摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第1章 绪论 | 第10-21页 |
·生物质能的研究意义 | 第10-11页 |
·生物质乙醇的研究现状 | 第11-12页 |
·纤维素类物质生产乙醇的现状 | 第12-13页 |
·自然界发酵木糖产乙醇的微生物 | 第13-15页 |
·微生物木糖代谢机理 | 第15-17页 |
·木糖向木酮糖转化 | 第16页 |
·木酮糖生成 5-磷酸木酮糖 | 第16页 |
·磷酸戊糖途径 | 第16-17页 |
·乙醇生成 | 第17页 |
·重组酿酒酵母发酵木糖研究现状 | 第17-18页 |
·立题意义 | 第18-19页 |
·研究内容 | 第19-21页 |
第2章 材料与方法 | 第21-40页 |
·材料 | 第21-28页 |
·菌株和载体 | 第21-22页 |
·工具酶和生化试剂 | 第22页 |
·实验仪器 | 第22-23页 |
·培养基及主要溶液的配制 | 第23-27页 |
·PCR 反应引物 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-40页 |
·菌株的培养 | 第28页 |
·质粒的提取 | 第28-29页 |
·PCR 反应 | 第29-30页 |
·目的基因的拼接 | 第30-31页 |
·酶切反应 | 第31页 |
·电泳分析 | 第31-32页 |
·目的条带的回收 | 第32页 |
·连接反应 | 第32页 |
·感受态细胞的制备 | 第32页 |
·感受态细胞的转化 | 第32-33页 |
·重组子的筛选与鉴定 | 第33页 |
·粗酶液的制备 | 第33-34页 |
·蛋白含量的测定 | 第34页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第34-35页 |
·Western blot 蛋白免疫实验 | 第35页 |
·酶活性的测定 | 第35-36页 |
·酿酒酵母重组菌木糖梯度培养 | 第36-37页 |
·以木糖为单一碳源的发酵评价 | 第37-39页 |
·葡萄糖/木糖混和碳源的发酵评价 | 第39-40页 |
第3章 结果与分析 | 第40-56页 |
·木糖代谢酶基因的克隆 | 第40页 |
·目的基因的 PCR 拼接 | 第40-41页 |
·质粒 PAUR123-X12A 与 PAUR123-SK 的构建及测序 | 第41-43页 |
·质粒 PAUR123-XL 的构建与测序 | 第43-44页 |
·重组表达载体转入酵母菌株 INVSC1 | 第44-45页 |
·粗酶液蛋白含量的测定 | 第45-46页 |
·WESTERN BLOT 蛋白免疫 | 第46页 |
·重组菌酶活性的测定 | 第46-49页 |
·NADPH 标准曲线 | 第46-47页 |
·NAD+标准曲线 | 第47页 |
·NADH 标准曲线 | 第47-48页 |
·粗酶液酶活性的测定 | 第48-49页 |
·木糖梯度培养 | 第49页 |
·以木糖为单一碳源的发酵评价 | 第49-51页 |
·重组菌生长曲线的测定 | 第49-50页 |
·重组菌发酵液分析 | 第50-51页 |
·葡萄糖/木糖混合碳源发酵评价 | 第51-56页 |
·重组菌生长曲线的测定 | 第51-53页 |
·重组菌发酵液的分析 | 第53-56页 |
第4章 讨论 | 第56-58页 |
第5章 结论与展望 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
附录一 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
作者简介 | 第66页 |