| 摘要 | 第1-17页 |
| Abstract | 第17-24页 |
| 前言 | 第24-26页 |
| 动物、材料与主要仪器 | 第26-29页 |
| （一）LY333531 抑制 PKCβ磷酸化对肠缺血再灌注远隔肝肺损伤的保护作用 | 第29-46页 |
| 材料和方法 | 第30-35页 |
| 1. 实验动物 | 第30页 |
| 2. 实验分组 | 第30页 |
| 3. 小鼠肠缺血再灌注损伤模型的建立 | 第30页 |
| 4. 检测指标 | 第30-34页 |
| ·组织病理学检测 | 第31-32页 |
| ·血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、 白细胞介素-6（IL-6）、TNF-α检测 | 第32页 |
| ·肝肺组织 H_2O_2含量测定 | 第32页 |
| ·肝肺组织还原型谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶 （GSH-PX）、髓过氧化物酶（MPO）活性测定 | 第32-33页 |
| ·肝肺组织丙二醛(MDA)检测 | 第33页 |
| ·肝肺组织脱氧核糖核酸转移酶原位末端标记（TUNEL）凋亡检测 | 第33页 |
| ·Western Blot检测肝和肺组织PKC家族蛋白、phospho-PKCβII、锰超氧化物歧化酶（MnSOD）、cleaved-caspase-3 蛋白水平变化 | 第33-34页 |
| 5．统计学处理 | 第34-35页 |
| 结果 | 第35-43页 |
| 1. PKCβII 在小肠 I/R 后肝肺组织中激活 | 第35-36页 |
| 2. LY333531 抑制 PKCβII 的膜转位及磷酸化 | 第36-37页 |
| 3. 组织病理学分析 | 第37-38页 |
| 4. LY333531 预处理改善血清 ALT、AST、TNF-α和 IL-6 水平及肝 肺 MPO 活性 | 第38-40页 |
| 5. LY333531 预处理改善肝肺组织 GSH、GSH-PX 活性 | 第40页 |
| 6. LY333531 预处理改善肝肺组织 H_(2)O_(2)、MDA 水平 | 第40-41页 |
| 7. LY333531 预处理降低小肠 I/R 引起的肝肺组织的细胞凋亡 | 第41-42页 |
| 8. LY333531 预处理改善小肠 I/R 相关抗氧化因子和促凋亡因子的表达 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| （二）抑制 PKCβ依赖的 p66shc 磷酸化保护肠缺血再灌注远隔器官损伤 | 第46-58页 |
| 材料和方法 | 第47-51页 |
| 1. 实验材料 | 第47页 |
| ·实验用细胞株 | 第47页 |
| ·实验动物及分组 | 第47页 |
| 2. 实验方法 | 第47-51页 |
| ·细胞培养及 H_(2)O_(2)损伤模型构建 | 第47-48页 |
| ·Western blot 检测肝肺组织磷酸化 p66shc、总 p66shc、磷酸化 PKCβII、总 PKCβII、细胞色素 C 蛋白水平变化 | 第48-49页 |
| ·RNA 干扰及 PMA 处理 | 第49页 |
| ·流式细胞仪测定 L02 和 A549 细胞凋亡 | 第49-50页 |
| ·Caspase-3 活性检测 | 第50页 |
| ·免疫共沉淀法检测 p66shc 和细胞色素 C 相互作用 | 第50-51页 |
| 3. 统计学处理 | 第51页 |
| 结果 | 第51-55页 |
| 1. LY333531 对小肠 I/R 后肝肺组织 p66shc 激活的影响 | 第51页 |
| 2. RNA 干扰 PKCβII 表达对 p66shc 磷酸化的影响 | 第51-52页 |
| 3. RNAi 对 p66shc 表达对 caspase-3 活性及细胞凋亡的影响 | 第52-53页 |
| 4. LY333531 预处理对 p66shc 的线粒体转位的影响 | 第53-54页 |
| 5. LY333531 预处理对 p66shc 与细胞色素 C 的结合的影响 | 第54页 |
| 6. LY333531 预处理对细胞色素 C 释放的影响 | 第54-55页 |
| 讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| （三）原儿茶酸调控 p66shc 磷酸化对小肠缺血再灌注多器官损伤的保护作用 | 第58-70页 |
| 材料和方法 | 第59-61页 |
| 1. 实验动物 | 第59页 |
| 2. 实验方法 | 第59-61页 |
| ·实验分组及小鼠小肠 I/R 模型的建立 | 第59页 |
| ·小肠和肝组织病理学检测 | 第59页 |
| ·血清指标检测 | 第59-60页 |
| ·小肠和肝组织还原型谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性测定 | 第60页 |
| ·Western blot 测定小肠和肝脏组织中 p66shc、NF-κB、Foxo3a、MnSOD、cleaved-caspase-3、Bcl-xL 蛋白表达水平 | 第60页 |
| ·反转录-聚合酶链式反应（reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR）测定 p66shc mRNA 水平 | 第60-61页 |
| 3.统计学处理 | 第61页 |
| 结果 | 第61-67页 |
| 1. 组织病理学检测 | 第61-63页 |
| 2. 血清 ALT 和 AST 水平检测 | 第63页 |
| 3. 血清 IL-6 和 TNF-α水平检测 | 第63-64页 |
| 4. 小肠和肝脏组织 NF-κB p65 蛋白表达水平检测 | 第64页 |
| 5. 小肠和肝脏 GSH 和 GSH-PX 酶活力检测 | 第64-65页 |
| 6. 小肠和肝脏 p66shc 表达水平的检测 | 第65-66页 |
| 7. 小肠和肝脏氧化应激及细胞凋亡相关因子表达水平检测 | 第66-67页 |
| 讨论 | 第67-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 综述 | 第76-94页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 附录 | 第94-95页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
