| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1. 文献综述 | 第12-22页 |
| ·果实成熟概论 | 第12-13页 |
| ·跃变型果实发育成熟研究进展 | 第13-15页 |
| ·跃变型果实发育成熟与乙烯 | 第13页 |
| ·跃变型果实成熟过程的转录调控 | 第13-15页 |
| ·通过化学方法和遗传方法调控乙烯反应来提高产品的农艺性状 | 第15页 |
| ·植物NAC基因研究进展 | 第15-19页 |
| ·植物NAC基因的结构特点 | 第15-17页 |
| ·植物NAC基因的表达、调控及其作用 | 第17-18页 |
| ·NAC蛋白的结构和功能机制 | 第18-19页 |
| ·种子的细胞学研究进展 | 第19页 |
| ·酵母双杂交的研究进展 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-36页 |
| ·番茄材料 | 第22页 |
| ·生物信息学分析,保守结构域分析,构建基因进化树 | 第22页 |
| ·转录激活活性分析 | 第22-23页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·转录激活活性分析 | 第23页 |
| ·逆境相关反应 | 第23-25页 |
| ·种子发芽实验 | 第23页 |
| ·幼苗不同胁迫处理 | 第23-24页 |
| ·果实不同胁迫处理 | 第24页 |
| ·种子RNA的提取 | 第24页 |
| ·幼苗叶片、果实RNA的提取以及目的基因的RT-PCR | 第24-25页 |
| ·表达载体构建和遗传转化 | 第25-26页 |
| ·候选基因的引物设计 | 第25页 |
| ·候选基因的克隆、测序分析 | 第25页 |
| ·干涉和超量表达载体的构建和番茄的遗传转化 | 第25-26页 |
| ·转基因番茄植株的PCR阳性检测 | 第26页 |
| ·目标蛋白的亚细胞定位分析 | 第26-27页 |
| ·仪器和菌株 | 第26-27页 |
| ·引物设计 | 第27页 |
| ·亚细胞定位载体构建及转化 | 第27页 |
| ·目的基因的REAL-TIME RT-PCR表达分析 | 第27-28页 |
| ·生理指标检测 | 第28-30页 |
| ·果实开花后成熟的时间统计 | 第28页 |
| ·花粉活性比较 | 第28页 |
| ·果实呼吸速率的检测 | 第28页 |
| ·果实乙烯释放的测定 | 第28-29页 |
| ·果实硬度的检测 | 第29页 |
| ·果实可溶性固形物的检测 | 第29页 |
| ·HPLC测定果实类胡萝卜素成分 | 第29-30页 |
| ·石蜡切片 | 第30-31页 |
| ·透射电镜分析 | 第31页 |
| ·芯片杂交 | 第31-33页 |
| ·番茄材料RNA的提取 | 第31页 |
| ·芯片材料样品荧光标记 | 第31-32页 |
| ·芯片杂交扫描及图像采集、数据分析 | 第32页 |
| ·芯片结果的生物学分析 | 第32页 |
| ·芯片结果的生物信息学分析 | 第32-33页 |
| ·酵母双杂交 | 第33-36页 |
| ·菌株和质粒 | 第33页 |
| ·试剂盒,试剂以及仪器 | 第33页 |
| ·引物合成及序列测定 | 第33-34页 |
| ·pGBKT7钓饵载体的构建 | 第34页 |
| ·酵母的转化及MATING | 第34-36页 |
| 3 实验结果和分析 | 第36-61页 |
| ·目的基因保守结构域分析 | 第36-37页 |
| ·基因进化树分析 | 第37-38页 |
| ·目的基因转录激活活性分析 | 第38页 |
| ·SLNAC3的亚细胞定位分析 | 第38-39页 |
| ·SLNAC3的表达分析 | 第39-43页 |
| ·SlNAC3组织表达谱 | 第39-40页 |
| ·SlNAC3在AC不同发育阶段和发芽不同时期种子中的表达 | 第40-41页 |
| ·SlNAC3在AC幼苗不同胁迫处理及处理不同时间后的表达 | 第41-42页 |
| ·SlNAC3在AC绿熟期果实不同胁迫处理及处理不同时间后的表达 | 第42-43页 |
| ·转基因植株阳性PCR检测 | 第43页 |
| ·转基因番茄表型比较 | 第43-45页 |
| ·转基因材料的生理指标测定 | 第45-50页 |
| ·转基因材料花粉活力测定 | 第45页 |
| ·转基因材料果实成熟时间比较 | 第45-46页 |
| ·转基因材料果实呼吸速率的检测 | 第46-47页 |
| ·转基因材料果实乙烯释放的测定 | 第47-48页 |
| ·转基因材料果实硬度的检测 | 第48-49页 |
| ·转基因番茄果实可溶性固形物的检测 | 第49页 |
| ·果实类胡萝卜素成分比较 | 第49-50页 |
| ·种子组织表达分析 | 第50-52页 |
| ·种子石蜡切片分析 | 第50-51页 |
| ·种子透射电镜分析 | 第51-52页 |
| ·芯片杂交 | 第52-57页 |
| ·果实成熟相关基因的对比归类分析 | 第52-54页 |
| ·差异表达基因在分子组成、分子功能和生物学进程中的分类 | 第54-56页 |
| ·受果实成熟调控的生化代谢途径 | 第56-57页 |
| ·酵母双杂交 | 第57-61页 |
| ·SlNAC3基因的克隆 | 第57-58页 |
| ·MATING"钓饵"的构建 | 第58-59页 |
| ·文库"钓饵"的生成 | 第59页 |
| ·双杂交阳性菌落凝胶电泳检测 | 第59-60页 |
| ·钓取的序列信息分析 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-66页 |
| ·番茄果实成熟与SLNAC3基因的功能 | 第61-62页 |
| ·番茄类胡萝卜素合成与SLNAC3基因的功能 | 第62-63页 |
| ·番茄果实的软化与SLNAC3基因的功能 | 第63-64页 |
| ·番茄种子发育与SLNAC3基因的功能 | 第64页 |
| ·小结以及关于后续工作的设想 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-79页 |
| 附录 | 第79-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
