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麦长管蚜嗅觉相关蛋白Gqα基因的克隆及真核表达

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 文献综述第10-18页
   ·引言第10页
   ·蚜虫嗅觉行为第10-12页
     ·报警信息素第10-11页
     ·寄主植物的吸引第11-12页
     ·植物驱避第12页
   ·G 蛋白介导的嗅觉分子机制研究第12-14页
     ·G 蛋白概述第13页
     ·与嗅觉相关的 G 蛋白类型第13-14页
     ·G 蛋白信号转导与嗅觉反应第14页
   ·昆虫杆状病毒表达系统第14-16页
     ·昆虫杆状病毒概况第14-15页
     ·杆状病毒载体表达系统的特点第15-16页
     ·Gateway 技术及 BaculoDirect 杆状病毒表达系统第16页
   ·本研究目的和意义第16-18页
第二章 编码麦长管蚜 GQα蛋白的基因克隆第18-39页
   ·材料与方法第18-29页
     ·供试昆虫第18页
     ·培养基第18页
     ·主要试剂第18-19页
     ·仪器设备第19-20页
     ·试验技术路线第20页
     ·总 RNA 的提取第20-21页
     ·cDNA 第一链的合成第21页
     ·用于扩增麦长管蚜 Gqα基因的引物-第21-22页
     ·RT-PCR 反应第22页
     ·Gqα5′-RACE 反应第22-25页
     ·Gqα3′-RACE 反应第25-27页
     ·PCR 和 RACE 产物的回收纯化第27页
     ·连接反应第27-28页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第28页
     ·转化大肠杆菌第28页
     ·质粒 DNA 的小量提取第28页
     ·菌落 PCR 鉴定阳性克隆第28-29页
     ·序列测定第29页
   ·结果与分析第29-37页
     ·G 蛋白α亚基的基因特异性片段扩增第29-30页
     ·G 蛋白α亚基的3′-RACE 结果第30-31页
     ·G 蛋白α亚基的5′-RACE 结果第31-32页
     ·目的基因全长cDNA 序列的获取第32-33页
     ·目的基因氨基酸序列相似性的比较结果第33-36页
     ·预测目的蛋白分子量、等电点、疏水性及其二级结构特征第36-37页
     ·目的蛋白氨基酸序列保守区搜索结果第37页
   ·结论与讨论第37-39页
第三章 麦长管蚜GQα蛋白的真核表达第39-54页
   ·材料第40-42页
     ·供试材料第40页
     ·培养基第40页
     ·主要试剂第40-42页
     ·仪器设备第42页
     ·Gqα基因真核表达相关引物第42页
   ·方法第42-50页
     ·利用 TOPO 技术构建入门载体第42-46页
     ·麦长管蚜 Gqα融合蛋白表达载体的构建及其表达第46-49页
     ·插入序列及表达蛋白检测第49-50页
   ·结果与分析第50-52页
     ·入门载体的构建第50页
     ·V5-Hi56Gqα融合表达载体的成功构建第50页
     ·重组蛋白表达结果第50-52页
   ·结论与讨论第52-54页
     ·蛋白表达的结论及表达载体构建过程的讨论第52页
     ·下一步工作计划第52-54页
第四章 全文结论第54-56页
   ·扩增麦长管蚜 GQα基因第54页
   ·麦长管蚜 GQα序列分析第54-55页
   ·麦长管蚜 GQα基因在 TN 细胞中的表达第55-56页
参考文献第56-61页
致谢第61-63页
作者简历第63页

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