| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-30页 |
| ·哺乳动物性别决定机制的研究进展 | 第13-14页 |
| ·以染色体为基础的性别决定机制 | 第13页 |
| ·哺乳动物性别决定的两个指导原则 | 第13-14页 |
| ·TDF 的定位历程及SRY 的发现 | 第14-16页 |
| ·TDF 的定位历程 | 第14-15页 |
| ·SRY 是睾丸决定因子的证据 | 第15-16页 |
| ·SRY 结构及其功能 | 第16-23页 |
| ·SRY 基因的结构、定位 | 第16页 |
| ·SRY 蛋白的结构 | 第16-17页 |
| ·Sry 在生殖脊中的表达 | 第17-18页 |
| ·Sry 在性腺发育中的调控作用 | 第18-19页 |
| ·Sry 的基因调控网络中的重要基因 | 第19-22页 |
| ·哺乳动物早期性别决定的分子模型 | 第22-23页 |
| ·RNA 干扰在哺乳动物中的研究进展 | 第23-26页 |
| ·RNAi 在哺乳动物中的分子机制 | 第23-24页 |
| ·RNA 干扰技术在哺乳动物中的应用 | 第24-26页 |
| ·siRNA 导入哺乳动物体内的方法探讨 | 第26-29页 |
| ·siRNA 导入机体所用的载体 | 第26-27页 |
| ·siRNA 导入哺乳动物体内的方法 | 第27-28页 |
| ·问题及展望 | 第28-29页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 第二章 SRY 基因干扰载体重构及其导入小鼠胚胎的方法研究 | 第30-42页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·实验动物 | 第30页 |
| ·菌种及质粒 | 第30-31页 |
| ·主要的实验仪器和器械 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-38页 |
| ·重组载体pSry565-EGFP 和pControl-EGFP 的构建 | 第31-35页 |
| ·尾静脉注射法导入siRNA 表达质粒 | 第35-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-39页 |
| ·重组载体的鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组质粒载体在小鼠胚胎中的表达情况 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-42页 |
| 第三章 SRY 基因沉默及其对性别调控相关基因表达的影响 | 第42-53页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·实验设备和仪器 | 第42页 |
| ·实验试剂 | 第42页 |
| ·主要溶液配置 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-47页 |
| ·胚胎性别鉴定 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR 检测Sry mRNA 表达水平 | 第44页 |
| ·Western-blot 检测SRY 蛋白表达水平 | 第44-47页 |
| ·RT-PCR 检测WT1, Sox9, SF1, DAX1, GATA4 和AMH 基因mRNA 表达水平变化 | 第47页 |
| ·实验结果 | 第47-50页 |
| ·性别鉴定 | 第47页 |
| ·Sry mRNA 表达水平变化 | 第47-48页 |
| ·小鼠胚胎SRY 蛋白表达变化 | 第48页 |
| ·Sry 基因沉默后，WT1，Sox9，SF1，GATA4，DAX1 和AMH 基因的表达变化 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-53页 |
| 第四章 SRY 基因沉默对小鼠胚胎性腺发育的影响 | 第53-58页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·实验设备和仪器 | 第53页 |
| ·实验动物 | 第53页 |
| ·实验试剂 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·实验动物处理 | 第53页 |
| ·孕鼠尾静脉注射干扰质粒 | 第53页 |
| ·胚胎组织的收集 | 第53-54页 |
| ·胚胎性别鉴定 | 第54页 |
| ·胚胎组织切片的制备 | 第54页 |
| ·睾丸形态观察 | 第54页 |
| ·3 月龄雄鼠睾丸重量检测 | 第54-55页 |
| ·统计学处理 | 第55页 |
| ·实验结果 | 第55-56页 |
| ·胚胎组织切片分析 | 第55页 |
| ·睾丸形态观察 | 第55-56页 |
| ·睾丸重量检测 | 第56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第五章全文结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简历 | 第68页 |
