| 符号说明 | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| 1 前言 | 第18-31页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第18-23页 |
| ·概述 | 第18页 |
| ·PRRSV的分类地位与理化性质 | 第18-19页 |
| ·PRRSV的基因组结构 | 第19页 |
| ·PRRSV的编码蛋白及其功能 | 第19-21页 |
| ·PRRSV非结构蛋白 | 第19-20页 |
| ·PRRSV结构蛋白 | 第20-21页 |
| ·欧洲型与美洲型毒株的蛋白差异 | 第21页 |
| ·PRRSV的致病机理 | 第21页 |
| ·PRRSV的免疫反应 | 第21-23页 |
| ·PRRSV的先天性免疫应答 | 第21-22页 |
| ·PRRSV细胞免疫 | 第22页 |
| ·PRRSV体液免疫 | 第22-23页 |
| ·PRRS疫苗 | 第23页 |
| ·树突状细胞 | 第23-25页 |
| ·概述 | 第23-24页 |
| ·DCs在免疫应答中的作用 | 第24-25页 |
| ·DCs在病毒感染中的免疫应答信号通路 | 第25页 |
| ·Toll样受体 | 第25-28页 |
| ·TLRs的结构、分布及其配体 | 第25-26页 |
| ·TLRs信号传导通路 | 第26-28页 |
| ·MyD88依赖性信号传导通路 | 第26-27页 |
| ·TRIF依赖性信号传导通路 | 第27-28页 |
| ·蛋白质组学技术研究进展 | 第28-31页 |
| ·蛋白质组学概述 | 第28页 |
| ·PRRSV的蛋白质组学研究进展 | 第28页 |
| ·iTRAQ技术 | 第28-31页 |
| ·iTRAQ技术概述 | 第28-29页 |
| ·iTRAQ技术原理及操作流程 | 第29页 |
| ·iTRAQ技术在蛋白质组学中的应用 | 第29-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-44页 |
| ·试验材料 | 第31-32页 |
| ·细胞、毒株和抗体 | 第31页 |
| ·试验动物 | 第31页 |
| ·主要试剂与药品 | 第31-32页 |
| ·主要试剂配制 | 第32页 |
| ·主要设备和仪器 | 第32页 |
| ·试验方法 | 第32-44页 |
| ·TLR3、7 配体与PRRSV灭活抗原不同组合感染Mo DCs的试验方法 | 第32-37页 |
| ·病毒TCID50测定及病毒灭活 | 第32页 |
| ·分离诱导培养Mo DCs | 第32-33页 |
| ·细胞试验分组 | 第33页 |
| ·Mo DCs RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·cDNA的生成 | 第34页 |
| ·相对荧光定量PCR (Relative quantitative real time PCR) | 第34-36页 |
| ·ELISA检测各组Mo DCs细胞上清中Th1、Th2型细胞因子的含量 | 第36页 |
| ·Western blot验证各试验处理组Mo DCs核/质蛋白的表达量 | 第36-37页 |
| ·流式细胞术（Fluorecence activated cell sorter, FACS）检测不同试验组吞噬PRRSV灭活抗原的Mo DCs百分含量 | 第37页 |
| ·TLR3、7 配体与PRRSV灭活抗原免疫小鼠的试验方法 | 第37-40页 |
| ·病毒TCID50测定及病毒灭活 | 第37页 |
| ·小鼠免疫分组 | 第37-38页 |
| ·小鼠脾细胞的分离 | 第38页 |
| ·T淋巴细胞增殖试验 | 第38页 |
| ·小鼠脾脏树突状细胞和CD3+ T淋巴细胞的分离 | 第38-39页 |
| ·FACS检测小鼠脾淋巴细胞中CD4+、CD8+T淋巴细胞的百分含量 | 第39页 |
| ·FACS检测小鼠分泌Th1型细胞因子（IFN-γ）和Th2型细胞因子（IL-4）的CD3+T细胞的百分含量 | 第39页 |
| ·ELISA检测小鼠血清中Th1型细胞因子（IFN-γ、IL-12）和Th2型细胞因子（IL-4、IL-6）的含量 | 第39页 |
| ·血清中和试验 | 第39-40页 |
| ·iTRAQ技术分析Mo DCs感染高致病性PRRSV SD-JN的蛋白质组学试验方法 | 第40-44页 |
| ·分离诱导培养Mo DCs | 第40页 |
| ·PRRSV感染Mo DCs | 第40页 |
| ·Mo DCs RNA的提取及cDNA的生成 | 第40页 |
| ·Real time PCR检测PRRSV的增殖 | 第40-41页 |
| ·蛋白提取、酶切和除盐，iTRAQ标记和混合 | 第41-42页 |
| ·LC-MS/MS质谱检测及分析 | 第42页 |
| ·差异蛋白的生物信息学分析 | 第42-43页 |
| ·Western blot确定PRRSV在Mo DCs中的增殖并验证iTRAQ分析结果 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-61页 |
| ·TLR3、7 配体与PRRSV灭活抗原不同组合感染Mo DCs的试验结果与分析 | 第44-50页 |
| ·各组Mo DCs中Th1型细胞因子和Th2型细胞因子mRNA的相对表达量 | 第44页 |
| ·各组Mo DCs上清中Th1型细胞因子和Th2型细胞因子的蛋白含量 | 第44-46页 |
| ·各组Mo DCs中TRIF/MyD88-NF-κB信号通路节点分子的检测 | 第46-48页 |
| ·各组Mo DCs不同时间点TRIF、MyD88和NF-κB P65 mRNA相对表达量的变化 | 第46-47页 |
| ·各组Mo DCs不同时间点TRIF、MyD88、磷酸化-IκBα和NF-κB P65的蛋白表达量的变化 | 第47-48页 |
| ·NF-κB对Mo DCs分泌细胞因子的影响 | 第48-49页 |
| ·TLR3、7 配体增强MoDCs吞噬PRRSV灭活抗原的能力 | 第49-50页 |
| ·TLR3、7 配体与PRRSV灭活抗原不同组合免疫小鼠试验的结果与分析 | 第50-54页 |
| ·各免疫组小鼠脾淋巴细胞中CD4+、CD8+T细胞的百分含量 | 第50页 |
| ·T淋巴细胞增殖试验的结果与分析 | 第50-51页 |
| ·各免疫组小鼠脾脏来源的树突状细胞对PRRSV特异性T细胞分化的影响 | 第51-52页 |
| ·各免疫组小鼠血清中Th1型细胞因子和Th2型细胞因子的含量 | 第52-53页 |
| ·血清中和试验 | 第53-54页 |
| ·高致病性PRRSV SD-JN感染Mo DCs蛋白质组学分析试验 | 第54-61页 |
| ·高致病性PRRSV SD-JN在Mo DCs中增殖的验证 | 第54-55页 |
| ·iTRAQ偶联的 2D LC-MS/MS蛋白表达谱分析 | 第55-59页 |
| ·Western blot验证蛋白差异表达的结果 | 第59页 |
| ·蛋白互作分析 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 6 参考文献 | 第67-84页 |
| 7 附录 | 第84-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第122页 |
