摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-10页 |
第一章 前言 | 第10-37页 |
·概述 | 第10页 |
·非病毒基因载体 | 第10-19页 |
·阳离子脂质体(Liposome) | 第10-14页 |
·聚乙烯亚胺(PEI) | 第14-15页 |
·树枝状聚合物载体(Dendrimers) | 第15-17页 |
·聚赖氨酸(PLL) | 第17-18页 |
·聚甲基丙烯酸-N, N’-二甲氨基乙酯(PDMAEMA) | 第18-19页 |
·聚阳离子载体介导的基因转运过程及面临屏障 | 第19-24页 |
·复合物的形成 | 第20页 |
·复合物的血液输送稳定性 | 第20-21页 |
·复合物穿越血管内皮层及细胞外基质 | 第21页 |
·复合物的细胞摄取 | 第21-23页 |
·复合物的内涵体逃逸 | 第23页 |
·复合物的细胞质转运 | 第23-24页 |
·细胞核定位 | 第24页 |
·提高聚阳离子载体基因转运效率的方法 | 第24-35页 |
·提高复合物的血液输送稳定性 | 第24-28页 |
·靶向细胞转染 | 第28-30页 |
·提高复合物逃离内涵体/溶酶体效果 | 第30-32页 |
·提高基因物质细胞质释放效果 | 第32-34页 |
·提高DNA的细胞核运输效果 | 第34-35页 |
·课题的提出及研究内容 | 第35-37页 |
第二章 星型PDMAEMA聚合物作为基因载体的应用 | 第37-55页 |
·引言 | 第37页 |
·实验部分 | 第37-44页 |
·原料与试剂 | 第37-38页 |
·实验仪器 | 第38-39页 |
·星型PDMAEMA聚合物的合成 | 第39页 |
·傅立叶变换红外光谱检测 | 第39页 |
·凝胶渗透色谱检测 | 第39页 |
·二硫键含量的测定 | 第39-40页 |
·降解实验 | 第40页 |
·菌体的培养与质粒DNA的提取 | 第40-41页 |
·聚合物/DNA复合物的制备 | 第41页 |
·聚合物/DNA复合物形貌 | 第41-42页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第42页 |
·毒性试验 | 第42-43页 |
·细胞转染 | 第43页 |
·荧光素酶活性测定 | 第43页 |
·BCA法测总蛋白 | 第43-44页 |
·结果与讨论 | 第44-54页 |
·星型聚合物的合成及结构表征 | 第44-46页 |
·聚合物的分子量及其分布 | 第46-48页 |
·星型聚合物的二硫键含量测定 | 第48页 |
·星型聚合物降解性能考察 | 第48-49页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第49-50页 |
·聚合物/DNA复合物的尺寸及形貌 | 第50-51页 |
·细胞转染 | 第51-53页 |
·细胞毒性 | 第53-54页 |
·本章小结 | 第54-55页 |
第三章 星形PDMAEMA载体介导基因转染的机理研究 | 第55-68页 |
·引言 | 第55页 |
·实验部分 | 第55-57页 |
·原料与试剂 | 第55-56页 |
·实验仪器 | 第56页 |
·滴定实验 | 第56页 |
·聚合物/DNA复合物的制备 | 第56页 |
·聚合物/DNA复合物的形貌 | 第56页 |
·时间分辨荧光分析 | 第56-57页 |
·结果与讨论 | 第57-67页 |
·聚合物质子缓冲能力 | 第57-59页 |
·聚合物/DNA复合物的形貌 | 第59-63页 |
·时间分辨荧光研究 | 第63-67页 |
·本章小结 | 第67-68页 |
第四章 PDMAEMA-PMPDSAH共聚物作为基因载体的应用 | 第68-82页 |
·引言 | 第68-69页 |
·实验部分 | 第69-72页 |
·原料与试剂 | 第69页 |
·实验仪器 | 第69-70页 |
·PDMAEMA-PMPDSAH嵌段共聚物的合成 | 第70页 |
·聚合物的表征 | 第70页 |
·质粒DNA的提取过程 | 第70页 |
·聚合物/DNA复合物的制备 | 第70-71页 |
·聚合物/DNA复合物形貌观察 | 第71页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第71页 |
·Zeta电位和粒度测量 | 第71页 |
·毒性试验 | 第71-72页 |
·细胞转染 | 第72页 |
·荧光素酶活性测定 | 第72页 |
·BCA法测总蛋白含量 | 第72页 |
·结果与讨论 | 第72-81页 |
·PDMAEMA200-PMPDSAHx嵌段共聚物的合成及表征 | 第72-75页 |
·凝胶电泳实验 | 第75-76页 |
·聚合物/DNA复合物的形貌 | 第76-77页 |
·复合物的zeta电位及粒度 | 第77页 |
·细胞转染 | 第77-80页 |
·毒性实验 | 第80-81页 |
·本章小结 | 第81-82页 |
第五章 PDMAEMA-PMPDSAH载体介导基因转染的机理研究 | 第82-98页 |
·引言 | 第82页 |
·实验部分 | 第82-86页 |
·原料与试剂 | 第82-83页 |
·实验仪器 | 第83-84页 |
·PDMAEMA200-PMPC80嵌段共聚物的合成 | 第84页 |
·聚合物的结构表征 | 第84页 |
·质粒DNA的提取 | 第84页 |
·聚合物/DNA复合物的制备 | 第84页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第84-85页 |
·细胞转染 | 第85页 |
·荧光素酶活性测定 | 第85页 |
·BCA法测总蛋白含量 | 第85页 |
·细胞内化效率测定 | 第85页 |
·动态接触角测量 | 第85-86页 |
·差示扫描量热分析 | 第86页 |
·结果与讨论 | 第86-97页 |
·PDMAEMA200-PMPC80嵌段共聚物的合成 | 第86-88页 |
·凝胶电泳实验 | 第88-89页 |
·细胞转染 | 第89页 |
·聚合物/DNA复合物的细胞内化效果研究 | 第89-94页 |
·动态接触角测量 | 第94-95页 |
·聚合物与二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)的相互作用 | 第95-97页 |
·本章小结 | 第97-98页 |
第六章 全文结论 | 第98-100页 |
参考文献 | 第100-111页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第111-112页 |
致谢 | 第112页 |