| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-16页 |
| ·葡聚糖酶的研究概况 | 第10页 |
| ·葡聚糖酶的应用 | 第10-12页 |
| ·生防菌防治水果采摘后病害的生防机理的研究 | 第12-14页 |
| ·研究目的与意义 | 第14-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-23页 |
| ·实验材料 | 第16-17页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·试剂盒及化学试剂 | 第16页 |
| ·引物 | 第16页 |
| ·数据库和生物软件 | 第16-17页 |
| ·培养基和主要仪器 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-23页 |
| ·酵母菌 SRF 对 Penecillium expansum 的体外生防实验 | 第17页 |
| ·葡聚糖酶基因的克隆与表达 | 第17-18页 |
| ·酵母基因 DNA 的提取及检测 | 第17页 |
| ·葡聚糖酶基因的亚克隆 | 第17页 |
| ·葡聚糖酶基因的克隆 | 第17-18页 |
| ·葡聚糖酶蛋白诱导表达与活性检测 | 第18页 |
| ·异常毕赤酵母（P.anomala SRF）单倍体菌株的获得 | 第18-20页 |
| ·异常毕赤酵母菌的活化 | 第18页 |
| ·子囊孢子的诱导 | 第18-19页 |
| ·子囊孢子诱导体系的优化 | 第19页 |
| ·子囊孢子的观察 | 第19页 |
| ·子囊孢子分离和单倍体的获得 | 第19-20页 |
| ·单倍体生长曲线的绘制 | 第20页 |
| ·葡聚糖酶基因敲除载体的构建以及原生质体的转化 | 第20-23页 |
| ·敲除载体的构建过程 | 第20页 |
| ·上下臂引物的设计 | 第20页 |
| ·敲除载体的构建 | 第20-21页 |
| ·重组敲除载体原生质体转化 | 第21-23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-37页 |
| ·异常毕赤酵母 SRF 对苹果果实采后靑霉病的防治效果 | 第23-24页 |
| ·异常毕赤酵母 SRF 对苹果采后青霉病 Penicillium 抑菌圈 | 第23页 |
| ·异常毕赤酵母 SRF 对苹果采后青霉病防治效果 | 第23-24页 |
| ·SRF 葡聚糖酶基因的克隆与表达 | 第24-29页 |
| ·SRF 基因组 DNA 提取电泳检测 | 第24页 |
| ·SRF 葡聚糖酶基因的克隆 | 第24页 |
| ·菌株 SRF 葡聚糖酶基因序列及其编码蛋白的特性 | 第24-28页 |
| ·Glucanase 蛋白的原核表达载体表达 | 第28-29页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第28页 |
| ·目的蛋白在原核中的诱导表达 | 第28-29页 |
| ·表达产物的活性检测 | 第29页 |
| ·单倍体菌株的获得 | 第29-33页 |
| ·不同的预培养时间对毕赤酵母菌产孢的影响 | 第29-30页 |
| ·不同的诱导培养基对毕赤酵母产孢能力的影响 | 第30页 |
| ·不同预培养温度对异常毕赤酵母产孢的影响 | 第30-31页 |
| ·KCl 和 NaAc 对毕赤酵母产孢率的影响 | 第31-32页 |
| ·酵母的孢子及其单倍体 | 第32-33页 |
| ·单倍体的生长曲线 | 第33页 |
| ·葡聚糖酶基因 Glucanase 的敲除 | 第33-36页 |
| ·同源上下臂的克隆 | 第33-34页 |
| ·同源臂与载体的融合 | 第34-35页 |
| ·敲除载体的酶切验证 | 第35-36页 |
| ·原生质体转化及敲除子的鉴定 | 第36-37页 |
| 4 结论与讨论 | 第37-40页 |
| ·SRF 对苹果果实采后靑霉病的防治的研究 | 第37页 |
| ·SRF 葡聚糖酶基因的克隆与表达 | 第37-38页 |
| ·单倍体菌株的获得的研究 | 第38页 |
| ·葡聚糖酶基因 Glucanase 的敲除 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 附录 | 第44-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简介 | 第48-49页 |
| 导师简介 | 第49页 |
