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猪肌内脂肪沉积相关MIRNA的鉴定及其功能研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略词表第12-13页
1 前言第13-24页
   ·研究问题的由来第13页
   ·猪IMF的研究进展第13-18页
     ·IMF的生物学特性第13-14页
     ·猪IMF研究现状第14-15页
     ·与IMF相关候选基因的研究进展第15-16页
     ·与IMF相关通路研究进展第16-18页
   ·miRNAs是调节猪IMF的重要因素第18-21页
     ·miRNAs的概述第18-19页
     ·与IMF相关miRNAs的研究进展第19-21页
   ·miR-365-3p与候选靶基因PGK1和CXHXorf23的研究第21-23页
     ·miR-365-3p的研究现状第21-22页
     ·PGK1和CXHXorf23基因与IMF相关研究第22-23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
2 材料和方法第24-37页
   ·材料第24-28页
     ·猪组织样品第24页
     ·菌株、细胞和载体第24-25页
       ·试验用菌株第24页
       ·试验用细胞系第24页
       ·试验用载体第24-25页
     ·主要试剂及设备第25-26页
       ·主要试剂第25-26页
       ·主要设备第26页
     ·主要试剂的配制第26-28页
     ·主要软件及数据库第28页
   ·方法第28-34页
     ·猪背最长肌组织肌内脂肪的测定第28-29页
     ·猪高、低IMF组DEM和DEG的筛选与鉴定第29-32页
       ·组织切片油红染色第29页
       ·猪背最长肌总RNA抽提及检测第29-30页
       ·RT-PCR第30-31页
       ·高、低IMF组差异miRNA和基因的筛选第31-32页
     ·猪IMF GWAS材料准备第32页
     ·定量引物设计及条件优化第32页
     ·实时荧光定量PCR(Q-PCR)第32-33页
     ·细胞培养及其成脂诱导过程第33页
       ·C2C12细胞的培养第33页
       ·C2C12细胞成脂诱导过程第33页
     ·细胞转染第33-34页
     ·双荧光素酶检测第34页
   ·引物序列第34-36页
   ·本实验的技术路线第36-37页
3 结果第37-51页
   ·猪IMF性状的表型变异结果第37-39页
     ·猪IMF性状表型结果第37-38页
     ·组织冰冻切片油红O染色检测第38-39页
   ·猪IMF GWAS分析结果第39页
   ·高低肌内脂肪组DEM、DEG筛选奠定第39-42页
     ·样品的选择标准第39页
     ·DEM和DEG的筛选结果第39-40页
     ·DEM和DEG的鉴定结果第40-42页
   ·猪miR-365-3p的靶基因预测及其组织表达检测结果第42-45页
     ·猪miR-365-3p的靶基因预测第42-44页
     ·猪miR-365-3p、PGK1基因和CXHXorf23基因的组织表达谱第44-45页
   ·猪miR-365-3p和PGK1、CXHXorf23基因的靶向关系验证第45-51页
     ·双荧光素酶报告基因实验鉴定猪miR-365-3p分别与PGK1基因、CXHXorf23基因的靶向关系验证第45-46页
     ·C2C12细胞诱导成脂及脂肪形成相关Maker基因的检测第46-47页
     ·猪miR-365-3p在高低IMF组和C2C12细胞诱导成脂过程中的表达模式结果第47-48页
     ·PGK1、CXHXorf23基因在高低IMF组和C2C12细胞诱导成脂过程中的表达模式结果第48-49页
     ·超表达miR-365-3p对不同脂肪相关Maker基因和靶基因的影响第49-51页
4 讨论第51-55页
   ·miR-365-3p在高低IMF组和C2C12细胞诱导成脂过程表达模式第51页
   ·与肌内脂肪沉积相关miRNAs和基因的筛选第51-52页
   ·PGK1和CXHXorf23基因在不同组织中的表达第52-53页
   ·miR-365-3p对C2C12成脂诱导分化的作用第53-54页
   ·关于miR-365-3p靶向作用PGK1和CXHXorf23基因的应用第54-55页
5 小结第55-57页
   ·本研究得到的结果第55页
   ·本研究的创新点第55-56页
   ·本研究的不足及下一步工作意见第56-57页
参考文献第57-68页
致谢第68-69页

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