| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 BBTV生物学特征 | 第12-14页 |
| ·BBTV传播方式及寄主 | 第12页 |
| ·表现症状 | 第12-13页 |
| ·病害导致生理及细胞形态变化 | 第13页 |
| ·BBTD动态研究 | 第13-14页 |
| 2 BBTV分子生物学研究新进展 | 第14-19页 |
| ·BBTV的分类地位 | 第14页 |
| ·BBTV株系分化 | 第14-15页 |
| ·BBTV结构及特征 | 第15页 |
| ·BBTV基因组结构研究 | 第15-16页 |
| ·DNA1-6组份编码蛋白研究 | 第16-18页 |
| ·BBTV启动子的研究进展 | 第18页 |
| ·BBTV沉默抑制子 | 第18-19页 |
| 3 BBTV检测技术 | 第19-20页 |
| 4 BBTV的防治 | 第20-21页 |
| ·传统防治措施 | 第20页 |
| ·抗病毒基因工程 | 第20-21页 |
| 5 展望 | 第21-22页 |
| 6 研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 7 技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 香蕉束顶病毒全基因组的克隆 | 第24-44页 |
| 1 材料与方法 | 第24-29页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·宿主菌与质粒载体 | 第24页 |
| ·酶、抗体和化学试剂 | 第24-25页 |
| ·数据及分析软件 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-29页 |
| ·TAS-ELISA检测 | 第25页 |
| ·引物设计 | 第25-26页 |
| ·病样总DNA提取 | 第26页 |
| ·部分序列PCR扩增 | 第26-28页 |
| ·全长序列PCR扩增 | 第28页 |
| ·PCR产物的回收纯化及克隆 | 第28页 |
| ·基因组编码蛋白基本特性和功能基序预测 | 第28页 |
| ·序列及系统发育分析 | 第28-29页 |
| ·DNA2 UTR分析 | 第29页 |
| ·Satellite DNA系统进化树的构建 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-41页 |
| ·TAS-ELISA检测结果 | 第29页 |
| ·BBTV基因组的克隆及序列分析 | 第29-31页 |
| ·基因组非编码区序列分析 | 第31-33页 |
| ·BBTV系统进化分析 | 第33-34页 |
| ·BBTV DNA3系统进化分析 | 第34页 |
| ·BBTV DNA1系统进化分析 | 第34页 |
| ·BBTV satellite DNA研究 | 第34-36页 |
| ·Satellite DNA UTR分析 | 第36-37页 |
| ·Satellite DNA和DNA1编码蛋白理化性质 | 第37-38页 |
| ·Rep蛋白细胞内定位、信号肽分析 | 第38页 |
| ·Rep蛋白的功能预测及结构分析 | 第38-41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| 4 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 BBTV DNA2 ORF分析及自激活验证 | 第44-66页 |
| 1 材料与方法 | 第44-55页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·毒源 | 第44页 |
| ·质粒与菌株 | 第44页 |
| ·酶和化学试剂 | 第44-45页 |
| ·主要仪器设备 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-55页 |
| ·海南BBTV DNA2 ORF推测 | 第45-46页 |
| ·Race引物设计 | 第46页 |
| ·染病香蕉总RNA提取 | 第46页 |
| ·反转录成双链cDNA | 第46-47页 |
| ·cDNA 3’和5’末端扩增 | 第47-48页 |
| ·连接、转化、鉴定及测序 | 第48页 |
| ·Race结果分析 | 第48-49页 |
| ·酵母双杂交引物设计 | 第49页 |
| ·Haikou 4 DNA2 ORF编码区PCR扩增 | 第49-50页 |
| ·BP重组构建入门克隆、转化及鉴定 | 第50-51页 |
| ·PCR扩增目的基因、LR重组及鉴定 | 第51-52页 |
| ·酵母细胞表型鉴定及诱饵质粒转化 | 第52-54页 |
| ·诱饵质粒自激活鉴定 | 第54-55页 |
| 2 实验结果 | 第55-64页 |
| ·染病香蕉总RNA提取 | 第55页 |
| ·cDNA3’和5’末端扩增 | 第55-56页 |
| ·Race结果分析 | 第56-58页 |
| ·Haikou 4 DNA2 ORF编码区PCR扩增 | 第58-59页 |
| ·pDONR~(TM)207-DNA2 ORF重组质粒鉴定 | 第59页 |
| ·含部分pDONR~(TM)207质粒的DNA2 ORF克隆 | 第59-60页 |
| ·pDEST~(TM)32-DNA2 ORF PCR鉴定及质粒提取 | 第60页 |
| ·pDEST~(TM)32-DNA2 ORF测序结果 | 第60-61页 |
| ·酵母菌株MaV203表型鉴定 | 第61页 |
| ·诱饵质粒的毒性检测 | 第61-62页 |
| ·诱饵质粒的自激活作用检测 | 第62-64页 |
| 3 讨论 | 第64-65页 |
| 4 小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 项目资助 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 附录A 缩略词 | 第76-77页 |
| 附录B 常用试剂及缓冲液的配制 | 第77-78页 |
| 附录C BBTV Haikou 2和BBTV Haikou 4全基因组序列 | 第78-85页 |
