摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
1 前言 | 第13-24页 |
·研究问题的由来 | 第13页 |
·猪IMF的研究进展 | 第13-18页 |
·IMF的生物学特性 | 第13-14页 |
·猪IMF研究现状 | 第14-15页 |
·与IMF相关候选基因的研究进展 | 第15-16页 |
·与IMF相关通路研究进展 | 第16-18页 |
·miRNAs是调节猪IMF的重要因素 | 第18-21页 |
·miRNAs的概述 | 第18-19页 |
·与IMF相关miRNAs的研究进展 | 第19-21页 |
·miR-365-3p与候选靶基因PGK1和CXHXorf23的研究 | 第21-23页 |
·miR-365-3p的研究现状 | 第21-22页 |
·PGK1和CXHXorf23基因与IMF相关研究 | 第22-23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
2 材料和方法 | 第24-37页 |
·材料 | 第24-28页 |
·猪组织样品 | 第24页 |
·菌株、细胞和载体 | 第24-25页 |
·试验用菌株 | 第24页 |
·试验用细胞系 | 第24页 |
·试验用载体 | 第24-25页 |
·主要试剂及设备 | 第25-26页 |
·主要试剂 | 第25-26页 |
·主要设备 | 第26页 |
·主要试剂的配制 | 第26-28页 |
·主要软件及数据库 | 第28页 |
·方法 | 第28-34页 |
·猪背最长肌组织肌内脂肪的测定 | 第28-29页 |
·猪高、低IMF组DEM和DEG的筛选与鉴定 | 第29-32页 |
·组织切片油红染色 | 第29页 |
·猪背最长肌总RNA抽提及检测 | 第29-30页 |
·RT-PCR | 第30-31页 |
·高、低IMF组差异miRNA和基因的筛选 | 第31-32页 |
·猪IMF GWAS材料准备 | 第32页 |
·定量引物设计及条件优化 | 第32页 |
·实时荧光定量PCR(Q-PCR) | 第32-33页 |
·细胞培养及其成脂诱导过程 | 第33页 |
·C2C12细胞的培养 | 第33页 |
·C2C12细胞成脂诱导过程 | 第33页 |
·细胞转染 | 第33-34页 |
·双荧光素酶检测 | 第34页 |
·引物序列 | 第34-36页 |
·本实验的技术路线 | 第36-37页 |
3 结果 | 第37-51页 |
·猪IMF性状的表型变异结果 | 第37-39页 |
·猪IMF性状表型结果 | 第37-38页 |
·组织冰冻切片油红O染色检测 | 第38-39页 |
·猪IMF GWAS分析结果 | 第39页 |
·高低肌内脂肪组DEM、DEG筛选奠定 | 第39-42页 |
·样品的选择标准 | 第39页 |
·DEM和DEG的筛选结果 | 第39-40页 |
·DEM和DEG的鉴定结果 | 第40-42页 |
·猪miR-365-3p的靶基因预测及其组织表达检测结果 | 第42-45页 |
·猪miR-365-3p的靶基因预测 | 第42-44页 |
·猪miR-365-3p、PGK1基因和CXHXorf23基因的组织表达谱 | 第44-45页 |
·猪miR-365-3p和PGK1、CXHXorf23基因的靶向关系验证 | 第45-51页 |
·双荧光素酶报告基因实验鉴定猪miR-365-3p分别与PGK1基因、CXHXorf23基因的靶向关系验证 | 第45-46页 |
·C2C12细胞诱导成脂及脂肪形成相关Maker基因的检测 | 第46-47页 |
·猪miR-365-3p在高低IMF组和C2C12细胞诱导成脂过程中的表达模式结果 | 第47-48页 |
·PGK1、CXHXorf23基因在高低IMF组和C2C12细胞诱导成脂过程中的表达模式结果 | 第48-49页 |
·超表达miR-365-3p对不同脂肪相关Maker基因和靶基因的影响 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-55页 |
·miR-365-3p在高低IMF组和C2C12细胞诱导成脂过程表达模式 | 第51页 |
·与肌内脂肪沉积相关miRNAs和基因的筛选 | 第51-52页 |
·PGK1和CXHXorf23基因在不同组织中的表达 | 第52-53页 |
·miR-365-3p对C2C12成脂诱导分化的作用 | 第53-54页 |
·关于miR-365-3p靶向作用PGK1和CXHXorf23基因的应用 | 第54-55页 |
5 小结 | 第55-57页 |
·本研究得到的结果 | 第55页 |
·本研究的创新点 | 第55-56页 |
·本研究的不足及下一步工作意见 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-68页 |
致谢 | 第68-69页 |