英文缩略词 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第1章 前言 | 第11-14页 |
第2章 利用p53 的重要调控分子筛选人肝脏cDNA 文库 | 第14-39页 |
1 材料 | 第17-19页 |
·菌株 | 第17页 |
·质粒 | 第17页 |
·引物 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·cDNA 文库 | 第18页 |
·培养基及常用试剂的配置 | 第18页 |
·主要仪器设备 | 第18-19页 |
2 方法 | 第19-26页 |
·分子克隆技术 | 第19页 |
·RT-PCR | 第19页 |
·人肝脏cDNA 文库质量控制、扩增及提取 | 第19-20页 |
·酵母双杂交筛选 | 第20-26页 |
3 结果 | 第26-36页 |
·人肝脏cDNA 文库的滴度及代表性 | 第26-27页 |
·诱饵载体构建 | 第27页 |
·自激活检测 | 第27-28页 |
·酵母双杂交筛选 | 第28-36页 |
4 讨论 | 第36-39页 |
第3章 相互作用数据的评价和挖掘 | 第39-65页 |
1 材料 | 第39-41页 |
·细胞 | 第39页 |
·质粒 | 第39页 |
·引物 | 第39-40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·培养基及常用试剂的配置 | 第40-41页 |
2 方法 | 第41-42页 |
·免疫共沉淀实验 | 第41-42页 |
·生物信息学分析方法 | 第42页 |
3 结果 | 第42-62页 |
·免疫共沉淀验证 | 第42-44页 |
·生物信息学分析结果 | 第44-57页 |
·相互作用网络的构建 | 第57-61页 |
·相互作用数据的挖掘 | 第61-62页 |
4 讨论 | 第62-65页 |
第4章 核糖体蛋白L26 抑制MDM2 对p53 的泛素化及降解并活化p53 | 第65-74页 |
1 材料 | 第66-67页 |
·细胞 | 第66页 |
·质粒 | 第66页 |
·引物 | 第66页 |
·主要试剂 | 第66-67页 |
2 方法 | 第67页 |
·免疫共沉淀实验 | 第67页 |
·MG132 处理细胞 | 第67页 |
·RNAi 实验 | 第67页 |
·体内泛素化实验 | 第67页 |
3 结果 | 第67-71页 |
·MDM2 与RPL26 相互作用的验证 | 第67-68页 |
·RPL26 与MDM2 相互作用的结构域 | 第68-69页 |
·RPL26 抑制MDM2 介导的p53 泛素化 | 第69-70页 |
·RPL26 通过抑制MDM2 来增强p53 的转录活性 | 第70-71页 |
4 讨论 | 第71-74页 |
总结和展望 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-82页 |
附录 | 第82-95页 |
附录A 综述 | 第82-87页 |
附录B 引物序列及酶切位点 | 第87-91页 |
附录C 结构域注释 | 第91-95页 |
在读期间发表或投稿的论文 | 第95-96页 |
个人简历 | 第96-97页 |
致谢 | 第97页 |