苦瓜降糖多肽的研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 第1章 前言背景 | 第9-17页 |
| ·糖尿病研究进展 | 第9-11页 |
| ·糖尿病的现状 | 第9页 |
| ·糖尿病的发病机理 | 第9-10页 |
| ·糖尿病的治疗手段 | 第10-11页 |
| ·苦瓜降血糖作用的研究进展 | 第11-16页 |
| ·苦瓜的研究概述 | 第11-12页 |
| ·苦瓜的药用价值 | 第12-13页 |
| ·苦瓜降血糖作用 | 第13-14页 |
| ·苦瓜中已知的降糖多肽 | 第14页 |
| ·苦瓜的降血糖作用机理 | 第14-15页 |
| ·苦瓜降血糖药物的应用前景 | 第15-16页 |
| ·研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第17-28页 |
| ·材料与仪器 | 第17-22页 |
| ·化学试剂 | 第17页 |
| ·生物试剂 | 第17-18页 |
| ·细菌培养基 | 第18-20页 |
| ·大肠杆菌菌种 | 第20-21页 |
| ·载体质粒 | 第21页 |
| ·实验仪器与设备 | 第21-22页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-28页 |
| ·菌种保藏 | 第22页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第23页 |
| ·碱抽法制备质粒 | 第23-24页 |
| ·试剂盒抽提质粒DNA | 第24页 |
| ·DNA的酶切 | 第24页 |
| ·DNA的连接 | 第24页 |
| ·DNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第24-25页 |
| ·DNA的凝胶回收试剂盒法 | 第25页 |
| ·重组目的基因的表达 | 第25-26页 |
| ·蛋白质表达量检测—SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第26页 |
| ·细胞破碎(冻融,超声) | 第26-27页 |
| ·Ni-NTA Agarose柱层析方法 | 第27页 |
| ·重组菌诱导条件及培养条件优化 | 第27-28页 |
| 第3章 实验结果与分析 | 第28-52页 |
| ·多肽P的体外拼接及表达 | 第28-44页 |
| ·多肽P基因的反向翻译 | 第28-29页 |
| ·多肽P基因的引物设计 | 第29-30页 |
| ·多肽P基因的体外拼接PCR | 第30-37页 |
| ·重组质粒的测序及序列比对 | 第37页 |
| ·多肽P表达载体的构建 | 第37-39页 |
| ·多肽P的表达及纯化 | 第39-40页 |
| ·多肽P的表达优化 | 第40-43页 |
| ·多肽P样品的药理预实验 | 第43-44页 |
| ·MC6串联表达样品的纯化酸解及药理活性实验 | 第44-52页 |
| ·PET32a-MC_1-(MC2)_9的表达 | 第44-45页 |
| ·PET32a-MC1-(MC2)_9的纯化 | 第45-46页 |
| ·重组菌诱导条件的优化 | 第46-48页 |
| ·pET32a-(MC1)-(MC2)_9的酸解 | 第48-51页 |
| ·MC6样品药理预实验 | 第51-52页 |
| 第4章 讨论与展望 | 第52-54页 |
| ·体外拼接苦瓜多肽P基因 | 第52-53页 |
| ·MC6的串联表达和酸解 | 第53页 |
| ·实验展望 | 第53-54页 |
| ·多肽P基因序列的获得 | 第53-54页 |
| ·苦瓜多肽P和MC6降糖机理的研究 | 第54页 |
| ·苦瓜多肽P和MC6在苦瓜中生物活性的研究 | 第54页 |
| ·MC6样品的制备 | 第54页 |
| 第5章 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
