| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 技术路线 | 第16-17页 |
| 第一部分 IL-4在γδT细胞活化和增殖过程中的作用 | 第17-40页 |
| 实验材料 | 第17-21页 |
| 一、血液样本的收集 | 第17页 |
| 二、主要实验试剂 | 第17-19页 |
| 三、溶液配制 | 第19-20页 |
| 四、仪器和设备 | 第20-21页 |
| 实验方法 | 第21-28页 |
| 一、人外周血γδT细胞的培养及鉴定 | 第21-22页 |
| (一) Vδ1T细胞和Vδ2T细胞的培养 | 第21页 |
| (二) Vδ1T细胞和Vδ2T细胞的鉴定 | 第21-22页 |
| 二、细胞培养上清中的细胞因子检测 | 第22-23页 |
| 三、γδT细胞活化的信号分子检测 | 第23-26页 |
| 四、在γδT细胞中干扰Stat6表达 | 第26-27页 |
| 五、IL-4对于γδT细胞活化时胞内Ca~(2+)水平的影响 | 第27-28页 |
| 实验结果 | 第28-40页 |
| 一、IL-4抑制Vδ1T细胞的活化 | 第28页 |
| 二、IL-4抑制帕米磷酸钠引起的Vδ2T细胞活化 | 第28-29页 |
| 三、IL-4显著抑制γδT细胞活化对IFNγ等细胞因子的分泌 | 第29-30页 |
| 四、IL-4促进已活化的Vδ1T细胞增殖 | 第30-31页 |
| 五、IL-4促进已活化Vδ2T细胞的增殖 | 第31页 |
| 六、Vδ1T细胞和Vδ2T细胞表面CD124和CD210的表达 | 第31-32页 |
| 七、Vδ1T细胞和Vδ2T细胞活化时的信号分子磷酸化水平检测 | 第32-37页 |
| 八、IL-4抑制T细胞活化的作用机制研究 | 第37-39页 |
| 九、RNAi技术敲除Stat6验证 | 第39-40页 |
| 第二部分 IL-4促使γδT细胞群体向Vδ1T细胞亚群偏倚的作用及其生物学意义 | 第40-72页 |
| 实验材料 | 第40-46页 |
| 一、血液样本的收集及细胞培养 | 第40页 |
| 二、主要实验试剂 | 第40-43页 |
| 三、溶液配制 | 第43-45页 |
| 四、仪器和设备 | 第45-46页 |
| 实验方法 | 第46-54页 |
| 一、人外周血γδT细胞的培养 | 第46页 |
| 二、阴选或阳选Vδ1T细胞及Vδ2T细胞 | 第46-47页 |
| 三、Vδ1T细胞和Vδ2T细胞鉴定 | 第47页 |
| 四、γδT细胞培养上清中细胞因子检测 | 第47-48页 |
| 五、γδT细胞培养上清中多种细胞因子检测 | 第48-49页 |
| 六、细胞表面分子的免疫荧光染色 | 第49页 |
| 七、γδT细胞中细胞因子和核内Foxp3检测 | 第49-50页 |
| 八、Vδ1T细胞和Vδ2T细胞核内T-bet、Gata3和Stat6检测 | 第50页 |
| 九、γδT-细胞杀伤肿瘤细胞实验 | 第50-52页 |
| 十、Vδ1T细胞抑制Vδ2T细胞增殖实验 | 第52-54页 |
| 实验结果 | 第54-72页 |
| 一、IL-4促使γδT细胞向Vδ1T细胞偏倚及作用机制研究 | 第54-60页 |
| (一) IL-4促使γδT细胞向Vδ1T细胞偏倚 | 第54-55页 |
| (二) IL-4通过IL-10介导其抑制Vδ2T细胞生长的作用 | 第55-57页 |
| (三) IL-4对于活化Vδ1T细胞和Vδ2T细胞表面CD124和CD210表达的影响 | 第57-58页 |
| (四) Vδ1T细胞活化时分泌的IL-10介导了IL-4抑制Vδ2T生长的作用 | 第58-59页 |
| (五) Vδ1T细胞不是抑制Vδ2T细胞活化的主要原因 | 第59-60页 |
| 二、IL-4促使γδT细胞群体向Vδ1T细胞偏倚的生物学意义 | 第60-72页 |
| (一) Vδ1T细胞和Vδ2T细胞的细胞因子分泌特征 | 第60-61页 |
| (二) Vδ1T细胞和Vδ2T细胞表型比较以及IL-4对γδT细胞表型的影响 | 第61-67页 |
| (三) Vδ1T细胞和Vδ2T细胞的特异性转录因子和信号分子检测 | 第67-70页 |
| (四) Vδ1T细胞抑制Vδ2T细胞生长以及两种细胞的杀伤功能比较 | 第70-72页 |
| 讨论 | 第72-78页 |
| 全文结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-81页 |
| 文献综述 | 第81-88页 |
| Reference | 第85-88页 |
| 个人简历 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
