中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
前言 | 第10-13页 |
综述 | 第13-49页 |
综述一 猪轮状病毒感染及其病原分子生物学研究进展 | 第13-25页 |
综述二 猪传染性胃肠炎及其病原分子生物学研究进展 | 第25-36页 |
综述三 核酸免疫的研究进展 | 第36-49页 |
材料与方法 | 第49-59页 |
1. 主要实验材料 | 第49-50页 |
1.1 病毒与细胞 | 第49页 |
1.2 主要试剂与药品 | 第49页 |
1.3 引物 | 第49-50页 |
1.4 质粒与感受态菌株 | 第50页 |
1.5 实验动物 | 第50页 |
1.6 主要实验仪器 | 第50页 |
2. 实验方法 | 第50-59页 |
2.1 病毒的培养增殖 | 第50-51页 |
2.2 RNA提取 | 第51页 |
2.3 RT-PCR | 第51-52页 |
2.4 重组质粒pMD18-T-JL94/VP7、VP6的构建 | 第52页 |
2.5 重组质粒pMD18-T-JL94/VP7的鉴定 | 第52页 |
2.6 重组质粒pMD18-T-JL94/VP6的鉴定 | 第52页 |
2.7 重组质粒pMD18-T-VP7的构建 | 第52-53页 |
2.8 重组真核表达载体pcDNA-vp7的构建 | 第53页 |
2.9 重组真核表达载体pcDNA-N的构建 | 第53-54页 |
2.10 实验动物免疫及血液样品采集 | 第54页 |
2.11 抗体检测 | 第54-58页 |
2.12 CD4~+、CD8~+T细胞检测 | 第58-59页 |
实验结果 | 第59-74页 |
1. 重组质粒pMD18-T-JL94/VP7的鉴定 | 第59-60页 |
1.1 PCR产物电泳 | 第59页 |
1.2 重组质粒pMD18-T-JL94/VP7的鉴定 | 第59-60页 |
2. 重组质粒pMD18-T-JL94/VP6的鉴定 | 第60-62页 |
2.1 PCR产物电泳 | 第60页 |
2.2 重组质粒pMD18-T-JL94/VP6的鉴定 | 第60-62页 |
3. 重组质粒pMD18-T-VP7的鉴定 | 第62页 |
3.1 PCR产物电泳 | 第62页 |
3.2 重组质粒pMD18-T-VP7的酶切鉴定 | 第62页 |
4. 重组真核表达载体pcDNA-vp7的鉴定 | 第62-63页 |
4.1 酶切鉴定 | 第62-63页 |
4.2 序列检测 | 第63页 |
5. 重组真核表达载体pcDNA-N的鉴定 | 第63-66页 |
5.1 PCR产物鉴定 | 第63页 |
5.2 真核表达载体pcDNA-N的鉴定 | 第63-66页 |
6. 重组真核表达质粒浓度检测 | 第66页 |
7. 抗体检测 | 第66页 |
7.1 pcDNA-VP7免疫后的抗体检测 | 第66页 |
7.2 pcDNA-N免疫后的抗体检测 | 第66页 |
8. CD4~+、CD8~+T细胞的检测 | 第66-74页 |
8.1 pcDNA-VP7免疫后的CD4~+T细胞检测 | 第67页 |
8.2 pcDNA-N免疫后的CD4~+T细胞检测 | 第67页 |
8.3 pcDNA-VP7免疫后的CD8~+T细胞检测 | 第67页 |
8.4 pcDNA-N免疫后的CD8~+T细胞检测 | 第67-74页 |
讨论 | 第74-80页 |
结论 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-97页 |
致谢 | 第97页 |