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三角褐指藻miRNA筛选、作用机制及代谢流量分析

致谢第1-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-13页
第一章 引言第13-38页
   ·硅藻概述第13-19页
     ·硅藻的分布及影响因素第13-14页
     ·硅藻的经济价值及生态意义第14-16页
     ·硅藻的进化地位与二次吞噬假说第16-19页
     ·硅藻的分类第19页
   ·三角褐指藻概述第19-25页
     ·三角褐指藻形态特征第20-21页
     ·三角褐指藻备受关注的原因第21-22页
     ·三角褐指藻的基因组特点第22-23页
     ·三角褐指藻对营养盐限制的响应第23-24页
     ·三角褐指藻光合作用特点及研究现状第24-25页
   ·miRNA 特点及其在藻类中的研究现状第25-33页
     ·miRNA 的发现历程第25-26页
     ·miRNA 的特点第26-27页
     ·miRNA 的功能第27-28页
     ·动植物 miRNA 的差别第28-29页
     ·miRNA 研究方法第29-33页
     ·藻类 miRNA 研究现状第33页
   ·代谢流量分析及其在藻类研究中的应用第33-36页
   ·论文的研究内容第36-38页
第二章 三角褐指藻、喜温淡水红藻及假微型海链藻 miRNA 预测第38-54页
 引言第38-39页
   ·材料与方法第39-41页
     ·miRNA 数据集选取及基因组数据下载第39页
     ·miRNA 预测第39-40页
     ·miRNA 靶基因的预测第40-41页
     ·进化树构建第41页
   ·结果与讨论第41-54页
     ·三角褐指藻 miRNA 及靶基因的预测第41-45页
     ·假微型海链藻 miRNA 及靶基因的预测第45-46页
     ·喜温淡水红藻 miRNA 的预测第46-47页
     ·相同 miRNA 家族分析第47-51页
     ·三角褐指藻、假微型海链藻、喜温淡水红藻、拟南芥及小鼠中的相似蛋白数目第51-53页
     ·三角褐指藻和假微型海链藻中同时存在与动物及植物来源 miRNA 家族的可能性第53-54页
第三章 三角褐指藻小 RNA 测序及相关生物信息学分析第54-84页
 引言第54-55页
   ·材料与方法第55-63页
     ·藻种纯化第55页
     ·材料培养与收集第55页
     ·缺氮和缺硅处理第55-56页
     ·总 RNA 提取及检测第56页
     ·小 RNA 分离、文库的构建及测序第56-58页
     ·基础数据分析第58-59页
     ·miRNA 的识别第59-61页
     ·新 miRNA 靶基因预测第61页
     ·Northern 杂交第61-63页
   ·结果第63-79页
     ·三角褐指藻内源小 RNA第63-70页
     ·三角褐指藻 miRNA第70-75页
     ·三角褐指藻 miRNA 在正常、缺氮和缺硅条件下的表达模式及靶基因预测第75页
     ·三角褐指藻 siRNA第75-78页
     ·部分 miRNA 及其前体的表达的验证第78-79页
   ·讨论第79-83页
     ·三角褐指藻 miRNA 是否独立进化第79-80页
     ·miRNA 在三角褐指藻代谢中的可能作用第80-82页
     ·小 RNA 富集于 13 号染色体负链和叶绿体基因组正负链的可能原因第82页
     ·Northern 杂交未检测到成熟 miRNA 的原因第82-83页
   ·结论第83-84页
第四章 三角褐指藻代谢流量分析第84-97页
 引言第84-85页
   ·方法第85-87页
     ·材料培养第85页
     ·不同碳源优化第85页
     ·不同甘油浓度优化第85页
     ·不同营养盐条件培养第85页
     ·细胞生长及甘油浓度测定第85-86页
     ·(13)~C 稳定同位素标记第86页
     ·GC-MS 样品准备第86页
     ·GC-MS 样品用量优化第86页
     ·GC-MS 数据处理第86-87页
   ·结果第87-95页
     ·细胞干重与 OD730nm 的关系第87页
     ·碳源的选择第87-88页
     ·甘油浓度的确定第88-89页
     ·不同营养盐条件下三角褐指藻的生长第89-90页
     ·GC-MS 样品用量的确定第90-91页
     ·不同碳源适应对三角褐指藻代谢的影响第91-94页
     ·甘油培养下的三角褐指藻代谢流量分析第94-95页
   ·讨论第95-97页
     ·三角褐指藻对有机碳源的利用第95-96页
     ·三角褐指藻对不同碳源的适应第96-97页
第五章 三角褐指藻 C4相关基因荧光定量 PCR 及细胞染色第97-107页
 引言第97-98页
   ·方法第98-100页
     ·材料处理第98页
     ·RNA 提取及反转录第98页
     ·实时荧光定量 PCR第98-99页
     ·细胞染色第99-100页
   ·结果第100-106页
     ·三角褐指藻 ppdk、ca 和 pepck 在缺碳条件下的表达分析第100-101页
     ·三角褐指藻细胞染色结果第101-106页
   ·讨论第106-107页
结论第107-108页
论文的后续工作第108-109页
参考文献第109-128页
作者简历第128-129页
已完成或发表论文目录第129页

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