| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 第一节 细胞周期概述 | 第11-20页 |
| 1. 细胞周期 | 第11页 |
| 2. 细胞周期调控 | 第11-20页 |
| ·细胞周期蛋白 | 第12-18页 |
| ·cyclin D | 第14-17页 |
| ·cyclin A | 第17页 |
| ·cyclin B | 第17-18页 |
| ·细胞周期蛋白依赖性激酶-Cdks | 第18-19页 |
| ·细胞周期抑制因子CKIs | 第19-20页 |
| 第二节 NDR激酶家族与细胞周期调控 | 第20-23页 |
| 1. NDR活性的调控 | 第21-22页 |
| 2. NDR在细胞中的功能 | 第22-23页 |
| 第三节 本文的研究意义 | 第23-24页 |
| 第二章 材料方法 | 第24-34页 |
| 第一节 实验材料 | 第24-26页 |
| ·菌种、细胞株、质粒 | 第24页 |
| ·抗体及主要试剂 | 第24-25页 |
| ·NDRl 和 NDR2 siRNA | 第25页 |
| ·仪器设备 | 第25-26页 |
| 第二节 研究方法 | 第26-34页 |
| ·相关质粒的构建 | 第26页 |
| ·TAP样品的处理 | 第26-27页 |
| ·PEI转染细胞 | 第27页 |
| ·GST融合蛋白的原核表达和纯化 | 第27-28页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第28页 |
| ·NDR磷酸化抗体的制备 | 第28页 |
| ·ELISA | 第28-29页 |
| ·抗体纯化 | 第29页 |
| ·SDS-PAGE | 第29-30页 |
| ·Western Blot | 第30页 |
| ·GST-pulldown | 第30-31页 |
| ·免疫共沉淀 | 第31页 |
| ·体外激酶实验 | 第31页 |
| ·可诱导稳定表达细胞株的构建 | 第31-32页 |
| ·细胞同步化 | 第32页 |
| ·细胞PI染色和流式分析 | 第32页 |
| ·lipofectamine 2000转染siRNA | 第32-34页 |
| 第三章 实验结果 | 第34-59页 |
| 第一节 cyclinD1/Cdk4与NDR1/2相互作用的验证 | 第34-38页 |
| ·TAP筛选Cdk4新的相互作用蛋白 | 第34-36页 |
| ·CyclinD1/Cdk4和NDR1/2体内外相互作用的验证 | 第36-38页 |
| 第二节 cyclinD1与NDR1/2相互作用不依赖于Cdk4 | 第38-41页 |
| 第三节 CyclinD1/Cdk4与NDR1/2相互不能磷酸化 | 第41-44页 |
| 第四节 Cyclin D1上调NDR1/2的活性 | 第44-47页 |
| 第五节 cyclinD1通过释放NDR1/2的自身抑制序列来调控NDR活性 | 第47-50页 |
| 第六节 cyclinD1可以通过上调NDR活性来促进细胞周期 | 第50-59页 |
| 第四章 讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 总结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-73页 |
| 发表文章 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
