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嗜水气单胞菌FNR基因克隆表达的初步研究

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
1 前言第11-23页
   ·我国鱼病目前现状及鱼病防治第11-13页
     ·鱼病现状第11-12页
     ·鱼病的防治第12页
     ·鱼类鱼病防治工作重要性及存在的问题第12-13页
   ·嗜水气单胞菌概述第13-15页
     ·嗜水气单胞菌的菌落形态及培养特征第13-14页
     ·嗜水气单胞菌的生理生化特性第14-15页
   ·目前嗜水气单胞菌防治的主要方法和手段第15-16页
     ·化学杀菌剂治疗第15页
     ·抗菌素治疗第15页
     ·微生态制剂治疗第15-16页
     ·疫苗治疗第16页
     ·中草药复合制剂治疗第16页
   ·延胡索酸硝酸盐还原调控蛋白(FNR)介绍第16-22页
     ·FNR的结构第17-18页
     ·FNR的调控机制第18-20页
     ·FNR突变体研究第20页
     ·不同细菌FNR基因组比较第20-22页
   ·本研究立题依据和研究内容第22-23页
     ·依据和目的第22页
     ·研究内容第22-23页
2 实验材料与方法第23-30页
   ·实验材料第23-24页
     ·菌株和质粒第23页
     ·化学试剂,抗菌素及其配方第23页
     ·实验常用的工具酶及试剂盒第23页
     ·常用贮存液第23页
     ·培养基第23-24页
     ·常用缓冲液及配方第24页
   ·实验方法第24-30页
     ·嗜水气单胞菌培养第24页
     ·嗜水气单胞菌基因组的提取第24-25页
     ·FNR基因引物设计及PCR扩增第25页
     ·DNA片段的回收第25-26页
     ·DNA限制性内切酶酶切反应第26页
     ·DNA片段的连接第26-27页
     ·E.coli感受态细胞的制备和转化第27-28页
     ·质粒DNA的提取第28页
     ·重组质粒的鉴定第28页
     ·重组质粒的转化第28页
     ·蛋白质的原核表达第28-29页
     ·表达产物的SDS-PAGE分析第29页
     ·目的蛋白的大量制备第29-30页
3 实验结果与分析第30-39页
   ·嗜水气单胞菌培养及基因组的提取第30页
   ·PCR扩增嗜水气单胞菌的FNR第30-31页
   ·重组克隆载体pMD-FNR的构建第31-32页
   ·重组克隆载体pMD-FNR的鉴定第32页
   ·嗜水气单胞菌FNR DNA的测序结果与分析第32-34页
   ·嗜水气单胞菌FNR重组表达载体pET-FNR的构建及鉴定第34-36页
   ·嗜水气单胞菌FNR在E.coli中的表达第36-39页
     ·FNR表达条件的确定第36-38页
     ·FNR的大规模表达与SDS-PAGE分析第38-39页
4 讨论第39-41页
5 小结第41-42页
参考文献第42-47页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第47-48页
致谢第48页

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