摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
文献综述 | 第11-21页 |
第一章 小反刍兽疫概述 | 第11-21页 |
·病原学 | 第11-12页 |
·分子生物学研究 | 第12页 |
·病毒的蛋白及其功能 | 第12-15页 |
·M蛋白 | 第12页 |
·N蛋白 | 第12-13页 |
·F蛋白(融合蛋白) | 第13页 |
·H蛋白(血凝素-神经氨酸酶) | 第13页 |
·L蛋白(大蛋白) | 第13-14页 |
·P蛋白(磷蛋白) | 第14页 |
·非结构蛋白 | 第14-15页 |
·流行病学 | 第15-16页 |
·易感动物 | 第15页 |
·地理分布 | 第15-16页 |
·临床特征及发病机理 | 第16-17页 |
·临床症状 | 第16页 |
·发病机理 | 第16-17页 |
·诊断方法 | 第17-18页 |
·病毒分离 | 第17页 |
·酶联免疫吸附实验 | 第17-18页 |
·RT-PCR检测 | 第18页 |
·疾病防治 | 第18-19页 |
·展望 | 第19-21页 |
试验研究 | 第21-38页 |
第二章 实时荧光定量PCR检测PPRV方法的建立 | 第21-31页 |
·材料 | 第21-22页 |
·细胞和病毒 | 第21页 |
·菌株和载体 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·主要仪器 | 第21-22页 |
·常用试剂及溶液的配制 | 第22页 |
·方法 | 第22-26页 |
·病毒增殖 | 第22-23页 |
·引物设计 | 第23页 |
·提取RNA | 第23页 |
·重组质粒的构建 | 第23-25页 |
·RT-PCR反转录 | 第23页 |
·PCR扩增 | 第23-24页 |
·PCR产物的胶回收 | 第24页 |
·产物的连接 | 第24页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第24页 |
·重组质粒的提取 | 第24-25页 |
·重组质粒的菌液PCR鉴定及测序 | 第25页 |
·计算重组质粒拷贝数 | 第25页 |
·定量PCR方法的建立 | 第25页 |
·扩增曲线 | 第25页 |
·溶解曲线 | 第25页 |
·标准曲线 | 第25页 |
·荧光定量PCR方法评价 | 第25-26页 |
·特异性验证 | 第25页 |
·敏感性验证 | 第25-26页 |
·重复性验证 | 第26页 |
·结果 | 第26-29页 |
·PCR结果 | 第26页 |
·重组质粒PCR鉴定结果 | 第26-27页 |
·基因序列测定分析 | 第27页 |
·计算拷贝数 | 第27页 |
·扩增曲线的建立 | 第27页 |
·标准曲线的建立 | 第27-28页 |
·溶解曲线分析 | 第28页 |
·荧光定量PCR方法的评价 | 第28-29页 |
·特异性验证 | 第28页 |
·敏感性分析 | 第28-29页 |
·重复性验证 | 第29页 |
·讨论 | 第29-31页 |
第三章小反刍兽疫病毒N75-1 株在EEC细胞上的增殖特性 | 第31-38页 |
·材料 | 第31-33页 |
·细胞和病毒 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31页 |
·主要溶液的配制 | 第31-32页 |
·主要仪器 | 第32-33页 |
·方法 | 第33-35页 |
·EEC细胞的培养及病毒的增殖 | 第33页 |
·EEC细胞培养 | 第33页 |
·小反刍兽疫N75-1 疫苗毒株扩增培养 | 第33页 |
·N75-1 TCID50的测定 | 第33-34页 |
·EEC细胞接种疫苗毒N75-1 与病毒增殖定量PCR检测 | 第34页 |
·PPRV接种EEC细胞定量PCR样品收集 | 第34页 |
·定量PCR检测 | 第34页 |
·N75-1 疫苗毒株感染EEC细胞后N蛋白表达检测 | 第34-35页 |
·结果 | 第35-36页 |
·EEC细胞接毒前后CPE观察 | 第35页 |
·PPRV感染EEC细胞后TCID50的测定 | 第35页 |
·PPRV感染EEC细胞后增殖规律 | 第35-36页 |
·PPRV感染EEC细胞后N蛋白表达规律 | 第36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
缩略词表 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
作者简介 | 第45页 |