| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 符号说明 | 第14-16页 |
| 1 前言 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-49页 |
| ·材料 | 第18-26页 |
| ·结肠癌细胞系 | 第18页 |
| ·结直肠癌组织标本 | 第18页 |
| ·结肠癌组织芯片 | 第18页 |
| ·实验动物 | 第18-19页 |
| ·菌株和质粒载体 | 第19页 |
| ·试剂与材料 | 第19-25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-49页 |
| ·免疫组化 | 第26-27页 |
| ·细胞培养 | 第27-28页 |
| ·Western blot | 第28-29页 |
| ·细胞RNA制备 | 第29-31页 |
| ·mRNA逆转录 | 第31页 |
| ·pIRES-SDHB载体的构建 | 第31-35页 |
| ·稳定转染SW620细胞系的建立 | 第35页 |
| ·计数法测定细胞生长曲线 | 第35页 |
| ·平板集落形成试验 | 第35-36页 |
| ·细胞周期检测 | 第36-37页 |
| ·免疫细胞化学 | 第37页 |
| ·裸鼠成瘤实验 | 第37页 |
| ·人类全基因组表达谱芯片 | 第37-43页 |
| ·Real-time PCR验证差异表达基因 | 第43-44页 |
| ·组织gDNA提取 | 第44-45页 |
| ·SDHB基因外显子突变检测 | 第45-46页 |
| ·SDHB基因甲基化分析 | 第46-48页 |
| ·统计学方法 | 第48-49页 |
| 3 结果 | 第49-80页 |
| ·SDHB在结直肠癌组织中的表达 | 第49-52页 |
| ·免疫组织化学检测SDHB在结肠癌组织芯片中的表达 | 第49-51页 |
| ·Western blot检测SDHB在结直肠癌组织中的表达 | 第51页 |
| ·SDHB在结肠癌细胞系中的表达 | 第51-52页 |
| ·SDHB基因转染对SW620细胞生物学功能的影响 | 第52-60页 |
| ·SDHB真核表达载体的构建 | 第52-54页 |
| ·SDHB稳定转染结肠癌细胞系的建立 | 第54页 |
| ·SDHB对SW620细胞生长与增殖的影响 | 第54-55页 |
| ·SDHB对SW620细胞集落形成能力的影响 | 第55-57页 |
| ·SDHB对SW620细胞周期的影响 | 第57页 |
| ·SDHB对细胞周期调控分子表达的影响 | 第57-58页 |
| ·SDHB抑制SW620细胞裸鼠移植瘤的形成 | 第58-60页 |
| ·SDHB基因转染对SW620细胞基因表达谱的影响 | 第60-74页 |
| ·SDHB基因对SW620细胞基因表达谱的影响 | 第60-67页 |
| ·差异表达基因的生物信息学分析 | 第67-71页 |
| ·差异表达基因KEGG数据库pathway分析 | 第71-73页 |
| ·Real-time PCR验证差异表达基因 | 第73-74页 |
| ·SDHB在结直肠癌组织中表达下调的机制初探 | 第74-80页 |
| ·PCR扩增SDHB基因片段产物及测序鉴定 | 第74-77页 |
| ·MSP检测结直肠癌组织SDHB基因启动子甲基化状态 | 第77-80页 |
| 4 讨论 | 第80-93页 |
| ·SDHB蛋白在结直肠癌组织中表达下调 | 第81-82页 |
| ·SDHB具有抑制结肠癌SW620细胞生长与增殖的作用 | 第82-83页 |
| ·SDHB下调cyclinD1和PCNA表达,引起SW620细胞周期G1-S期阻滞 | 第83-85页 |
| ·SDHB调控SW620细胞差异基因表达谱的构建 | 第85-88页 |
| ·SDHB在结直肠癌组织中表达下调的机制 | 第88-93页 |
| 5 结论 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-103页 |
| 综述 | 第103-125页 |
| 参考文献 | 第115-125页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126-127页 |
