| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略语的中英文对照 | 第13-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-40页 |
| 第一章 DNA甲基化 | 第14-31页 |
| 1 DNA甲基化概述 | 第14页 |
| 2 哺乳动物DNA甲基化 | 第14-15页 |
| 3 DNA甲基化机制 | 第15-16页 |
| 4 DNA去甲基化机制 | 第16页 |
| 5 DNA甲基化与基因表达 | 第16-19页 |
| 6 DNA甲基化与小鼠胚胎发育 | 第19-22页 |
| ·配子的DNA甲基化 | 第19页 |
| ·小鼠早期胚胎的DNA甲基化 | 第19-22页 |
| ·附植前胚胎DNA甲基化的调控机理 | 第22页 |
| 7 DNA甲基化检测方法 | 第22-26页 |
| ·全基因组甲基化检测方法 | 第23-24页 |
| ·位点特异性DNA甲基化的检测方法 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-31页 |
| 第二章 关于5-AZA-CdR | 第31-40页 |
| 1 5-AZA-CR与5-AZA-CdR | 第31页 |
| 2 5-AZA-CdR的药理学特点 | 第31-34页 |
| ·化学特点 | 第31-32页 |
| ·代谢特点 | 第32页 |
| ·分子药理学 | 第32页 |
| ·细胞药理学 | 第32-34页 |
| 3 5-AZA-CdR的细胞毒性 | 第34页 |
| 4 5-AZA-CdR的抗肿瘤活性 | 第34-36页 |
| ·白血病 | 第34页 |
| ·肿瘤 | 第34-35页 |
| ·5-AZA-CdR的毒副作用 | 第35-36页 |
| ·5-AZA-CdR的肿瘤治疗前景 | 第36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 第二篇 试验部分 | 第40-100页 |
| 第一章 小鼠免疫化学方法的建立 | 第40-49页 |
| 1 材料与方法 | 第41-43页 |
| ·实验动物 | 第41页 |
| ·试剂与仪器 | 第41-42页 |
| ·溶液配制 | 第42页 |
| ·小鼠卵母细胞的获取 | 第42页 |
| ·小鼠染色体形态观察 | 第42页 |
| ·免疫化学方法的建立 | 第42-43页 |
| 2 结果 | 第43-46页 |
| ·排卵后小鼠卵母细胞染色体形态观察 | 第43-44页 |
| ·排卵后小鼠卵母细胞的组蛋白乙酰化变化 | 第44页 |
| ·排卵后小鼠卵母细胞的组蛋白甲基化变化 | 第44-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第二章 5-AZA-CdR对小鼠附植前胚胎发育率的影响 | 第49-64页 |
| 1 材料与方法 | 第51-54页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·试剂与仪器 | 第51页 |
| ·溶液配制 | 第51-52页 |
| ·体外受精 | 第52页 |
| ·5-AZA-CdR处理 | 第52页 |
| ·胚胎Hoechst33342染色 | 第52-53页 |
| ·TUNEL凋亡检测 | 第53页 |
| ·Annexin V-PI凋亡检测 | 第53-54页 |
| ·数据统计分析 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-59页 |
| ·5-AZA-CdR对小鼠早期胚胎发育的影响 | 第54-56页 |
| ·5-AZA-CdR诱导小鼠早期胚胎的凋亡 | 第56-59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| ·5-AZA-CdR影响小鼠胚胎发育能力 | 第59-60页 |
| ·高浓度的5-AZA-CdR引起小鼠早期胚胎的凋亡 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 第三章 5-AZA-CdR对小鼠附植前胚胎DNA甲基化的影响 | 第64-79页 |
| 1 材料与方法 | 第66-69页 |
| ·实验动物 | 第66页 |
| ·试剂与仪器 | 第66页 |
| ·溶液配制 | 第66-67页 |
| ·体外受精 | 第67页 |
| ·5-AZA-CdR处理 | 第67页 |
| ·DNA甲基化检测 | 第67-68页 |
| ·Dnmtlo的检测 | 第68页 |
| ·免疫荧光相对定量分析 | 第68-69页 |
| ·数据统计分析 | 第69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-74页 |
| ·5-AZA-CdR对基因组DNA甲基化的影响 | 第69-70页 |
| ·5-AZA-CdR对胚胎Dnmtlo的影响 | 第70-74页 |
| 3 讨论 | 第74-76页 |
| ·5-AZA-CdR与胚胎DNA甲基化 | 第74-75页 |
| ·5-AZA-CdR与Dnmtlo | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-79页 |
| 第四章 5-AZA-CdR对小鼠附植前胚胎转录活性和基因表达的影响 | 第79-100页 |
| 1 材料与方法 | 第80-87页 |
| ·实验动物 | 第80-81页 |
| ·试剂与仪器 | 第81页 |
| ·溶液配制 | 第81-82页 |
| ·体外受精 | 第82页 |
| ·5-AZA-CdR处理 | 第82页 |
| ·转录活性检测 | 第82-83页 |
| ·免疫荧光相对定量分析 | 第83页 |
| ·Globin mRNA的制备 | 第83-85页 |
| ·胚胎mRNA分离提纯 | 第85页 |
| ·反转录PCR | 第85-86页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR | 第86-87页 |
| ·标准曲线的制作 | 第87页 |
| ·基因相对定量 | 第87页 |
| ·数据统计分析 | 第87页 |
| 2 结果与分析 | 第87-95页 |
| ·5-AZA-CdR对基因组转录活性的影响 | 第87-90页 |
| ·5-AZA-CdR对发育相关基因表达的影响 | 第90-95页 |
| 3 讨论 | 第95-97页 |
| ·5-AZA-CdR与转录活性 | 第95页 |
| ·5-AZA-CdR与发育相关基因的表达 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-100页 |
| 全文结论 | 第100-101页 |
| 创新 | 第101-102页 |
| 附录 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第105页 |