目录 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
縮略语表 | 第12-13页 |
前言 | 第13-30页 |
1 自交不亲和概况 | 第13-16页 |
·自交不亲和性的分布 | 第13-14页 |
·自交不亲和性分类 | 第14-15页 |
·十字花科自交不亲和性的细胞学反应 | 第15-16页 |
2 十字花科自交不亲和性受孢子体型S位点复等位基因控制 | 第16页 |
3 S位点分子生物学研究 | 第16-21页 |
·首个S位点基因SLG的发现 | 第16-17页 |
·自交不亲和特异性识别反应柱头决定因子SRK的发现 | 第17-18页 |
·自交不亲和特异性识别反应花粉决定因子SCR/SP11的发现 | 第18-19页 |
·S haplotypes结构和多态性 | 第19-20页 |
·S haplotypes间显隐性关系 | 第20-21页 |
4 芸薹属自交不亲和反应信号传导 | 第21-24页 |
·SRK激活细胞信号传导通路拒绝自身花粉 | 第21页 |
·MLPK与SRK相互作用促进SI | 第21-22页 |
·与SRK激酶结构域互作的蛋白 | 第22页 |
·THL可抑制SRK活性 | 第22-23页 |
·ARC1作为SRK下游反应底物促进SI | 第23页 |
·Exo70A1作为ARC1的作用底物参与亲和反应 | 第23-24页 |
5 自交不亲和性与杂种优势利用 | 第24-29页 |
·自交不亲和性的应用 | 第24页 |
·甘蓝型油菜自交不亲和系的选育 | 第24-25页 |
·自交分离筛选 | 第24-25页 |
·种间杂交选育 | 第25页 |
·人工合成自交不亲和系 | 第25页 |
·自交不亲和系的繁殖 | 第25-27页 |
·剥蕾授粉 | 第26页 |
·喷施盐水 | 第26页 |
·CO_2处理 | 第26-27页 |
·利用保持系繁殖自交不亲和系 | 第27页 |
·利用油菜自交不亲和系配制杂种的途径 | 第27-29页 |
·单交杂种 | 第27-28页 |
·三系杂种 | 第28页 |
·双交杂种 | 第28-29页 |
·两系杂种 | 第29页 |
6 未来工作展望 | 第29-30页 |
第一章 甘蓝型油菜自交不亲和保持性研究 | 第30-52页 |
1 研究背景 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-37页 |
·实验材料 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-37页 |
·亲和性的鉴定 | 第31页 |
·引物合成与测序 | 第31-32页 |
·DNA的提取 | 第32页 |
·PCR扩增 | 第32-33页 |
·扩增片段回收 | 第33页 |
·E. coli感受态细胞制备 | 第33-34页 |
·TA克隆转化及筛选 | 第34页 |
·油菜花蕾总RNA的抽提及检测 | 第34-35页 |
·cDNA第一条链合成 | 第35页 |
·半定量基因表达分析 | 第35-36页 |
·遗传分析 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-48页 |
·甘蓝型油菜自交不亲和系S-1300核心保持系的鉴定 | 第37-39页 |
·核心保持系S单倍型鉴定 | 第39-41页 |
·保持系中分子标记的开发与利用 | 第41-42页 |
·保持系Bing409遗传分析 | 第42-43页 |
·保持系89008遗传分析 | 第43-44页 |
·保持系中S位点基因表达分析 | 第44-46页 |
·保持性机理分析 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-52页 |
·甘蓝型油菜自交不亲和保持系 | 第48-49页 |
·芸薹属中S单倍型的显隐性关系 | 第49-50页 |
·甘蓝型油菜自交不亲和机理研究与应用 | 第50-52页 |
第二章 AtPUB2在自交不亲和反应中功能研究 | 第52-81页 |
1 研究背景 | 第52-53页 |
2 材料与方法 | 第53-60页 |
·实验材料 | 第53页 |
·实验方法 | 第53-60页 |
·拟南芥Plant U-box蛋白的生物信息学分析 | 第53页 |
·突变体幼苗筛选 | 第53-54页 |
·F_2代分离群体基因型分析 | 第54页 |
·基因表达分析 | 第54页 |
·GUS表达载体构建 | 第54-55页 |
·拟南芥的遗传转化与阳性苗筛选 | 第55-56页 |
·Southern杂交 | 第56-57页 |
·授粉测验 | 第57-58页 |
·酵母双杂交 | 第58页 |
·GUS染色分析 | 第58-59页 |
·病原菌抗病性检测 | 第59-60页 |
3 结果与分析 | 第60-75页 |
·拟南芥中Plant U-box蛋白的生物信息学分析 | 第60-65页 |
·拟南芥中AtPUBs蛋白 | 第60-62页 |
·柱头中表达的AtPUBs基因 | 第62-63页 |
·AtPUBs蛋白与BnARC1蛋白的亲缘关系分析 | 第63-64页 |
·AtPUBs蛋白的二级结构预测分析 | 第64页 |
·AtPUB2的表达模式预测 | 第64-65页 |
·AtPUB2对自交不亲和反应的影响 | 第65-68页 |
·T-DNA插入突变体鉴定与分析 | 第65-67页 |
·AtPUB2与自交不亲和反应 | 第67-68页 |
·AtPUB2与花粉管的生长 | 第68页 |
·AtPUB2与SRK间相互作用分析 | 第68-70页 |
·基因克隆与酵母表达载体鉴定 | 第69页 |
·相互作用鉴定 | 第69-70页 |
·AtPUB2的表达分析 | 第70-73页 |
·AtPUB2启动子克隆及融合GUS表达载体构建 | 第70-71页 |
·AtPUB2pr::uidA单拷贝阳性苗筛选 | 第71页 |
·AtPUB2表达分析 | 第71-73页 |
·病原菌抗病性检测 | 第73-75页 |
4 讨论 | 第75-81页 |
·AtPUB2不参与拟南芥中自交不亲和反应 | 第75-76页 |
·AtPUB2功能分析 | 第76-77页 |
·自交不亲和反应可能存在多条信号传导通路 | 第77-78页 |
·自交不亲和反应相关基因的分离与鉴定 | 第78-81页 |
·利用激活标签分离和鉴定自交不亲和反应相关基因 | 第78-79页 |
·利用全基因组关联分析发掘和鉴定自交不亲和反应相关基因 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-95页 |
附录1 第一章研究中所用引物 | 第95-96页 |
附录2 第二章研究中所用引物 | 第96-97页 |
附录3 作者简介和在读期间发表的论文 | 第97-99页 |
致谢 | 第99页 |