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伏令夏橙胚性愈伤组织及其体细胞胚发生的表达谱分析

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略词表第13-14页
实验材料第14-15页
第一章 文献综述第15-35页
   ·前言第15-16页
   ·体细胞胚发生和合子胚发生机制比较第16-17页
   ·体细胞胚发生过程中胚性能力的获得第17-18页
     ·基因型对胚性能力获得的影响第17页
     ·具有胚性能力细胞的细胞学特征第17-18页
   ·体细胞胚发生过程中胚性能力的维持和体细胞胚形成和发育的分子调控第18-29页
     ·转录因子在体细胞胚发生过程中的调控作用第22-24页
       ·LECs调控网络在体细胞胚发生中的作用第22页
       ·AGL15基因直接调控编码B3 domain基因第22-23页
       ·Homeodomain转录因子第23-24页
       ·其他转录因子第24页
     ·体细胞胚发生过程中的信号转导第24-26页
       ·体细胞胚发生类受体蛋白激酶第24-25页
       ·钙调素介导的信号转导第25-26页
     ·体细胞胚发生过程中受激素调控的基因第26-28页
       ·体细胞胚发生过程中生长素的调控第26-27页
       ·体细胞胚发生过程中ABA的调控第27-28页
     ·体细胞胚发生过程中胁迫诱导的基因第28-29页
   ·体细胞胚发生的蛋白组学研究进展第29-30页
   ·柑橘体细胞胚发生研究进展第30-33页
     ·影响柑橘体细胞胚发生的重要因素第30-32页
       ·基因型对柑橘体细胞胚发生的影响第31页
       ·外植体对柑橘体细胞胚发生的影响第31页
       ·培养基成分对柑橘体细胞胚发生的影响第31-32页
     ·控制柑橘体细胞胚发育的分子机理第32-33页
   ·SSH技术和基因芯片在植物生物学研究中的应用第33页
   ·本研究的目的和内容第33-35页
     ·本研究的目的第33-34页
     ·本研究的主要内容第34-35页
第二章 柑橘体细胞胚发生的形态学和细胞学第35-43页
   ·引言第35页
   ·材料与方法第35-36页
     ·实验材料的获得和保存第35-36页
     ·实验方法第36页
       ·伏令夏橙体细胞胚发生的组织学分析第36页
       ·伏令夏橙体细胞胚发生的扫描电镜观察第36页
       ·伏令夏橙体细胞胚发生的超微结构观察第36页
   ·结果与分析第36-40页
     ·非胚性愈伤组织的诱导和胚性愈伤组织体细胞胚发生第36-37页
     ·胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织的细胞排列方式第37-39页
     ·胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织的细胞超微结构观察第39-40页
   ·讨论第40-43页
     ·柑橘胚性愈伤和非胚性愈伤的细胞特征差异第40-41页
     ·柑橘体细胞胚发生过程中与物质和能量代谢有关的细胞学变化第41-42页
     ·胞间连丝形成的协同区域在柑橘体细胞胚发生中的作用第42页
     ·生理隔离在柑橘体细胞胚发生中的作用第42-43页
第三章 伏令夏橙体细胞胚发生相关基因的表达谱分析第43-71页
   ·引言第43-44页
   ·材料和方法第44-51页
     ·实验材料第44页
     ·实验方法第44-51页
       ·RNA的提取第44页
       ·mRNA的分离第44页
       ·SSH差减文库的构建第44-49页
       ·差减文库的Microarray杂交筛选第49-50页
       ·测序及生物信息学分析第50页
       ·RT-PCR和qRT-PCR表达分析第50-51页
   ·结果与分析第51-64页
     ·差减杂交的实验设计第51页
     ·RNA质量检测及mRNA分离第51页
     ·双链cDNA合成与酶切反应第51-52页
     ·差减文库接头连接及连接效率检测第52页
     ·差减文库第二次PCR产物检测第52页
     ·差减效率检测第52-54页
     ·差减文库克隆检测第54页
     ·基因芯片筛选第54-55页
       ·RNA质量检测第54-55页
       ·杂交筛选第55页
     ·生物信息学分析第55-64页
       ·EST序列分析第55-56页
       ·芯片结果的qRT-PCR验证第56-57页
       ·差异基因的表达谱分析第57-59页
       ·转录因子在体细胞胚发生过程中的表达分析第59-64页
       ·基因在具有不同胚胎发生能力的柑橘愈伤组织品种中的表达第64页
   ·讨论第64-71页
     ·柑橘体细胞胚性能力维持和体细胞胚诱导过程中的重要事件第66页
     ·转录因子在柑橘体细胞胚性能力维持和体细胞胚诱导过程中的作用第66-67页
     ·与细胞核调控有关的基因在胚性能力维持中的作用第67-68页
     ·与信号转导过程有关的基因在体细胞胚诱导和发育中的作用第68-69页
     ·胁迫相关基因在柑橘体细胞胚发生、诱导和发育中的作用第69-71页
第四章 柑橘CsLEC1和CsHB4基因克隆及表达研究第71-91页
   ·前言第71页
   ·材料和方法第71-75页
     ·实验材料第71-72页
     ·实验方法第72-75页
       ·CsLEC1和CsHB4基因的cDNA克隆第72-73页
       ·CsLEC1和CsHB4基因DNA全长的克隆第73-74页
       ·CsLEC1和CsHB4基因生物信息学分析第74页
       ·CsLEC1和CsHB4基因Southern拷贝数分析第74页
       ·CsLEC1和CsHB4基因的qRT-PCR表达分析第74-75页
       ·SSR扩增及PAGE电泳第75页
   ·结果与分析第75-89页
     ·CsLEC1和CsHB4基因cDNA和DNA全长的克隆第75-78页
     ·CsLEC1和CsHB4基因的序列分析第78-82页
       ·CsLEC1和CsHB4基因的结构域分析第78页
       ·CsLEC1和CsHB4氨基酸序列比对分析第78-82页
     ·CsLEC1和CsHB4基因的表达分析第82-83页
     ·CsLEC1和CsHB4基因的拷贝数分析第83页
     ·CsLEC1和CsHB4基因的SSR位点分析第83-84页
     ·CsLEC1和CsHB4基因在四个柑橘品种中的序列分析第84-89页
   ·讨论第89-90页
     ·CsLEC1基因的表达模式与体细胞胚发生的关系第89页
     ·CsHB4基因的表达模式与体细胞胚发生的关系第89-90页
   ·展望第90-91页
第五章 柑橘体细胞胚发生类受体蛋白激酶CitSERK1-like基因的表达分析第91-107页
   ·引言第91-92页
   ·材料和方法第92-95页
     ·实验材料第92页
     ·实验方法第92-95页
       ·CitSERK1-like基因cDNA全长的克隆第92页
       ·CitSERK1-like基因DNA全长的克隆第92-93页
       ·CitSERK1-like基因生物信息学分析第93页
       ·原核表达载体pET-CitSERK1-like构建和表达产物的SDS-PAGE检测第93页
       ·CitSERK1-like基因的拷贝数分析第93-94页
       ·CitSERK1-like基因表达分析第94-95页
   ·结果与分析第95-104页
     ·CitSERK1-like基因克隆和序列分析第95-100页
     ·CitSERK1-like基因的原核表达分析第100-101页
     ·CitSERK1-like基因Southern杂交分析第101页
     ·CitSERK1-like基因时空表达分析第101-104页
     ·激素处理条件下对CitSERK1-like基因表达的影响第104页
   ·讨论第104-106页
     ·CitSERK1-like基因的序列分析第104-105页
     ·CitSERK1-like基因的时空表达模式第105页
     ·生长类激素对CitSERK1-like基因表达的影响第105-106页
   ·小结第106-107页
参考文献第107-127页
博士期间发表的论文第127-128页
致谢第128页

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