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磷硫酰化DNA在细菌中作为抗氧化剂的机制研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
符号说明第14-18页
第一章 文献综述第18-48页
   ·表观遗传修饰第18-21页
     ·DNA甲基化修饰的过程及检测方法第18-19页
     ·胞嘧啶的甲基化修饰和异染色质及转录抑制有关第19页
     ·胞嘧啶在基因组中分布不均并且分量较低第19-20页
     ·与染色体的复制有关第20页
     ·DNA甲基化的去除可以通过剪切m-5C残基来完成第20页
     ·对环境因子的长期适应性第20-21页
   ·DNA骨架的磷硫酰化修饰第21-38页
     ·硫修饰DNA电泳过程中的降解现象(Dnd现象)第22-28页
     ·硫修饰DNA的遗传学和分子生物学第28-30页
     ·硫修饰DNA的结构确定第30-33页
     ·硫修饰在自然界中广泛的分布第33-37页
     ·NA磷硫酰化修饰的生物学意义第37-38页
   ·细菌对光氧化压力的响应第38-41页
     ·I型ROS第39-40页
     ·II型ROS第40-41页
   ·DNA的氧化损伤第41-46页
   ·本研究内容和目的第46-48页
     ·本研究基础第46页
     ·本研究内容和目的第46-48页
第二章 材料与方法第48-60页
   ·实验材料第48-52页
     ·菌株(表 2-1)第48页
     ·质粒(表 2-2)第48-49页
     ·培养基和化学试剂第49-51页
     ·底物和标准品的化学合成第51-52页
   ·实验方法第52-60页
第三章 磷硫酰化二核苷体外氧化切割方法的建立第60-71页
   ·前沿第60-61页
   ·结果与分析第61-68页
     ·磷硫酰化二乙酯和PAA-TAE的反应第61-62页
     ·磷硫酰化二核苷dGSA和PAA-TAE的反应第62-63页
     ·R和S构象的磷硫酰化二核苷与PAA-TAE激活液的反应第63-64页
     ·不同种类的磷硫酰化二核苷的模拟实验第64-66页
     ·PAA与其他缓冲液的复配作用第66-68页
   ·本章小结第68-71页
第四章 磷硫酰化DNA电泳过程中降解的机制第71-108页
   ·前言第71-72页
   ·结果与分析第72-106页
     ·纯水中dG~SA和PAA的氧化切割反应第72-74页
     ·PAA和Tris溶液的复配对dG~SA切割作用第74-75页
     ·PAA和乙酸溶液的复配对dG~SA氧化切割作用第75-76页
     ·dG~SA可以通过两步反应进行裂解第76-79页
     ·dG~SA被PAA处理后化合物 2 的结构预测第79-85页
     ·dG~SA经PAA处理后各个组分的结构预测第85-87页
     ·PAA处理dG~SA后产物的结构确证第87-94页
     ·磷硫酰化酯键中硫的去向第94-100页
     ·氢膦酸二核苷在pH7.0 条件下可以被氧化成正常的二核苷第100-103页
     ·磷硫酰化DNA降解过程解析第103-106页
   ·本章小结第106-108页
第五章 过氧化氢对磷硫酰化DNA的氧化作用第108-117页
   ·前言第108-109页
   ·结果与分析第109-115页
     ·过氧化氢可以将pH8.0 Tris-HCl缓冲液中的dG~SA氧化到正常二核苷dG~OA第109-111页
     ·水溶液中的dG~SA和过氧化氢反应第111-112页
     ·dG~SA在不同的溶液中被过氧化氢氧化第112-113页
     ·dG~SA在不同pH的溶液中被过氧化氢氧化第113-115页
   ·本章小结第115-117页
第六章 细菌中的磷硫酰化DNA作为抗氧化剂保护DNA第117-141页
   ·前言第117-118页
   ·结果与分析第118-137页
     ·低浓度过氧化氢可以dG~SA生成正常二核苷dG~OA第118-121页
     ·过氧化氢可以被磷硫酰化二核苷消耗第121-123页
     ·不同浓度PAA可以将dG~SA氧化到不同的氧化切割模式第123-125页
     ·10 μM过氧乙酸可以氧化dG~SA到正常二核苷dG~OA第125-127页
     ·磷硫酰化DNA菌株能够抵抗一定量的过氧化氢第127-131页
     ·过氧化氢处理后的沙门氏菌基因组DNA变化第131-133页
     ·磷硫酰化DNA在沙门氏菌体内被过氧化氢脱硫第133-135页
     ·磷硫酰化DNA赋予大肠杆菌抵抗过氧化氢能力第135-137页
   ·本章小结第137-141页
第七章 沙门氏菌Dnd B蛋白功能初探第141-166页
   ·前言第141-142页
   ·结果与分析第142-165页
     ·沙门氏菌Dnd B蛋白的一些生物信息学分析第142-143页
     ·沙门氏菌Dnd B蛋白在大肠杆菌异源宿主中的表达及纯化第143-147页
     ·异源表达的沙门氏菌Dnd B蛋白确证第147-148页
     ·Dnd B蛋白的PCS纳米粒度分析第148-149页
     ·Dnd B蛋白具有结合cccDNA的活性第149-153页
     ·Dnd B蛋白能够结合PCR产物第153-155页
     ·Dnd B蛋白能够结合RNA分子第155-157页
     ·通过CD光谱检测能够引起Dnd B响应的辅因子第157-159页
     ·辅因子加入后Dnd B蛋白对cccDNA的作用第159-165页
   ·本章小结第165-166页
第八章 本研究工作总结和展望第166-173页
   ·本研究工作总结第166-169页
   ·主要创新点第169页
   ·本研究工作展望第169-173页
参考文献第173-184页
致谢第184-188页
攻读学位期间发表学术论文第188-189页
博士学位论文答辩决议书第189-191页

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