昆虫抗冻蛋白的检测、功能鉴定及转基因应用
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| ·昆虫抗冻蛋白简介 | 第10-11页 |
| ·昆虫抗冻蛋白的检测 | 第11-12页 |
| ·热滞活性的测定方法 | 第11-12页 |
| ·判断昆虫抗冻蛋白存在的方法 | 第12页 |
| ·昆虫抗冻蛋白的分离纯化 | 第12-14页 |
| ·昆虫抗冻蛋白分离纯化的来源材料 | 第12-13页 |
| ·昆虫抗冻蛋白分离纯化的常用技术 | 第13-14页 |
| ·昆虫抗冻蛋白的结构 | 第14页 |
| ·昆虫抗冻蛋白的作用机制 | 第14-15页 |
| ·昆虫抗冻蛋白活性的影响因素 | 第15-17页 |
| ·抗冻蛋白的保守序列的长度 | 第15页 |
| ·抗冻蛋白浓度的影响 | 第15-16页 |
| ·活化蛋白与热滞活性的关系 | 第16页 |
| ·抗冻蛋白活性增强剂 | 第16-17页 |
| ·其他因素 | 第17页 |
| ·昆虫抗冻蛋白的应用 | 第17-18页 |
| ·研究的目的及意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-29页 |
| ·昆虫抗冻蛋白的检测 | 第20-22页 |
| ·供试昆虫 | 第20页 |
| ·血淋巴和总蛋白的获取 | 第20-21页 |
| ·试验仪器 | 第21页 |
| ·差示扫描量热法 | 第21-22页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白的原核表达及活性检测 | 第22-25页 |
| ·技术路线 | 第22页 |
| ·供试黄粉虫 | 第22页 |
| ·查找目的基因 | 第22页 |
| ·总 RNA 的提取及反转录 | 第22页 |
| ·克隆目的基因 | 第22-24页 |
| ·表达载体的构建 | 第24-25页 |
| ·融合蛋白的诱导表达与鉴定 | 第25页 |
| ·蛋白纯化 | 第25页 |
| ·表达蛋白的热滞活性测定 | 第25页 |
| ·转基因水稻的鉴定 | 第25-29页 |
| ·水稻转基因 | 第25-26页 |
| ·阳性植株的鉴定 | 第26-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-47页 |
| ·昆虫抗冻蛋白的检测 | 第29-35页 |
| ·牛血清蛋白的热滞活性检测 | 第29页 |
| ·黄粉虫幼虫总蛋白的热滞活性检测 | 第29-31页 |
| ·7种昆虫的热滞活性检测 | 第31-35页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白的原核表达及活性检测 | 第35-42页 |
| ·找到目的基因 | 第35-37页 |
| ·黄粉虫总 RNA 的提取及反转录 | 第37-38页 |
| ·目的片段扩增 | 第38页 |
| ·原核表达质粒的鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白的检测 | 第39-40页 |
| ·表达蛋白的热滞活性检测 | 第40-42页 |
| ·转基因水稻的鉴定 | 第42-47页 |
| ·转基因 | 第42-44页 |
| ·阳性植株的鉴定 | 第44-47页 |
| 4 讨论 | 第47-52页 |
| ·昆虫抗冻蛋白的检测 | 第47-49页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白的原核表达及活性检测 | 第49-50页 |
| ·转基因水稻的鉴定 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录 | 第59-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第69页 |
