功能 | 第23-26页 |
| ·karyopherin与细胞周期及生物节律 | 第23-24页 |
| ·karyopherin与抗氧化 | 第24页 |
| ·karyopherin与肌细胞发生 | 第24页 |
| ·karyopherin与细胞凋亡 | 第24页 |
| ·karyopherin与神经突触功能 | 第24-25页 |
| ·karyopherin与细胞核功能 | 第25页 |
| ·karyopherin与micro RNA | 第25-26页 |
| ·Karyopherin与眼、脑的发育 | 第26页 |
| ·Karyopherin与m RNA剪接 | 第26页 |
| ·Karyopherin与病理 | 第26-30页 |
| ·Karyopherin与病毒侵染 | 第26页 |
| ·Karyopherin与抗病毒反应 | 第26-27页 |
| ·Karyopherin缺陷症 | 第27-28页 |
| ·Karyopherin与癌症 | 第28-29页 |
| ·Karyopherin与重症肌无力及心力衰竭 | 第29页 |
| ·Karyopherin与神经疾病 | 第29-30页 |
| 第二章 引言 | 第30-35页 |
| ·研究背景、目的及意义 | 第30-32页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第32-35页 |
| ·研究内容 | 第32页 |
| ·技术路线 | 第32-35页 |
| 第三章 家蚕和柞蚕Karyopherin蛋白c DNA克隆、特征分析及原核表达研究 | 第35-77页 |
| ·材料与方法 | 第35-43页 |
| ·实验动物与主要实验仪器 | 第35-36页 |
| ·c DNA模板与RACE模板的制备 | 第36-37页 |
| ·PCR引物、反应体系与程序 | 第37-39页 |
| ·RACE引物、反应体系与程序 | 第39-40页 |
| ·PCR产物的克隆测序 | 第40页 |
| ·Karyopherin原核表达 | 第40-42页 |
| ·SDS-PAGE与Westbern blot | 第42页 |
| ·DNA片段的PAGE电泳 | 第42-43页 |
| ·生物信息学分析软件 | 第43页 |
| ·实验结果 | 第43-74页 |
| ·Karyopherin c DNA克隆结果分析 | 第43-44页 |
| ·Karyopherin进化树的构建与分析 | 第44-65页 |
| ·Karyopherin蛋白功能结构域分析 | 第65页 |
| ·Karyopherin蛋白性质分析 | 第65页 |
| ·Karyopherin蛋白同源建模 | 第65页 |
| ·Karyopherin重组蛋白原核表达分析 | 第65-74页 |
| ·讨论 | 第74-76页 |
| ·结论 | 第76-77页 |
| 第四章 家蚕和柞蚕KPNA和KPNB1蛋白相互作用研究 | 第77-90页 |
| ·材料与方法 | 第77-80页 |
| ·实验动物与主要实验仪器 | 第77页 |
| ·c DNA制备 | 第77页 |
| ·表达质粒的构建 | 第77-78页 |
| ·重组蛋白的小量诱导 | 第78页 |
| ·重组蛋白的大量诱导 | 第78-79页 |
| ·GST pull-down试验 | 第79-80页 |
| ·实验结果 | 第80-81页 |
| ·重组蛋白原核表达分析 | 第80-81页 |
| ·家蚕KPNB1与KPNA IBB GST pull-down分析。 | 第81页 |
| ·讨论 | 第81-89页 |
| ·结论 | 第89-90页 |
| 第五章 家蚕和柞蚕Karyopherin在免疫应激中的表达变化 | 第90-103页 |
| ·材料与方法 | 第90-93页 |
| ·实验动物与主要实验仪器 | 第90-91页 |
| ·免疫原的处理 | 第91页 |
| ·免疫原的注射 | 第91页 |
| ·组织的获取 | 第91页 |
| ·总RNA提取与质量控制 | 第91页 |
| ·荧光定量PCR模板的制备 | 第91-92页 |
| ·荧光定量PCR | 第92页 |
| ·统计分析 | 第92-93页 |
| ·实验结果 | 第93-101页 |
| ·家蚕和柞蚕KPNA和KPNB1在组织中的分布 | 第93-94页 |
| ·家蚕KPNA和KPNB1对免疫应激的反应 | 第94页 |
| ·柞蚕KPNA和KPNB1对免疫应激的反应 | 第94-101页 |
| ·讨论 | 第101-102页 |
| ·结论 | 第102-103页 |
| 第六章 与KPNA相互作用蛋白的捕捉 | 第103-109页 |
| ·材料与方法 | 第103-106页 |
| ·实验动物与主要实验仪器 | 第103页 |
| ·c DNA制备 | 第103页 |
| ·表达质粒的构建 | 第103页 |
| ·重组蛋白的大量诱导 | 第103页 |
| ·组织可溶性蛋白的非变性提取 | 第103-104页 |
| ·蛋白pull-down试验 | 第104-106页 |
| ·实验结果 | 第106-107页 |
| ·讨论 | 第107-108页 |
| ·结论 | 第108-109页 |
| 第七章 家蚕雄蛹KPNA3 RNA干扰与对热休克反应的影响研究 | 第109-123页 |
| ·材料与方法 | 第109-115页 |
| ·实验动物与主要实验仪器 | 第109-110页 |
| ·HSF和KPNA3的RNA干扰实验 | 第110页 |
| ·热激实验 | 第110-111页 |
| ·组织的处理 | 第111页 |
| ·总RNA的提取 | 第111页 |
| ·荧光定量PCR模板的制备 | 第111页 |
| ·荧光定量PCR | 第111页 |
| ·可溶性蛋白的提取 | 第111-112页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第112-113页 |
| ·家蚕KPNA3和HSF重组蛋白的原核表达 | 第113页 |
| ·KPNA3和HSF重组蛋白纯化 | 第113-114页 |
| ·KPNA3和HSF多克隆抗血清的制备 | 第114页 |
| ·抗体效价的测定 | 第114-115页 |
| ·GST pull down实验 | 第115页 |
| ·western blot | 第115页 |
| ·统计分析 | 第115页 |
| ·实验结果 | 第115-121页 |
| ·重组蛋白表达与纯化 | 第115-117页 |
| ·KPNA3与HSF抗血清的效价与特异性分析 | 第117页 |
| ·KPNA3和HSF RNA干扰效果 | 第117-118页 |
| ·家蚕雄蛹的热休克反应 | 第118页 |
| ·KPNA3和HSF knock-down对热休克反应影响 | 第118-121页 |
| ·KPNA3和HSF的体外pull-down实验 | 第121页 |
| ·讨论 | 第121-122页 |
| ·结论 | 第122-123页 |
| 参考文献 | 第123-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
| 个人简介 | 第137页 |
| 在读期间发表的论文 | 第137页 |
