| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-19页 |
| ·IL-9 的发现及其基因调控 | 第10-12页 |
| ·IL-9 的发现 | 第10页 |
| ·IL-9 的分子生物学及其基因调控 | 第10-12页 |
| ·IL-9 与 IL-9R 之间的信号和表达 | 第12-13页 |
| ·IL-9 与其相关细胞的作用 | 第13-14页 |
| ·IL-9 与相关疾病 | 第14-16页 |
| ·IL-9 与哮喘 | 第14-15页 |
| ·IL-9 与寄生虫感染 | 第15-16页 |
| ·IL-9 与自身免疫性疾病 | 第16页 |
| ·IL-9 与 MEDI-528 药物 | 第16页 |
| ·研究背景及目标 | 第16-17页 |
| ·研究内容 | 第17-18页 |
| ·技术路线 | 第18-19页 |
| 第二章 克隆表达 pGEX-6P-2-IL-9/XL-1 基因工程菌 | 第19-31页 |
| ·实验材料 | 第19-21页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·主要试剂的配置 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-26页 |
| ·IL-9 基因的密码子优化 | 第21-22页 |
| ·全基因合成 IL-9 | 第22页 |
| ·pGEX-6P-2-IL-9 质粒的设计 | 第22页 |
| ·pGEX-6P-2-IL-9 表达载体的构建 | 第22-26页 |
| ·实验结果 | 第26-29页 |
| ·IL-9 基因扩增结果 | 第26页 |
| ·重组 pGEX-6P-2-IL-9 质粒的初步鉴定 | 第26-28页 |
| ·重组 pGEX-6P-2-IL-9 质粒基因测序结果及分析 | 第28-29页 |
| ·本章讨论 | 第29-31页 |
| ·重组 pGEX-6P-2-IL-9 质粒的设计 | 第29页 |
| ·重组 pGEX-6P-2-IL-9 质粒的构建 | 第29-30页 |
| ·重组 pGEX-6P-2-IL-9 质粒的鉴定 | 第30-31页 |
| 第三章 IL-9 重组载体的诱导表达及纯化 | 第31-44页 |
| ·实验材料 | 第31-35页 |
| ·重组基因工程菌 | 第31页 |
| ·实验耗材及主要仪器 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·主要试剂的配置 | 第32-35页 |
| ·实验方法 | 第35-38页 |
| ·pGEX-6P-2-IL-9/XL-1Blue（E.coli）重组菌的诱导表达 | 第35-36页 |
| ·pGEX-6P-2-IL-9/XL-1Blue（E.coli）重组菌的大量表达 | 第36页 |
| ·应用 SDS-PAGE 电泳对重组菌可溶性表达的鉴定 | 第36-37页 |
| ·利用 Glutathione Sepharose 4B 进行亲和纯化 IL-9 | 第37页 |
| ·lowry 法蛋白含量测定 | 第37-38页 |
| ·实验结果 | 第38-42页 |
| ·pGEX-6P-2-IL-9/XL-1Blue（E.coli）重组菌诱导表达最佳条件的探索 | 第38-40页 |
| ·pGEX-6P-2-IL-9/XL-1Blue（E.coli）重组菌的可溶性鉴定 | 第40页 |
| ·IL-9 蛋白纯化结果 | 第40-41页 |
| ·lowry 法蛋白测定结果 | 第41-42页 |
| ·本章讨论 | 第42-44页 |
| ·pGEX-6P-2-IL-9/XL-1Blue（E.coli）重组菌成功构建及诱导表达 | 第42页 |
| ·pGEX-6P-2-IL-9/XL-1Blue（E.coli）重组菌纯化 | 第42-43页 |
| ·IL-9 融合蛋白浓度的测定 | 第43-44页 |
| 第四章 重组 IL-9 蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 | 第44-56页 |
| ·实验材料 | 第44-46页 |
| ·实验动物和细胞 | 第44页 |
| ·实验耗材及主要仪器 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44-45页 |
| ·主要试剂的配制 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-50页 |
| ·BALA/C 小鼠的免疫 | 第46页 |
| ·最佳包被抗原的确定 | 第46-47页 |
| ·SP2/0 细胞复苏 | 第47页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第47-48页 |
| ·脾细胞的制备 | 第48页 |
| ·细胞融合 | 第48页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选及上清液中分泌的单克隆抗体检测 | 第48页 |
| ·杂交瘤细胞的亚克隆 | 第48-49页 |
| ·杂交瘤细胞株的鉴定及稳定性实验 | 第49页 |
| ·小鼠腹水单克隆抗体的制备及纯化 | 第49-50页 |
| ·单克隆抗体的亚型及特异性鉴定 | 第50页 |
| ·实验结果 | 第50-54页 |
| ·最佳包被抗原的确定 | 第50-51页 |
| ·细胞融合结果 | 第51页 |
| ·细胞融合前的细胞图片 | 第51页 |
| ·杂交瘤细胞的亚克隆 | 第51-52页 |
| ·杂交瘤细胞株的核型鉴定 | 第52页 |
| ·杂交瘤细胞株 2E5 稳定性实验 | 第52页 |
| ·小鼠腹水效价的测定 | 第52-53页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第53页 |
| ·单克隆抗体免疫印迹法鉴定 | 第53-54页 |
| ·单克隆抗体特异性鉴定 | 第54页 |
| ·本章讨论 | 第54-56页 |
| ·免疫原与免疫策略 | 第54页 |
| ·细胞融合及阳性克隆化 | 第54-55页 |
| ·鉴定杂交瘤细胞分泌单克隆抗体 | 第55页 |
| ·鼠源单克隆抗体的缺点及产品研发 | 第55-56页 |
| 第五章 全文总结及后续工作建议 | 第56-58页 |
| ·全文总结 | 第56页 |
| ·不足之处 | 第56-57页 |
| ·后续工作计划 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 文献综述 | 第64-71页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 附录 英文缩写索引 | 第71-73页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及取得的研究成果 | 第73页 |
