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Sry基因沉默对小鼠胚胎性别决定基因及性腺发育的影响

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
第一章 文献综述第13-30页
   ·哺乳动物性别决定机制的研究进展第13-14页
     ·以染色体为基础的性别决定机制第13页
     ·哺乳动物性别决定的两个指导原则第13-14页
   ·TDF 的定位历程及SRY 的发现第14-16页
     ·TDF 的定位历程第14-15页
     ·SRY 是睾丸决定因子的证据第15-16页
   ·SRY 结构及其功能第16-23页
     ·SRY 基因的结构、定位第16页
     ·SRY 蛋白的结构第16-17页
     ·Sry 在生殖脊中的表达第17-18页
     ·Sry 在性腺发育中的调控作用第18-19页
     ·Sry 的基因调控网络中的重要基因第19-22页
     ·哺乳动物早期性别决定的分子模型第22-23页
   ·RNA 干扰在哺乳动物中的研究进展第23-26页
     ·RNAi 在哺乳动物中的分子机制第23-24页
     ·RNA 干扰技术在哺乳动物中的应用第24-26页
   ·siRNA 导入哺乳动物体内的方法探讨第26-29页
     ·siRNA 导入机体所用的载体第26-27页
     ·siRNA 导入哺乳动物体内的方法第27-28页
     ·问题及展望第28-29页
   ·本研究的目的和意义第29-30页
第二章 SRY 基因干扰载体重构及其导入小鼠胚胎的方法研究第30-42页
   ·实验材料第30-31页
     ·实验动物第30页
     ·菌种及质粒第30-31页
     ·主要的实验仪器和器械第31页
   ·实验方法第31-38页
     ·重组载体pSry565-EGFP 和pControl-EGFP 的构建第31-35页
     ·尾静脉注射法导入siRNA 表达质粒第35-38页
   ·结果与分析第38-39页
     ·重组载体的鉴定第38-39页
     ·重组质粒载体在小鼠胚胎中的表达情况第39页
   ·讨论第39-40页
   ·小结第40-42页
第三章 SRY 基因沉默及其对性别调控相关基因表达的影响第42-53页
   ·实验材料第42-43页
     ·实验设备和仪器第42页
     ·实验试剂第42页
     ·主要溶液配置第42-43页
   ·实验方法第43-47页
     ·胚胎性别鉴定第43-44页
     ·RT-PCR 检测Sry mRNA 表达水平第44页
     ·Western-blot 检测SRY 蛋白表达水平第44-47页
     ·RT-PCR 检测WT1, Sox9, SF1, DAX1, GATA4 和AMH 基因mRNA 表达水平变化第47页
   ·实验结果第47-50页
     ·性别鉴定第47页
     ·Sry mRNA 表达水平变化第47-48页
     ·小鼠胚胎SRY 蛋白表达变化第48页
     ·Sry 基因沉默后,WT1,Sox9,SF1,GATA4,DAX1 和AMH 基因的表达变化第48-50页
   ·讨论第50-51页
   ·小结第51-53页
第四章 SRY 基因沉默对小鼠胚胎性腺发育的影响第53-58页
   ·实验材料第53页
     ·实验设备和仪器第53页
     ·实验动物第53页
     ·实验试剂第53页
   ·实验方法第53-55页
     ·实验动物处理第53页
     ·孕鼠尾静脉注射干扰质粒第53页
     ·胚胎组织的收集第53-54页
     ·胚胎性别鉴定第54页
     ·胚胎组织切片的制备第54页
     ·睾丸形态观察第54页
     ·3 月龄雄鼠睾丸重量检测第54-55页
     ·统计学处理第55页
   ·实验结果第55-56页
     ·胚胎组织切片分析第55页
     ·睾丸形态观察第55-56页
     ·睾丸重量检测第56页
   ·讨论第56-57页
   ·小结第57-58页
第五章全文结论第58-59页
参考文献第59-67页
致谢第67-68页
作者简历第68页

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