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提高PDMAEMA/DNA复合物基因转染效率和血清稳定性的研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-10页
第一章 前言第10-37页
   ·概述第10页
   ·非病毒基因载体第10-19页
     ·阳离子脂质体(Liposome)第10-14页
     ·聚乙烯亚胺(PEI)第14-15页
     ·树枝状聚合物载体(Dendrimers)第15-17页
     ·聚赖氨酸(PLL)第17-18页
     ·聚甲基丙烯酸-N, N’-二甲氨基乙酯(PDMAEMA)第18-19页
   ·聚阳离子载体介导的基因转运过程及面临屏障第19-24页
     ·复合物的形成第20页
     ·复合物的血液输送稳定性第20-21页
     ·复合物穿越血管内皮层及细胞外基质第21页
     ·复合物的细胞摄取第21-23页
     ·复合物的内涵体逃逸第23页
     ·复合物的细胞质转运第23-24页
     ·细胞核定位第24页
   ·提高聚阳离子载体基因转运效率的方法第24-35页
     ·提高复合物的血液输送稳定性第24-28页
     ·靶向细胞转染第28-30页
     ·提高复合物逃离内涵体/溶酶体效果第30-32页
     ·提高基因物质细胞质释放效果第32-34页
     ·提高DNA的细胞核运输效果第34-35页
   ·课题的提出及研究内容第35-37页
第二章 星型PDMAEMA聚合物作为基因载体的应用第37-55页
   ·引言第37页
   ·实验部分第37-44页
     ·原料与试剂第37-38页
     ·实验仪器第38-39页
     ·星型PDMAEMA聚合物的合成第39页
     ·傅立叶变换红外光谱检测第39页
     ·凝胶渗透色谱检测第39页
     ·二硫键含量的测定第39-40页
     ·降解实验第40页
     ·菌体的培养与质粒DNA的提取第40-41页
     ·聚合物/DNA复合物的制备第41页
     ·聚合物/DNA复合物形貌第41-42页
     ·琼脂糖凝胶电泳第42页
     ·毒性试验第42-43页
     ·细胞转染第43页
     ·荧光素酶活性测定第43页
     ·BCA法测总蛋白第43-44页
   ·结果与讨论第44-54页
     ·星型聚合物的合成及结构表征第44-46页
     ·聚合物的分子量及其分布第46-48页
     ·星型聚合物的二硫键含量测定第48页
     ·星型聚合物降解性能考察第48-49页
     ·琼脂糖凝胶电泳第49-50页
     ·聚合物/DNA复合物的尺寸及形貌第50-51页
     ·细胞转染第51-53页
     ·细胞毒性第53-54页
   ·本章小结第54-55页
第三章 星形PDMAEMA载体介导基因转染的机理研究第55-68页
   ·引言第55页
   ·实验部分第55-57页
     ·原料与试剂第55-56页
     ·实验仪器第56页
     ·滴定实验第56页
     ·聚合物/DNA复合物的制备第56页
     ·聚合物/DNA复合物的形貌第56页
     ·时间分辨荧光分析第56-57页
   ·结果与讨论第57-67页
     ·聚合物质子缓冲能力第57-59页
     ·聚合物/DNA复合物的形貌第59-63页
     ·时间分辨荧光研究第63-67页
   ·本章小结第67-68页
第四章 PDMAEMA-PMPDSAH共聚物作为基因载体的应用第68-82页
   ·引言第68-69页
   ·实验部分第69-72页
     ·原料与试剂第69页
     ·实验仪器第69-70页
     ·PDMAEMA-PMPDSAH嵌段共聚物的合成第70页
     ·聚合物的表征第70页
     ·质粒DNA的提取过程第70页
     ·聚合物/DNA复合物的制备第70-71页
     ·聚合物/DNA复合物形貌观察第71页
     ·琼脂糖凝胶电泳第71页
     ·Zeta电位和粒度测量第71页
     ·毒性试验第71-72页
     ·细胞转染第72页
     ·荧光素酶活性测定第72页
     ·BCA法测总蛋白含量第72页
   ·结果与讨论第72-81页
     ·PDMAEMA200-PMPDSAHx嵌段共聚物的合成及表征第72-75页
     ·凝胶电泳实验第75-76页
     ·聚合物/DNA复合物的形貌第76-77页
     ·复合物的zeta电位及粒度第77页
     ·细胞转染第77-80页
     ·毒性实验第80-81页
   ·本章小结第81-82页
第五章 PDMAEMA-PMPDSAH载体介导基因转染的机理研究第82-98页
   ·引言第82页
   ·实验部分第82-86页
     ·原料与试剂第82-83页
     ·实验仪器第83-84页
     ·PDMAEMA200-PMPC80嵌段共聚物的合成第84页
     ·聚合物的结构表征第84页
     ·质粒DNA的提取第84页
     ·聚合物/DNA复合物的制备第84页
     ·琼脂糖凝胶电泳第84-85页
     ·细胞转染第85页
     ·荧光素酶活性测定第85页
     ·BCA法测总蛋白含量第85页
     ·细胞内化效率测定第85页
     ·动态接触角测量第85-86页
     ·差示扫描量热分析第86页
   ·结果与讨论第86-97页
     ·PDMAEMA200-PMPC80嵌段共聚物的合成第86-88页
     ·凝胶电泳实验第88-89页
     ·细胞转染第89页
     ·聚合物/DNA复合物的细胞内化效果研究第89-94页
     ·动态接触角测量第94-95页
     ·聚合物与二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)的相互作用第95-97页
   ·本章小结第97-98页
第六章 全文结论第98-100页
参考文献第100-111页
发表论文和参加科研情况说明第111-112页
致谢第112页

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