摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
目录 | 第5-9页 |
第一章 前言 | 第9-17页 |
·光信号通路在植物的生长发育过程中起着重要作用 | 第9-11页 |
·生长素的合成过程 | 第11-12页 |
·TCP家族转录因子参与拟南芥生长发育过程多个方面 | 第12-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-48页 |
·基于GATE-WAY技术的基因克隆 | 第17-18页 |
·所需试剂 | 第17页 |
·实验步骤 | 第17-18页 |
·转基因植株的获得 | 第18页 |
·转化农杆菌 | 第18页 |
·农杆菌转染植株 | 第18页 |
·转基因植株鉴定 | 第18页 |
·拟南芥基因组DNA快速提取法 | 第18-19页 |
·材料与试剂 | 第19页 |
·方法步骤 | 第19页 |
·CTAB法分离植物基因组DNA | 第19-20页 |
·材料和试剂 | 第19-20页 |
·方法步骤 | 第20页 |
·染色质免疫共沉淀(CHIP) | 第20-23页 |
·材料试剂 | 第20-21页 |
·方法步骤 | 第21-23页 |
·反转录及RT-PCR | 第23-24页 |
·材料与试剂 | 第23页 |
·方法步骤 | 第23-24页 |
·Real Time PCR实时荧光定量检测 | 第24-25页 |
·材料与试剂 | 第24-25页 |
·SDS碱裂解法小量制备质粒DNA | 第25-26页 |
·材料和试剂 | 第25-26页 |
·方法步骤 | 第26页 |
·拟南芥总蛋白提取 | 第26-28页 |
·试剂 | 第27页 |
·方法步骤 | 第27-28页 |
·Bradford法测定蛋白质浓度 | 第28页 |
·材料与试剂 | 第28页 |
·方法步骤 | 第28页 |
·Western blot | 第28-32页 |
·材料与试剂 | 第28-30页 |
·步骤和方法 | 第30-32页 |
·蛋白表达纯化 | 第32-36页 |
·表达载体的构建 | 第32页 |
·材料与试剂 | 第32页 |
·方法步骤 | 第32页 |
·蛋白的诱导 | 第32-33页 |
·材料与试剂 | 第32页 |
·方法步骤 | 第32-33页 |
·GST融合蛋白的纯化 | 第33-34页 |
·材料与试剂 | 第33-34页 |
·方法步骤 | 第34页 |
·MBP融合蛋白的纯化 | 第34-36页 |
·材料与试剂 | 第35页 |
·方法步骤 | 第35-36页 |
·酵母双杂交 | 第36-38页 |
·EMSA | 第38-42页 |
·DNA 3’末端标记 | 第38-39页 |
·标记效率检测 | 第39-40页 |
·结合反应 | 第40-41页 |
·EBNA对照反应 | 第40-41页 |
·制备凝胶、预电泳 | 第41页 |
·结合反应 | 第41页 |
·电泳 | 第41页 |
·转膜 | 第41页 |
·紫外交联 | 第41页 |
·检测 | 第41-42页 |
·GUS染色材料与试剂 | 第42-43页 |
·材料 | 第42页 |
·试剂 | 第42-43页 |
·方法 | 第43页 |
·DAPI染色 | 第43-44页 |
·材料与试剂 | 第43页 |
·方法步骤 | 第43-44页 |
·拟南芥种子的消毒处理 | 第44页 |
·拟南芥土中播种,苗期日常管理 | 第44-45页 |
·常用抗生素的配制 | 第45-46页 |
·LB培养基的配制 | 第46页 |
·高盐LB培养基的配制 | 第46页 |
·低盐LB培养基的配制 | 第46页 |
·MS培养基的配制 | 第46-47页 |
·1/2MS培养基的配制 | 第47-48页 |
第三章 实验结果 | 第48-60页 |
·35S-TCPs转基因植株获得 | 第48-50页 |
·TCP17在拟南芥生长发育中起着重要作用 | 第50-52页 |
·TCP17组织定位 | 第52-53页 |
·TCP17促进下胚轴伸长是光依赖性的 | 第53-55页 |
·TCP17表达受光调控 | 第55-56页 |
·TCP17调控生长素合成基因的表达 | 第56-58页 |
·光信号通过TCP17调控YUCCA5表达 | 第58-60页 |
第四章 讨论 | 第60-63页 |
第五章 参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69页 |