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小反刍兽疫病毒N75-1株在山羊子宫内膜上皮细胞中的增殖规律研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
文献综述第11-21页
 第一章 小反刍兽疫概述第11-21页
   ·病原学第11-12页
   ·分子生物学研究第12页
   ·病毒的蛋白及其功能第12-15页
     ·M蛋白第12页
     ·N蛋白第12-13页
     ·F蛋白(融合蛋白)第13页
     ·H蛋白(血凝素-神经氨酸酶)第13页
     ·L蛋白(大蛋白)第13-14页
     ·P蛋白(磷蛋白)第14页
     ·非结构蛋白第14-15页
   ·流行病学第15-16页
     ·易感动物第15页
     ·地理分布第15-16页
   ·临床特征及发病机理第16-17页
     ·临床症状第16页
     ·发病机理第16-17页
   ·诊断方法第17-18页
     ·病毒分离第17页
     ·酶联免疫吸附实验第17-18页
     ·RT-PCR检测第18页
   ·疾病防治第18-19页
   ·展望第19-21页
试验研究第21-38页
 第二章 实时荧光定量PCR检测PPRV方法的建立第21-31页
   ·材料第21-22页
     ·细胞和病毒第21页
     ·菌株和载体第21页
     ·主要试剂第21页
     ·主要仪器第21-22页
     ·常用试剂及溶液的配制第22页
   ·方法第22-26页
     ·病毒增殖第22-23页
     ·引物设计第23页
     ·提取RNA第23页
     ·重组质粒的构建第23-25页
       ·RT-PCR反转录第23页
       ·PCR扩增第23-24页
       ·PCR产物的胶回收第24页
       ·产物的连接第24页
       ·大肠杆菌感受态细胞的转化第24页
       ·重组质粒的提取第24-25页
       ·重组质粒的菌液PCR鉴定及测序第25页
       ·计算重组质粒拷贝数第25页
     ·定量PCR方法的建立第25页
       ·扩增曲线第25页
       ·溶解曲线第25页
       ·标准曲线第25页
     ·荧光定量PCR方法评价第25-26页
       ·特异性验证第25页
       ·敏感性验证第25-26页
       ·重复性验证第26页
   ·结果第26-29页
     ·PCR结果第26页
     ·重组质粒PCR鉴定结果第26-27页
     ·基因序列测定分析第27页
     ·计算拷贝数第27页
     ·扩增曲线的建立第27页
     ·标准曲线的建立第27-28页
     ·溶解曲线分析第28页
     ·荧光定量PCR方法的评价第28-29页
       ·特异性验证第28页
       ·敏感性分析第28-29页
       ·重复性验证第29页
   ·讨论第29-31页
 第三章小反刍兽疫病毒N75-1 株在EEC细胞上的增殖特性第31-38页
   ·材料第31-33页
     ·细胞和病毒第31页
     ·主要试剂第31页
     ·主要溶液的配制第31-32页
     ·主要仪器第32-33页
   ·方法第33-35页
     ·EEC细胞的培养及病毒的增殖第33页
       ·EEC细胞培养第33页
       ·小反刍兽疫N75-1 疫苗毒株扩增培养第33页
     ·N75-1 TCID50的测定第33-34页
     ·EEC细胞接种疫苗毒N75-1 与病毒增殖定量PCR检测第34页
       ·PPRV接种EEC细胞定量PCR样品收集第34页
       ·定量PCR检测第34页
     ·N75-1 疫苗毒株感染EEC细胞后N蛋白表达检测第34-35页
   ·结果第35-36页
     ·EEC细胞接毒前后CPE观察第35页
     ·PPRV感染EEC细胞后TCID50的测定第35页
     ·PPRV感染EEC细胞后增殖规律第35-36页
     ·PPRV感染EEC细胞后N蛋白表达规律第36页
   ·讨论第36-38页
结论第38-39页
参考文献第39-43页
缩略词表第43-44页
致谢第44-45页
作者简介第45页

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