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钙离子结合蛋白基因GhCaM7和GhAnn2在棉花纤维伸长中的功能分析

縮略语表第1-8页
摘要第8-11页
ABSTRACT第11-15页
第一章 文献综述第15-33页
   ·棉花纤维发育简介第15-16页
     ·棉花棉种的分类第15页
     ·棉花纤维发育时期第15-16页
   ·棉花纤维发育机理研究进展第16-23页
     ·棉花纤维功能基因组研究策略第17-19页
     ·影响纤维发育的因素第19-23页
       ·影响纤维起始的因素第19-20页
       ·影响纤维伸长的因素第20-23页
       ·影响纤维次生壁合成的因素第23页
   ·钙离子在细胞发育中的作用第23-30页
     ·钙离子的生理作用第23-24页
     ·钙离子信号简介第24-25页
     ·钙离子在细胞发育中的作用第25-27页
     ·钙离子结合蛋白及其在细胞发育中的作用第27-30页
       ·钙离子结合蛋白的类型第27-28页
       ·钙离子受体及其在细胞伸长中的功能第28-29页
       ·膜联蛋白在细胞发育中的功能第29-30页
   ·棉花纤维钙离子结合蛋白研究概况第30-32页
   ·本研究的目的和意义第32-33页
第二章 陆地棉钙调素家族成员组织表达模式第33-40页
   ·实验材料和方法第33-34页
     ·实验材料第33页
       ·棉花材料第33页
       ·基因克隆用到的菌株和质粒载体第33页
     ·实验方法第33-34页
       ·陆地棉钙调素家族成员序列分析第33页
       ·表达分析(RT-PCR和qRT-PCR)第33-34页
       ·胚珠扫描电镜观察第34页
   ·实验结果与分析第34-39页
     ·棉花中钙调素成员及其序列分析第34-36页
     ·钙调素家族成员组织表达模式第36页
     ·GhCaM7在棉花光籽突变体胚珠中的表达量减少第36-39页
   ·讨论第39-40页
第三章 GhCaM7转基因表型鉴定第40-51页
   ·材料与方法第40-44页
     ·实验材料第40页
     ·实验方法第40-44页
       ·载体构建第40-42页
       ·转基因检测第42页
       ·胚珠离体培养第42-43页
       ·纤维长度及品质测定第43页
       ·成熟纤维切片第43-44页
   ·实验结果与分析第44-50页
     ·GhCaM7转基因材料的获得与鉴定第44-46页
     ·GhCaM7转基因材料表型鉴定第46-50页
       ·GhCaM7与纤维伸长第46-49页
       ·GhCaM7与纤维细胞壁合成第49-50页
   ·讨论第50-51页
第四章 GhCaM7影响纤维发育机理初步研究第51-75页
   ·实验材料与方法第51-53页
     ·实验材料第51页
     ·实验方法第51-53页
       ·胚珠离体培养及各种处理第51页
       ·纤维活性氧定性分析以及双氧水测定第51-52页
       ·纤维细胞顶端钙离子流测定第52-53页
   ·结果与分析第53-72页
     ·钙离子和GhCaM7关系研究第53-58页
       ·钙离子与纤维发育第53-57页
       ·钙离子与钙调素关系研究第57-58页
     ·GhCaM7与活性氧关系研究第58-68页
       ·活性氧在纤维发育中的作用第58页
       ·钙离子与ROS关系研究第58-61页
       ·GhCaM7与ROS关系研究第61-68页
     ·GhCaM7与IAA关系研究第68-72页
       ·IAA能引发钙离子内流和诱导GhCaM7上调表达第68-69页
       ·GhCaM7在IAA诱导的ROS产生中起着积极作用第69-72页
   ·讨论第72-75页
第五章 棉花GhAnn2基因的克隆与功能分析第75-95页
   ·实验材料和方法第75-78页
     ·植物材料第75页
     ·方法第75-78页
       ·D基因组膜联蛋白基因家族成员的生物信息学分析第75页
       ·陆地棉膜联蛋白2(GhAnn2)的亚基因组来源分析第75-76页
       ·陆地棉膜联蛋白2(GhAnn2)的克隆,RNAi载体构建与转化第76-77页
       ·qRT-PCR,Southern和Northern杂交第77页
       ·胚珠培养和La~(3+)处理实验第77-78页
       ·纤维长度与品质测定第78页
       ·成熟纤维切片第78页
       ·纤维顶端钙离子流测定第78页
   ·结果与分析第78-92页
     ·陆地棉膜联蛋白2(GhAnn2)的克隆、序列结构与表达分析第78-85页
       ·GhAnn2基因序列结构第78-80页
       ·D基因组膜联蛋白的生物信息学分析第80-82页
       ·GhAnn2亚基因组来源分析第82-83页
       ·GhAnn2在纤维伸长期优势表达第83-85页
     ·GhAnn2转基因材料的获得与检测第85页
     ·GhAnn2 RNAi材料的表型鉴定第85-88页
       ·GhAnn2干涉纤维变短第85-86页
       ·GhAnn2干涉成熟纤维细胞壁变薄第86-88页
     ·GhAnn2基因影响纤维发育分子机制的初步研究第88-92页
       ·GhAnn2下调表达降低了纤维细胞顶端钙离子流入速度第88-90页
       ·GhAnn2下调表达降低了纤维细胞中钙离子受体基因的表达水平第90-92页
   ·讨论第92-95页
参考文献第95-114页
附录第114-140页
攻读学位期间已发表和待发表论文第140-141页
致谢第141-142页

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