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应用消减SELEX技术筛选乙肝表面抗原特异性核酸适配体

中文摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
第一章 绪论第10-24页
   ·核酸适配体第11-13页
     ·核酸适配体概述第11页
     ·核酸适配体与靶分子的相互作用原理第11-12页
     ·核酸适配体的特点第12-13页
   ·SELEX技术第13-19页
     ·SELEX技术的起源第13页
     ·SELEX技术的基本原理第13-15页
     ·SELEX技术的发展第15-19页
   ·核酸适配体在临床诊断中的应用第19-21页
     ·双位点结合测定(two-site binding assays)第19页
     ·流式细胞术(flow cytometry,FC)第19-20页
     ·生物传感器(biosensors)第20页
     ·荧光偏振分析(fluorescence polarization,FP)第20页
     ·分子信标(molecular beacon)第20页
     ·毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)第20-21页
   ·核酸适配体在临床治疗中的应用第21-23页
     ·抗病毒治疗第21页
     ·抗寄生虫治疗第21页
     ·抗肿瘤治疗第21-22页
     ·抗凝血治疗第22页
     ·抑制血管增生第22-23页
   ·展望第23-24页
第二章 利用SELEX技术筛选HBsAg的特异性核酸适配体第24-40页
   ·前言第24-25页
   ·材料与仪器第25-28页
     ·实验材料第25-26页
     ·主要试剂第26页
     ·主要溶液的配制第26-28页
     ·主要仪器第28页
   ·方法第28-34页
     ·靶分子HBsAg的活性检测第28页
     ·HBsAg与筛选介质环氧树脂的结合能力测定第28-29页
     ·HBsAg特异性核酸适配体的筛选第29-32页
     ·蛋白质-核酸斑点杂交实验鉴定HBsAg-ssDNA复合物第32-34页
     ·实时荧光定量PCR鉴定ssDNA富集程度第34页
   ·结果第34-38页
     ·HBsAg的活性检测第34-35页
     ·HBsAg与环氧树脂的结合能力测定第35页
     ·HBsAg与混合纤维素酯滤膜的结合能力第35-36页
     ·SELEX筛选后ssDNA富集程度第36页
     ·制备dsDNA模板的最佳循环数第36页
     ·制备ssDNA的最佳循环数第36-37页
     ·ssDNA~(-b)上生物素的活性第37页
     ·次级文库蛋白质-核酸斑点杂交实验第37-38页
     ·实时荧光定量PCR鉴定ssDNA富集程度第38页
   ·讨论第38-40页
第三章 HBsAg特异性核酸适配体的克隆、鉴定和测序第40-49页
   ·材料与仪器第40-41页
     ·实验材料第40页
     ·主要试剂的配制第40页
     ·主要溶液的配制第40-41页
     ·主要仪器第41页
   ·方法第41-45页
     ·次级文库寡核苷酸的克隆第41-43页
     ·通用引物和特异引物交错PCR鉴定阳性克隆第43-44页
     ·蛋白质-核酸斑点杂交实验筛选与HBsAg结合的核酸适配体第44-45页
     ·测序及二级结构预测第45页
   ·结果第45-48页
     ·阳性克隆的鉴定第45页
     ·阳性克隆ssDNA~(-b)的制备第45-47页
     ·阳性克隆蛋白质-核酸斑点杂交实验第47页
     ·HBsAg特异性核酸适配体序列及其二级结构第47-48页
   ·讨论第48页
   ·结论第48-49页
参考文献第49-54页
在学期间的研究成果第54-55页
致谢第55页

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