符号说明 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-22页 |
·昆虫触角感器的结构及感受机制 | 第13-15页 |
·昆虫化学感受蛋白研究进展 | 第15-16页 |
·昆虫化学感受蛋白的种类 | 第16-17页 |
·昆虫化学感受蛋白的分子结构 | 第17-18页 |
·昆虫化学感受蛋白表达分布情况 | 第18-19页 |
·昆虫化学感受蛋白功能 | 第19-20页 |
·立题依据 | 第20页 |
·研究内容 | 第20-22页 |
2 材料与方法 | 第22-37页 |
·雌雄绿盲蝽的触角 CDNA 文库的构建 | 第22-28页 |
·试验用昆虫 | 第22页 |
·文库构建相关试剂、仪器以及引物序列 | 第22页 |
·雌雄绿盲蝽触角总 RNA 的提取 | 第22-23页 |
·第二链 cDNA 的合成 | 第23-24页 |
·cDNA 的回收 | 第24页 |
·杂交 | 第24页 |
·DSN 处理 | 第24-25页 |
·蛋白酶 K 处理 | 第25页 |
·Sfi 酶切 | 第25-26页 |
·按照片段大小分离 ds cDNA | 第26页 |
·ds cDNA 和载体 TriplEx2 的连接 | 第26页 |
·噬菌体颗粒的蛋白质包装 | 第26页 |
·cDNA 文库库容滴度检测 | 第26-27页 |
·cDNA 文库的转型 | 第27页 |
·插入片段大小 PCR 检测及重组率检测 | 第27页 |
·冗余度检测 | 第27-28页 |
·原始 cDNA 文库的测序 | 第28页 |
·绿盲蝽触角 CDNA 文库的生物信息学的分析 | 第28-33页 |
·文库质量评估 | 第28页 |
·聚类分析 | 第28页 |
·序列比对 | 第28页 |
·功能注释 | 第28-29页 |
·绿盲蝽化学感受蛋白基因鉴定 | 第29页 |
·克隆绿盲蝽化学感受蛋白基因全长序列 | 第29-33页 |
·试验用虫和试剂等 | 第29页 |
·绿盲蝽总 RNA 的提取 | 第29-30页 |
·绿盲蝽触角第一链 cDNA 的合成 | 第30页 |
·AlucCSP1-8 的 DNA 聚合酶链式反应 | 第30-31页 |
·PCR 产物电泳凝胶回收纯化 | 第31-32页 |
·DNA 片段与 PGEM-T 载体连接 | 第32页 |
·转化连接产物进入感受态细胞并测序 | 第32-33页 |
·测序结果比对 | 第33页 |
·绿盲蝽化学感受蛋白基因组织表达谱分析 | 第33-37页 |
·虫源 | 第33页 |
·试剂 | 第33-34页 |
·实验步骤 | 第34-37页 |
·绿盲蝽各不同部位的总 RNA 的提取 | 第34页 |
·基因组 DNA 的消化 | 第34页 |
·第一链 cDNA 的合成 | 第34页 |
·引物的设计合成 | 第34-35页 |
·目的基因和内参基因扩增效率一致性的验证 | 第35页 |
·荧光定量 PCR | 第35-36页 |
·Real-time PCR 的数据分析方法 | 第36-37页 |
3 结果 | 第37-57页 |
·CDNA 文库的构建结果 | 第37-44页 |
·触角 cDNA 文库质量分析 | 第37-41页 |
·绿盲蝽触角 cDNA 文库生物信息学分析 | 第41-44页 |
·化学感受蛋白基因生物信息学分析 | 第44-51页 |
·化学感受蛋白基因鉴定 | 第44-45页 |
·化学感受蛋白氨基酸序列相似性比较 | 第45页 |
·化学感受蛋白氨基酸序列 Neighbor-joining 进化树的构建 | 第45-47页 |
·氨基酸序列分析 | 第47页 |
·推导氨基酸序列及信号肽分析 | 第47-51页 |
·荧光定量结果 | 第51-57页 |
·目的基因和内参基因扩增效率的验证 | 第51-52页 |
·绿盲蝽气味结合蛋白 CSPs 的表达谱分析 | 第52-57页 |
4 讨论 | 第57-61页 |
·绿盲蝽触角 CDNA 文库 | 第57-58页 |
·化学感受蛋白基因鉴别分析 | 第58页 |
·ALUCCSPS 组织表达谱 | 第58-61页 |
5 全文结论 | 第61-62页 |
6 参考文献 | 第62-69页 |
致谢 | 第69-71页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第71页 |