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水—沉积物界面细菌可培养性研究

摘要第1-7页
abstract第7-12页
第一章 绪论第12-20页
   ·微生物多样性研究第12-16页
     ·基于生化技术的方法第12-13页
     ·基于分子生物学技术的方法第13-16页
   ·微生物可培养性研究第16-18页
     ·不可培养微生物第16页
     ·活的非可培养(VBNC)状态细菌的检测技术第16-17页
     ·提高细菌可培养性的方法第17-18页
   ·水-沉积物界面细菌群落结构第18-19页
     ·水体富营养化第18-19页
     ·水-沉积物界面微生物第19页
   ·本研究的目的和意义第19-20页
第二章 材料与方法第20-34页
   ·样品来源第20页
   ·主要仪器设备第20页
   ·主要试剂及其配制第20-22页
   ·培养基、试剂盒及酶第22-23页
   ·样品理化性质测定第23页
   ·沉积物基因组DNA提取方法的优化第23-25页
     ·氯仿异戊醇法第23-24页
     ·蛋白酶K+SDS法第24页
     ·玻璃珠+蛋白酶K+SDS法第24页
     ·试剂盒法第24页
     ·基因组DNA的纯度检测及纯化第24-25页
     ·16S rRNA基因的PCR扩增第25页
   ·界面沉积物原始细菌群落结构研究第25-29页
     ·沉积物基因组DNA的提取第26页
     ·16S rRNA基因的PCR扩增和纯化第26页
     ·PCR产物与载体连接和转化第26-27页
     ·阳性克隆筛选第27-28页
     ·16S rRNA基因的限制性内切酶酶切分析第28页
     ·插入片段测序及序列比对第28页
     ·克隆文库的评估第28-29页
   ·基于PMA处理的界面沉积物细菌群落结构研究第29-30页
     ·PMA处理条件及对沉积物样品的处理第29页
     ·16S rRNA基因克隆文库的构建和分析第29-30页
   ·高通量测序法研究界面沉积物细菌群落结构第30-33页
     ·实验方案第30页
     ·分析方法第30-33页
   ·依赖于培养的界面沉积物细菌种群研究第33-34页
     ·菌悬液的制备第33页
     ·分离培养方法第33页
     ·16S r RNA基因的PCR扩增第33页
     ·基因测序和比对分析第33-34页
第三章 结果与讨论第34-76页
   ·沉积物样品理化性质第34页
   ·沉积物基因组DNA的提取第34-37页
     ·提取DNA的电泳检测结果第34-35页
     ·提取的DNA纯度第35-36页
     ·提取DNA的 16S r RNA基因PCR扩增应用结果第36-37页
   ·界面沉积物原始细菌群落结构第37-44页
     ·基因组DNA及其电泳检测结果第37页
     ·16S rRNA基因PCR扩增和纯化第37-38页
     ·16S rRNA基因克隆文库第38页
     ·16S rRNA基因的限制性内切酶酶切分型结果第38-41页
     ·文库评估结果第41页
     ·基因型代表克隆序列测定和比对结果第41-44页
     ·讨论第44页
   ·基于PMA处理的界面沉积物细菌群落结构第44-53页
     ·PMA处理条件的优化结果第45-48页
     ·16S rRNA基因克隆文库构建及阳性克隆筛选第48页
     ·16S rRNA基因的限制性内切酶酶切分型结果第48-50页
     ·文库评估结果第50-51页
     ·基因型代表克隆序列测定和比对结果第51-52页
     ·讨论第52-53页
   ·16S r RNA V3-V4区序列高通量测序结果第53-69页
     ·序列的质量控制第53页
     ·去除嵌合体及靶区域外序列第53-54页
     ·操作分类单元(OTU)分类第54页
     ·物种分类单元第54-60页
     ·种群组成分析和比较第60-67页
     ·Alpha多样性第67-68页
     ·讨论第68-69页
   ·依赖于培养的界面沉积物细菌组成第69-74页
     ·菌种分离结果第69-70页
     ·系统发育地位及组成第70-72页
     ·讨论第72-74页
   ·界面沉积物细菌可培养性特征分析第74-76页
第四章 结论第76-78页
参考文献第78-84页
致谢第84-85页
个人简历第85页

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