| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-27页 |
| ·巴西橡胶的发展简介 | 第9-10页 |
| ·巴西橡胶树组织培养的研究进展 | 第10-11页 |
| ·巴西橡胶树基因工程研究进展 | 第11-14页 |
| ·报告基因和选择标记基因 | 第13-14页 |
| ·转化方法 | 第14-22页 |
| ·农杆菌介导法 | 第15-20页 |
| ·农杆菌的转化特点以及转化机理 | 第16-19页 |
| ·农杆菌介导的转化方法 | 第19-20页 |
| ·受体植物材料对转化的影响 | 第20页 |
| ·培养及操作方法对转化的影响 | 第20页 |
| ·基因枪法 | 第20-22页 |
| ·CBF基因的研究进展 | 第22-25页 |
| ·COR15a冷诱导基因 | 第22-23页 |
| ·转录激活因子CBF基因 | 第23-25页 |
| ·CBF的结构和功能 | 第23-24页 |
| ·CBF基因的作用及特点 | 第24页 |
| ·CBF调节COR基因表达的机理 | 第24-25页 |
| ·调控CBF基因的表达 | 第25页 |
| ·本研究的技术路线 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-40页 |
| ·巴西橡胶树的组织培养 | 第27-28页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·研究方法 | 第27-28页 |
| ·组织培养过程 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·农杆菌法和基因枪法遗传转化巴西橡胶 | 第28-40页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·质粒及农杆菌菌株 | 第28-29页 |
| ·受体材料 | 第29页 |
| ·农杆菌培养基 | 第29页 |
| ·重要试剂、酶和试剂盒 | 第29-30页 |
| ·农杆菌法遗传转化巴西橡胶树 | 第30-32页 |
| ·潮霉素(Hygromycin B)筛选压力的确定 | 第30页 |
| ·头孢霉素(Cefalexin)对愈伤组织再生的影响 | 第30页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第30-31页 |
| ·农杆菌转化步骤 | 第31页 |
| ·转化材料的选择 | 第31页 |
| ·农杆菌侵染的时间对材料的影响 | 第31页 |
| ·不同的共培养时间对抑菌影响 | 第31页 |
| ·不同的共培养温度对抑菌影响 | 第31-32页 |
| ·不同抑菌抗生素浓度对愈伤组织的影响 | 第32页 |
| ·基因枪法遗传转化巴西橡胶树 | 第32-34页 |
| ·重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第32-33页 |
| ·基因枪法转化步骤 | 第33-34页 |
| ·转化植株的检测 | 第34-40页 |
| ·CTAB法提取植物的总DNA | 第34页 |
| ·PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·转基因文心兰植株的Southern Blot检测 | 第35-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-47页 |
| ·农杆菌介导法转化巴西橡胶 | 第40-44页 |
| ·转化材料的选择 | 第40页 |
| ·农杆菌侵染时间对材料的影响 | 第40-42页 |
| ·共培养时间不同对抑菌影响 | 第42页 |
| ·侵染后共培养温度不同对抑菌影响 | 第42-43页 |
| ·不同Cef浓度和培养方式的抑菌效果 | 第43页 |
| ·侵染后诱导出胚情况 | 第43-44页 |
| ·基因枪法遗传转化巴西橡胶 | 第44-47页 |
| ·潮霉素(Hyg)对橡胶愈伤组织筛选压力浓度的确定 | 第44页 |
| ·基因枪轰击花药愈伤组织 | 第44页 |
| ·胚状体诱导出苗 | 第44-45页 |
| ·转基因橡胶PCR检测及扩繁 | 第45-46页 |
| ·转基因橡胶的Southern Blot检测 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| ·实验材料的制约 | 第47-48页 |
| ·试验新的受体材料 | 第48页 |
| ·CBF3基因转入巴西橡胶树 | 第48页 |
| ·后续工作展望 | 第48-49页 |
| ·橡胶树遗传转化体系研究的重要意义 | 第49页 |
| ·将抗寒基因导入橡胶树的意义 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 附图 | 第51-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 缩写词及其英汉对照 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
