符号说明 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
1 前言 | 第14-32页 |
·植物细胞内膜系统的组成 | 第14-15页 |
·植物细胞中囊泡运输的途径 | 第15-19页 |
·内吞途径 | 第15-17页 |
·外排途径 | 第17-18页 |
·液泡运输途径 | 第18-19页 |
·逆行再循环途径及特殊运输途径 | 第19页 |
·植物中的AP复合体及其功能 | 第19-24页 |
·AP1 | 第20-21页 |
·AP2 | 第21-22页 |
·AP3 | 第22-23页 |
·AP4和AP5 | 第23-24页 |
·囊泡运输的功能 | 第24-29页 |
·生长素运输的调节 | 第24-25页 |
·介导细胞的分裂 | 第25-26页 |
·细胞自噬的调节 | 第26-27页 |
·抗病反应 | 第27-28页 |
·纤维素的合成 | 第28-29页 |
·药剂细胞生物学中常用的药剂及其功能 | 第29-30页 |
·本研究的目的及其意义 | 第30-32页 |
2 材料与方法 | 第32-53页 |
·材料 | 第32-33页 |
·植物材料及生长条件 | 第32页 |
·菌株和质粒 | 第32页 |
·酶与各种生化试剂 | 第32-33页 |
·方法 | 第33-53页 |
·突变体的鉴定 | 第33-36页 |
·突变体的选择和订购 | 第33页 |
·突变体鉴定引物的设计 | 第33页 |
·突变体基因组DNA提取(小量法) | 第33-34页 |
·突变体基因组水平的鉴定 | 第34页 |
·植物总RNA的提取(试剂盒法) | 第34-35页 |
·反转录 | 第35-36页 |
·突变体RNA水平的鉴定 | 第36页 |
·表达载体的构建 | 第36-41页 |
·PCR引物设计 | 第36页 |
·目的片段的克隆 | 第36-37页 |
·PCR产物回收(试剂盒法) | 第37-38页 |
·TOPO连接反应 | 第38页 |
·大肠杆菌感受态的制备与转化 | 第38-39页 |
·DNA序列的测定 | 第39页 |
·质粒的提取 | 第39-40页 |
·LR反应 | 第40-41页 |
·质粒DNA的酶切鉴定 | 第41页 |
·农杆菌介导的拟南芥遗传转化及转基因植株的鉴定 | 第41-44页 |
·根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备与转化 | 第41-42页 |
·拟南芥的栽培和转化 | 第42-43页 |
·拟南芥转基因植株的筛选和鉴定 | 第43-44页 |
·GUS染色和照相 | 第44页 |
·荧光染料染色、药剂处理和照相 | 第44-45页 |
·FM4-64染色 | 第44-45页 |
·BFA处理 | 第45页 |
·Wortmannin处理 | 第45页 |
·激光共聚焦显微镜照相及图像处理 | 第45页 |
·花粉体外萌发 | 第45-46页 |
·Lactophenol-trypan blue染色 | 第46页 |
·DAB染色 | 第46-47页 |
·叶脉结构的观察 | 第47页 |
·根的向重力性分析 | 第47页 |
·根尖淀粉粒染色 | 第47页 |
·扫描电子显微镜观察 | 第47-48页 |
·透射电子显微镜观察 | 第48-49页 |
·酵母的转化和渗透胁迫处理 | 第49-53页 |
·酵母表达载体的构建 | 第49-50页 |
·酵母的转化 | 第50-52页 |
·酵母的渗透胁迫处理 | 第52-53页 |
3 结果与分析 | 第53-69页 |
·HAPLESS13是组成型表达的基因 | 第53-54页 |
·HAPLESS13对于拟南芥的生长发育是必须的 | 第54-57页 |
·HAPLESS13对于维管组织的发育是必须的 | 第57-59页 |
·突变体hap13-1 中生长素的动态分布出现异常 | 第59-60页 |
·HAPLESS13对于细胞的形态建成是必须的 | 第60-62页 |
·HAPLESS13功能和亚细胞定位在进化上保守 | 第62-64页 |
·TGN/EE上蛋白的分拣需要HAP13的参与 | 第64-69页 |
4 讨论 | 第69-73页 |
5 结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第84页 |