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利用GST-pull down方法筛查PAD4相互作用蛋白的初步研究

导师简介第1页
课题小组主要成员第5-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
主要符号表第12-13页
第一章 前言第13-20页
 1 肽酰基精氨酸脱亚胺酶Ⅳ(PAD4)第13-16页
 2 GST pull-down第16-18页
 3 融合蛋白可溶性表达第18-20页
第二章 TNF-α诱导的 PAD4 蛋白在 HL-60 细胞中核转移现象观察第20-26页
 1 材料第20-21页
   ·试剂第20页
   ·仪器第20-21页
 2 研究方法第21-24页
   ·HL-60 细胞复苏与培养第21页
   ·TNF-α处理 HL-60 细胞第21页
   ·Western Blot 分析第21-24页
 3 实验结果第24页
 4 讨论第24-26页
第三章 GST-PAD4、GST-PAD4-NLS-融合蛋白纯化第26-42页
 1 材料第26-27页
   ·菌株与载体第26页
   ·试剂第26页
   ·仪器第26-27页
 2 实验方法第27-33页
   ·重组表达载体 GST-PAD4 阳性单克隆筛选第27-28页
   ·GST-PAD4 融合蛋白试表达第28-29页
   ·GST-PAD4 融合蛋白可溶性表达条件优化第29-32页
   ·融合蛋白 GST-PAD4 的纯化第32-33页
   ·融合蛋白 GST-PAD4-NLS-纯化第33页
 3 结果分析第33-40页
   ·融合蛋白 GST-PAD4 的试表达第33-34页
   ·温度对融合蛋白 GST-PAD4 可溶性的影响第34-35页
   ·IPTG 浓度对融合蛋白 GST-PAD4 可溶性的影响第35-37页
   ·菌液 OD_600值对融合蛋白 GST-PAD4 可溶性影响第37-38页
   ·诱导时间对融合蛋白 GST-PAD4 可溶性影响第38-39页
   ·融合蛋白 GST-PAD4、GST-PAD4-NLS-纯化第39-40页
 4 讨论第40-42页
第四章 GST pull-down 方法初步筛查 PAD4 相互作用蛋白第42-48页
 1 材料第42-43页
   ·试剂第42页
   ·仪器第42-43页
 2 实验方法第43-45页
   ·GST-PAD4、GST-PAD4-NLS-蛋白固化第43页
   ·目的蛋白的捕获第43-44页
   ·银氨染色第44-45页
 3 结果分析第45-47页
   ·GST-PAD4、GST-PAD4-NLS-蛋白固化第45页
   ·蛋白免疫印迹检测 PAD4 表达第45-46页
   ·GST pull-down 方法初步筛查与 PAD4 相互作用蛋白第46-47页
 4 讨论第47-48页
参考文献第48-54页
附录第54-57页
综述第57-67页
 参考文献第64-67页
硕士期间发表的文章第67-68页
致谢第68页

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