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甘蓝型油菜逆境相关转录因子基因BnNAC5-3的克隆与功能鉴定

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
縮写名词表第9-10页
1 前言第10-18页
   ·NAC转录因子结构剖析第11-12页
     ·NAC domain结构分析第11页
     ·NAC转录因子的转录调控区(TRRs)第11-12页
   ·NAC转录因子调控第12-13页
     ·转录调控第12页
     ·转录后调控第12-13页
     ·翻译后调控第13页
   ·NAC转录因子的各种生物学功能第13-16页
     ·NAC转录因子在植物生长过程中的作用第13-14页
     ·NAC转录因子在非生物胁迫中的防御反应第14-15页
     ·NAC转录因子在生物胁迫中的防御反应第15-16页
     ·NAC转录因子在植物激素调控及信号转导过程中的作用第16页
   ·本研究的目的和意义第16-18页
2 材料和方法第18-27页
   ·菌种和载体第18页
   ·植物材料第18页
   ·载体的构建、感受态制备与转化方法第18-21页
     ·载体的构建第18-19页
     ·感受态制备与转化方法第19-21页
   ·DNA的抽提和PCR检测第21页
   ·RNA的抽提、逆转录合成单链cDNA,RT-PCR和Realtime PCR第21-23页
   ·转录激活活性检测第23页
   ·农杆菌介导的油菜遗传转化第23-24页
   ·生理生化分析方法第24-25页
     ·离体叶片失水率的测定第24页
     ·叶片中丙二醛含量的测定第24页
     ·叶片中超氧化物歧化酶活性的测定第24-25页
   ·苗期的室内培养第25-27页
3 结果与分析第27-45页
   ·BnNAC5-3基因的克隆及表达分析第27-28页
   ·BnNAC5-3蛋白与其他NAC蛋白的系统进化分析第28-29页
   ·BnNAC5-3蛋白与其它NAC蛋白的多序列比对分析第29-30页
   ·BnNAC5-3蛋白的转录激活活性分析第30-31页
     ·酵母转化第30页
     ·BnNAC5-3的转录激活功能检测第30-31页
   ·遗传转化载体的构建、遗传转化和转基因植株的阳性检测第31-33页
   ·转基因植株表达量分析第33页
   ·超量表达BnNAC5-3的甘蓝型油菜的ABA敏感性分析第33-36页
     ·种子萌发的ABA敏感性分析第34-35页
     ·苗期的ABA敏感性分析第35-36页
   ·超量表达BnNAC5-3的甘蓝型油菜的苗期抗旱性分析第36-41页
     ·PEG模拟干旱条件下的幼苗生长实验第37-38页
     ·苗期的PEG胁迫实验第38页
     ·超量表达BnNAC5-3的甘蓝型油菜的离体叶片失水率分析第38-39页
     ·超量表达BnNAC5-3的甘蓝型油菜的叶片超氧化物歧化酶活性分析第39-40页
     ·超量表达BnNAC5-3的甘蓝型油菜的叶片丙二醛含量分析第40-41页
   ·超量表达BnNAC5-3的甘蓝型油菜的苗期耐盐性分析第41-43页
     ·高盐条件下的胁迫实验第41-42页
     ·盐胁迫下超量表达BnNAC5-3的油菜叶片超氧化物歧化酶活性分析第42页
     ·盐胁迫下超量表达BnNAC5-3的油菜叶片丙二醛含量分析第42-43页
   ·甘蓝型油菜胁迫相关基因在超量表达BnNAC5-3植株中的分析第43-45页
4 讨论第45-49页
   ·BnNAC5-3基因功能的探讨第45-47页
     ·BnNAC5-3具有转录因子的特性第45页
     ·BnNAC5-3参与依赖于ABA的逆境胁迫应答反应第45-47页
   ·转基因甘蓝型油菜后代表型鉴定的探讨第47页
   ·关于后续工作的设想第47-49页
参考文献第49-58页
致谢第58页

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