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拟南芥转录因子TCP17参与光信号转导和生长素合成

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
目录第5-9页
第一章 前言第9-17页
   ·光信号通路在植物的生长发育过程中起着重要作用第9-11页
   ·生长素的合成过程第11-12页
   ·TCP家族转录因子参与拟南芥生长发育过程多个方面第12-17页
第二章 材料与方法第17-48页
   ·基于GATE-WAY技术的基因克隆第17-18页
     ·所需试剂第17页
     ·实验步骤第17-18页
   ·转基因植株的获得第18页
     ·转化农杆菌第18页
     ·农杆菌转染植株第18页
     ·转基因植株鉴定第18页
   ·拟南芥基因组DNA快速提取法第18-19页
     ·材料与试剂第19页
     ·方法步骤第19页
   ·CTAB法分离植物基因组DNA第19-20页
     ·材料和试剂第19-20页
     ·方法步骤第20页
   ·染色质免疫共沉淀(CHIP)第20-23页
     ·材料试剂第20-21页
     ·方法步骤第21-23页
   ·反转录及RT-PCR第23-24页
     ·材料与试剂第23页
     ·方法步骤第23-24页
   ·Real Time PCR实时荧光定量检测第24-25页
     ·材料与试剂第24-25页
   ·SDS碱裂解法小量制备质粒DNA第25-26页
     ·材料和试剂第25-26页
     ·方法步骤第26页
   ·拟南芥总蛋白提取第26-28页
     ·试剂第27页
     ·方法步骤第27-28页
   ·Bradford法测定蛋白质浓度第28页
     ·材料与试剂第28页
     ·方法步骤第28页
   ·Western blot第28-32页
     ·材料与试剂第28-30页
     ·步骤和方法第30-32页
   ·蛋白表达纯化第32-36页
     ·表达载体的构建第32页
       ·材料与试剂第32页
       ·方法步骤第32页
     ·蛋白的诱导第32-33页
       ·材料与试剂第32页
       ·方法步骤第32-33页
     ·GST融合蛋白的纯化第33-34页
       ·材料与试剂第33-34页
       ·方法步骤第34页
     ·MBP融合蛋白的纯化第34-36页
       ·材料与试剂第35页
       ·方法步骤第35-36页
   ·酵母双杂交第36-38页
   ·EMSA第38-42页
     ·DNA 3’末端标记第38-39页
     ·标记效率检测第39-40页
     ·结合反应第40-41页
       ·EBNA对照反应第40-41页
     ·制备凝胶、预电泳第41页
     ·结合反应第41页
     ·电泳第41页
     ·转膜第41页
       ·紫外交联第41页
     ·检测第41-42页
   ·GUS染色材料与试剂第42-43页
     ·材料第42页
     ·试剂第42-43页
     ·方法第43页
   ·DAPI染色第43-44页
     ·材料与试剂第43页
     ·方法步骤第43-44页
   ·拟南芥种子的消毒处理第44页
   ·拟南芥土中播种,苗期日常管理第44-45页
   ·常用抗生素的配制第45-46页
   ·LB培养基的配制第46页
     ·高盐LB培养基的配制第46页
     ·低盐LB培养基的配制第46页
   ·MS培养基的配制第46-47页
   ·1/2MS培养基的配制第47-48页
第三章 实验结果第48-60页
   ·35S-TCPs转基因植株获得第48-50页
   ·TCP17在拟南芥生长发育中起着重要作用第50-52页
   ·TCP17组织定位第52-53页
   ·TCP17促进下胚轴伸长是光依赖性的第53-55页
   ·TCP17表达受光调控第55-56页
   ·TCP17调控生长素合成基因的表达第56-58页
   ·光信号通过TCP17调控YUCCA5表达第58-60页
第四章 讨论第60-63页
第五章 参考文献第63-69页
致谢第69页

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