| 论文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-24页 |
| 1 盘基网柄菌中相关粘附分子的研究 | 第14-15页 |
| ·盘基网柄菌野生型细胞多细胞发育历程 | 第14-15页 |
| ·与细胞发育相关的粘附分子 | 第15页 |
| 2 尿囊酸酶的研究进展 | 第15-18页 |
| ·盘基网柄菌中中尿囊酸酶的研究情况 | 第16-18页 |
| 3 白三烯途径研究进展 | 第18-20页 |
| ·生物体内白三烯途径 | 第18-19页 |
| ·LTB4参与促炎反应的机制 | 第19页 |
| ·LTB4在肿瘤发生的研究 | 第19-20页 |
| 4 利用mRNA差异显示法分析两种细胞基因的差异表达 | 第20-22页 |
| ·mRNA差异显示法 | 第20-21页 |
| ·mRNA差异显示技术在盘基网柄菌中的应用 | 第21-22页 |
| 5 论文立论依据和研究意义 | 第22-24页 |
| 第二章 盘基网柄菌野生型细胞KAx-3和突变型细胞RNAi-allC在营养期阶段的形态观察 | 第24-28页 |
| 1 引言 | 第24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-25页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·器材 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·HL-5液体培养基 | 第24-25页 |
| ·盘基网柄菌野生型细胞KAX-3和突变型细胞RNAi—allC细胞的传代培养 | 第25页 |
| ·盘基网柄菌营养阶段细胞达到稳定期的形态观察 | 第25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-26页 |
| 4 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 mRNA差异显示法分析盘基网柄菌KAx-3和RNAi-allC细胞营养阶段稳定期基因差异表达 | 第28-36页 |
| 1 引言 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-33页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29-30页 |
| ·实验仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-33页 |
| ·稳定期细胞的收集 | 第31页 |
| ·玻璃器皿、金属物品和塑料制品的的处理 | 第31页 |
| ·总RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第32页 |
| ·PCR扩增反应 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-35页 |
| ·总RNA完整性检测和浓度测定 | 第33-34页 |
| ·总RNA完整性检测 | 第33页 |
| ·RNA浓度及OD值的测定 | 第33-34页 |
| ·盘基网柄菌mRNA水平野生型细胞KAx-3和突变型细胞RNAi-allC基因表达差异图谱 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 第四章 蓝白斑克隆筛选差异cDNA片段 | 第36-50页 |
| 1 引言 | 第36-37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-40页 |
| ·材料与试剂 | 第37页 |
| ·实验仪器 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-40页 |
| ·切胶回收差异DNA片段 | 第38页 |
| ·差异DNA片段的重组 | 第38页 |
| ·重组质粒的转染 | 第38-39页 |
| ·蓝白斑筛选及菌落PCR排除假阳性 | 第39-40页 |
| ·酶切验证目的基因条带 | 第40页 |
| ·差异基因片段的测序及分析 | 第40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-48页 |
| ·差异DNA片段的克隆与菌落的假阳性验证 | 第40-41页 |
| ·差异片段测序结果和分析 | 第41-48页 |
| ·差异基因片段B的测序结果 | 第41-42页 |
| ·将该序列在NCBI Nucleotide BLAST nr数据库中进行检索 | 第42-43页 |
| ·在NCBI blastx数据库中进行检索分析 | 第43-47页 |
| ·利用生物学软件对差异片段进行分析 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 差异基因在盘基网柄菌营养阶段稳定期的表达量的研究 | 第50-55页 |
| 1 引言 | 第50页 |
| 2 材料与方法 | 第50-52页 |
| ·实验材料 | 第50页 |
| ·器材 | 第50-51页 |
| ·试剂 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·cDNA模板完整性验证 | 第51页 |
| ·荧光定量PCR检测差异基因的表达 | 第51-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-53页 |
| ·cDNA模板完整性验证结果 | 第52页 |
| ·LTA4H-Like基因在盘基网柄菌野生型细胞KAx-3和突变型细胞RNAi-allC中表达量差异分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 第六章 Northern杂交验证排除假阳性 | 第55-62页 |
| 1 引言 | 第55页 |
| 2 材料和方法 | 第55-60页 |
| ·材料与试剂 | 第55-56页 |
| ·仪器设备 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-60页 |
| ·地高辛标记DNA探针 | 第56页 |
| ·探针标记效率的检测 | 第56-57页 |
| ·甲醛变性凝胶电泳分离RNA | 第57页 |
| ·RNA转膜 | 第57-58页 |
| ·杂交前工作溶液的制备 | 第58-59页 |
| ·预杂交 | 第59页 |
| ·杂交 | 第59页 |
| ·严谨洗膜 | 第59页 |
| ·显色反应 | 第59-60页 |
| 3 结果与分析 | 第60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
