摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
·引言 | 第10页 |
·蚜虫嗅觉行为 | 第10-12页 |
·报警信息素 | 第10-11页 |
·寄主植物的吸引 | 第11-12页 |
·植物驱避 | 第12页 |
·G 蛋白介导的嗅觉分子机制研究 | 第12-14页 |
·G 蛋白概述 | 第13页 |
·与嗅觉相关的 G 蛋白类型 | 第13-14页 |
·G 蛋白信号转导与嗅觉反应 | 第14页 |
·昆虫杆状病毒表达系统 | 第14-16页 |
·昆虫杆状病毒概况 | 第14-15页 |
·杆状病毒载体表达系统的特点 | 第15-16页 |
·Gateway 技术及 BaculoDirect 杆状病毒表达系统 | 第16页 |
·本研究目的和意义 | 第16-18页 |
第二章 编码麦长管蚜 GQα蛋白的基因克隆 | 第18-39页 |
·材料与方法 | 第18-29页 |
·供试昆虫 | 第18页 |
·培养基 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·仪器设备 | 第19-20页 |
·试验技术路线 | 第20页 |
·总 RNA 的提取 | 第20-21页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第21页 |
·用于扩增麦长管蚜 Gqα基因的引物- | 第21-22页 |
·RT-PCR 反应 | 第22页 |
·Gqα5′-RACE 反应 | 第22-25页 |
·Gqα3′-RACE 反应 | 第25-27页 |
·PCR 和 RACE 产物的回收纯化 | 第27页 |
·连接反应 | 第27-28页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
·转化大肠杆菌 | 第28页 |
·质粒 DNA 的小量提取 | 第28页 |
·菌落 PCR 鉴定阳性克隆 | 第28-29页 |
·序列测定 | 第29页 |
·结果与分析 | 第29-37页 |
·G 蛋白α亚基的基因特异性片段扩增 | 第29-30页 |
·G 蛋白α亚基的3′-RACE 结果 | 第30-31页 |
·G 蛋白α亚基的5′-RACE 结果 | 第31-32页 |
·目的基因全长cDNA 序列的获取 | 第32-33页 |
·目的基因氨基酸序列相似性的比较结果 | 第33-36页 |
·预测目的蛋白分子量、等电点、疏水性及其二级结构特征 | 第36-37页 |
·目的蛋白氨基酸序列保守区搜索结果 | 第37页 |
·结论与讨论 | 第37-39页 |
第三章 麦长管蚜GQα蛋白的真核表达 | 第39-54页 |
·材料 | 第40-42页 |
·供试材料 | 第40页 |
·培养基 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40-42页 |
·仪器设备 | 第42页 |
·Gqα基因真核表达相关引物 | 第42页 |
·方法 | 第42-50页 |
·利用 TOPO 技术构建入门载体 | 第42-46页 |
·麦长管蚜 Gqα融合蛋白表达载体的构建及其表达 | 第46-49页 |
·插入序列及表达蛋白检测 | 第49-50页 |
·结果与分析 | 第50-52页 |
·入门载体的构建 | 第50页 |
·V5-Hi56Gqα融合表达载体的成功构建 | 第50页 |
·重组蛋白表达结果 | 第50-52页 |
·结论与讨论 | 第52-54页 |
·蛋白表达的结论及表达载体构建过程的讨论 | 第52页 |
·下一步工作计划 | 第52-54页 |
第四章 全文结论 | 第54-56页 |
·扩增麦长管蚜 GQα基因 | 第54页 |
·麦长管蚜 GQα序列分析 | 第54-55页 |
·麦长管蚜 GQα基因在 TN 细胞中的表达 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
致谢 | 第61-63页 |
作者简历 | 第63页 |