| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-14页 |
| ·概述 | 第7页 |
| ·钠尿肽家族介绍 | 第7-11页 |
| ·钠尿肽家族的成员 | 第8-10页 |
| ·钠尿肽家族的受体 | 第10-11页 |
| ·血管钠肽的优缺点分析 | 第11-12页 |
| ·血管钠肽的优缺点 | 第11页 |
| ·血管钠肽缺点的解决方案 | 第11-12页 |
| ·立题背景和课题内容 | 第12-14页 |
| ·立题背景 | 第12-13页 |
| ·课题设计与内容 | 第13-14页 |
| 第二章 HSA-LINK-VNP 融合蛋白工程菌的构建及培养条件优化 | 第14-28页 |
| ·材料 | 第14-15页 |
| ·质粒和菌株 | 第14页 |
| ·培养基 | 第14页 |
| ·工具酶 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14页 |
| ·主要仪器设备 | 第14-15页 |
| ·引物 | 第15页 |
| ·方法 | 第15-20页 |
| ·重组质粒 pBluescriptⅡKS(+)-hsa-link-vnp 的构建 | 第15-17页 |
| ·表达载体 pPIC9K-hsa-link-vnp 的构建 | 第17页 |
| ·表达载体 pPIC9K-hsa-link-vnp 的线性化 | 第17页 |
| ·毕赤酵母 GS115 感受态细胞的制备 | 第17-18页 |
| ·毕赤酵母 GS115 感受态细胞的转化 | 第18页 |
| ·HSA-LINK-VNP 融合蛋白的诱导表达 | 第18页 |
| ·HSA-LINK-VNP 融合蛋白 WB 鉴定 | 第18-19页 |
| ·HSA-LINK-VNP 融合蛋白工程菌的生长曲线测定 | 第19页 |
| ·HSA-LINK-VNP 毕赤酵母工程菌培养条件的初步优化 | 第19-20页 |
| ·结果与讨论 | 第20-27页 |
| ·克隆载体 pBluescriptⅡKS(+)-hsa-link-vnp 的构建 | 第20-21页 |
| ·表达载体 pPIC9K-hsa-link-vnp 的构建 | 第21-22页 |
| ·HSA-LINK-VNP 融合蛋白工程菌的筛选 | 第22-23页 |
| ·HSA-LINK-VNP 融合蛋白的 western blot 鉴定 | 第23页 |
| ·HSA-LINK-VNP 融合蛋白工程菌的生长曲线 | 第23-24页 |
| ·HSA-LINK-VNP 毕赤酵母工程菌培养条件的初步优化 | 第24-27页 |
| ·本章小结 | 第27-28页 |
| 第三章 HSA-LINK-VNP 融合蛋白的表达分离纯化 | 第28-33页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·菌种 | 第28页 |
| ·溶液剂培养基的配制 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-30页 |
| ·HSA-LINK-VNP 毕赤酵母工程菌的发酵表达 | 第29页 |
| ·HSA-LINK-VNP 融合蛋白的分离纯化浓缩 | 第29-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-32页 |
| ·HSA-LINK-VNP 毕赤酵母工程菌的发酵结果 | 第30-31页 |
| ·HSA-LINK-VNP 融合蛋白的分离纯化浓缩结果 | 第31-32页 |
| ·本章小结 | 第32-33页 |
| 第四章 HSA-LINK-VNP 融合蛋白的初步活性鉴定 | 第33-40页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·菌种 | 第33页 |
| ·试剂 | 第33-34页 |
| ·实验动物 | 第34页 |
| ·培养基及溶液配制 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-37页 |
| ·融合蛋白刺激受体细胞模型 cGMP 含量测定 | 第34-36页 |
| ·融合蛋白对血管舒张作用测定 | 第36页 |
| ·融合蛋白的血液动力学测定 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-38页 |
| ·融合蛋白刺激受体细胞模型 cGMP 含量测定结果 | 第37页 |
| ·融合蛋白对血管舒张作用测定结果 | 第37-38页 |
| ·融合蛋白的血液动力学测定结果 | 第38页 |
| ·本章小结 | 第38-40页 |
| 第五章 论文总结 | 第40-41页 |
| ·主要结论 | 第40页 |
| ·问题与展望 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第45页 |
