| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 英文缩略词表 | 第13-17页 |
| 前言 | 第17-22页 |
| 第一部分 TCRγδ及NKG2D活化γδT细胞杀伤功能研究 | 第22-46页 |
| 材料 | 第22-26页 |
| 一、细胞系和培养基 | 第22页 |
| 二、血液样本的采集 | 第22页 |
| 三、实验试剂 | 第22-23页 |
| 四、试剂盒 | 第23页 |
| 五、抗体 | 第23页 |
| 六、试剂配制 | 第23-25页 |
| 七、实验耗材 | 第25页 |
| 八、仪器设备 | 第25-26页 |
| 方法 | 第26-34页 |
| 一、γδT细胞的体外扩增及表型检测方法 | 第26-27页 |
| 二、流式细胞术检测肿瘤细胞细胞膜上Fas受体表达 | 第27页 |
| 三、P815重导向杀伤实验 | 第27-29页 |
| 四、杀伤封闭实验 | 第29-30页 |
| 五、酶联免疫吸附试验 | 第30-31页 |
| 六、阴选γδT细胞的获得 | 第31-32页 |
| 七、流式细胞术检测γδT细胞表面CD107a表达 | 第32-33页 |
| 八、Confocal检测裂解性颗粒极化 | 第33-34页 |
| 结果 | 第34-46页 |
| 一、抗体固相化扩增γδT细胞亚型分析 | 第34页 |
| 二、γδT细胞杀伤肿瘤细胞主要依赖于穿孔素-颗粒酶途径 | 第34-36页 |
| 三、γδT细胞杀伤功能活化是TCRγδ依赖性的,而NKG2D对其起辅助作用 | 第36-42页 |
| 四、引起裂解性颗粒极化能力的不同为TCRγδ和NKG2D受体被活化时γδT细胞杀伤功能存在差别的原因 | 第42-46页 |
| 第二部分 γδT细胞杀伤功能活化的信号通路调控机制研究 | 第46-89页 |
| 材料 | 第46-51页 |
| 一、血液样本的采集 | 第46页 |
| 二、实验试剂 | 第46页 |
| 三、试剂盒 | 第46-47页 |
| 四、抗体及试剂 | 第47页 |
| 五、试剂配制 | 第47-50页 |
| 六、实验耗材 | 第50页 |
| 七、仪器设备 | 第50-51页 |
| 方法 | 第51-60页 |
| 一、γδT细胞的体外固相化扩增及表型检测 | 第51页 |
| 二、Western blot技术检测γδT细胞活化过程中不同信号通路分子的磷酸化水平 | 第51-53页 |
| 三、RNA干扰实验 | 第53-54页 |
| 四、Vav蛋白和Cbl蛋白过表达实验 | 第54-55页 |
| 五、Western blot技术检测γδT细胞活化过程中各信号通路的交互影响 | 第55-56页 |
| 六、hMSH2蛋白纯化与鉴定 | 第56-58页 |
| 七、抗体刺激γδT细胞Ca~(2+)流动变化检测 | 第58页 |
| 八、TCRγδ天然配体刺激γδT细胞Ca~(2+)流动变化检测 | 第58-59页 |
| 九、Cbl-b分子抑制功能途径检测 | 第59-60页 |
| 结果 | 第60-89页 |
| 一、PLC-γ1信号通路与γδT细胞杀伤功能相关 | 第60-65页 |
| 二、PLC-γ1信号通路活化与TCRγδ识别天然配体密切相关 | 第65-71页 |
| 三、Ca~(2+)流动与γδT细胞活化相关 | 第71-73页 |
| 四、Vav信号通路与γδT细胞杀伤功能关系研究 | 第73-80页 |
| 五、Cbl-b对γδT细胞具有负调控作用 | 第80-86页 |
| 六、γδT细胞杀伤功能活化需活化信号克服活化抑制信号 | 第86-89页 |
| 讨论 | 第89-97页 |
| 结论 | 第97-98页 |
| 创新点 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-106页 |
| 文献综述 | 第106-123页 |
| 参考文献 | 第116-123页 |
| 个人简历 | 第123-125页 |
| 致谢 | 第125-127页 |
