目录 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
引言 | 第12-13页 |
1. 双联病毒科的分类、寄主范围及介体传播 | 第13-15页 |
·Mastrevirus | 第13-14页 |
·Curtovirus | 第14页 |
·Topocuvirus | 第14-15页 |
·Begomovirus | 第15页 |
2. 双联病毒的基因组结构与功能 | 第15-17页 |
3. 双联病毒的侵染过程及传播 | 第17-23页 |
·双联病毒的复制 | 第17-20页 |
·双联病毒的复制策略 | 第17-18页 |
·双联病毒的复制结构域 | 第18-19页 |
·双联病毒的滚环复制 | 第19-20页 |
·双联病毒的转录 | 第20页 |
·双联病毒的传播 | 第20-23页 |
·自然传播 | 第20-22页 |
·人工传播 | 第22-23页 |
4. 双联病毒的变异与命名 | 第23-25页 |
·Begomovirus/DNA β:一种新型的病害复合体 | 第23页 |
·重组是病毒变异和新的病害产生的重要因素 | 第23-25页 |
·双联病毒的命名 | 第25页 |
5. 双联病毒其它方面的研究进展 | 第25-27页 |
·双联病毒在基因工程抗病中的应用 | 第25-26页 |
·双联病毒作为基因表达载体 | 第26-27页 |
6. 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
第二章 材料与方法 | 第28-39页 |
1. 材料 | 第28-29页 |
·病毒 | 第28页 |
·植物材料 | 第28页 |
·菌株和质粒 | 第28页 |
·供试虫源 | 第28-29页 |
2. 方法 | 第29-37页 |
·植物总 DNA提取(CTAB法) | 第29页 |
·PCR技术 | 第29-31页 |
·反应体系 | 第29-30页 |
·反应参数设置 | 第30-31页 |
·反应后检验 | 第31页 |
·割胶回收 | 第31页 |
·DNA克隆技术 | 第31-34页 |
·连接方法 | 第31-32页 |
·感受态细胞制备方法 | 第32-33页 |
·转化 | 第33页 |
·重组克隆的初步筛选和菌液 PCR鉴定 | 第33页 |
·提取重组质粒和重组鉴定 | 第33-34页 |
·测序 | 第34页 |
·Southern blot分析 | 第34-37页 |
·电泳和胶处理 | 第34-35页 |
·转膜(中型毛细管转膜) | 第35-36页 |
·探针标记(地高辛标记法) | 第36页 |
·预杂交和杂交以及显色 | 第36-37页 |
3 常用化学试剂分子生物学试剂及仪器 | 第37-38页 |
·常用化学试剂 | 第37页 |
·分子生物学试剂 | 第37-38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
4 常用缓冲液的配制 | 第38-39页 |
第三章 福建省几种作物和杂草上双联病毒的PCR快速检测 | 第39-44页 |
1 材料与方法 | 第39-41页 |
·毒源 | 第39页 |
·植物总DNA的抽提及纯化 | 第39-40页 |
·PCR扩增、克隆和序列测定、分析 | 第40-41页 |
2 结果与分析 | 第41-42页 |
3 讨论 | 第42-44页 |
第四章 侵染胜红蓟的双联病毒的分子鉴定 | 第44-51页 |
1 材料和方法 | 第44-45页 |
·毒源 | 第44页 |
·总 DNA提取 | 第44-45页 |
·PCR扩增、克隆和序列测定 | 第45页 |
·序列分析 | 第45页 |
2 结果与分析 | 第45-49页 |
·F09病毒基因组 DNAA结构 | 第45-47页 |
·F09 DNAA与其它双联病毒的同源性比较 | 第47-48页 |
·F09伴随的DNA β分子结构以及与其它 DNA β的同源性比较 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-51页 |
第五章 侵染福建醴肠的双联病毒的分子鉴定 | 第51-66页 |
1 材料与方法 | 第51-54页 |
·毒源 | 第51-52页 |
·植物总DNA提取 | 第52页 |
·PCR扩增、克隆和序列测定 | 第52页 |
·DNA β和 DNA B组分的寻找方法 | 第52-53页 |
·序列分析 | 第53-54页 |
2 结果与分析 | 第54-64页 |
·病毒基因组 DNAA结构 | 第54-55页 |
·病毒分离物 DNAA与其它双联病毒的比较及分子进化分析 | 第55-63页 |
·病毒分离物 F21、F22与其它双联病毒的比较及分子进化分析 | 第56-59页 |
·病毒分离物 F25与其它双联病毒的比较及分子进化分析 | 第59-62页 |
·病毒分离物 F26与其它双联病毒的比较及分子进化分析 | 第62-63页 |
·分离物中DNA β和DNA B组分的检测 | 第63-64页 |
3 讨论 | 第64-66页 |
第六章 醴肠黄脉病的生物学传毒试验 | 第66-74页 |
1 材料与方法 | 第66-68页 |
·毒源 | 第66页 |
·供试虫源 | 第66-67页 |
·供试植物 | 第67页 |
·接种 | 第67页 |
·植物总DNA的抽提及纯化 | 第67-68页 |
·Southern blotting检测 | 第68页 |
·PCR扩增、克隆和序列测定、分析 | 第68页 |
2 结果与分析 | 第68-73页 |
·接种植物表现及症状 | 第68-70页 |
·500bp特异性片断的检测 | 第70页 |
·Southern blotting检测 | 第70-71页 |
·近全长DNAA特异性片断的检测 | 第71-72页 |
·序列分析与同源性比较 | 第72-73页 |
3 讨论 | 第73-74页 |
第七章 几种作物和杂草上黄脉病的分子鉴定 | 第74-81页 |
1 材料和方法 | 第74-77页 |
·毒源 | 第74页 |
·总DNA提取 | 第74页 |
·PCR扩增、克隆和序列测定 | 第74-76页 |
·序列分析 | 第76-77页 |
2 结果与分析 | 第77-80页 |
·基因组DNAA结构 | 第77页 |
·病毒分离物 DNAA与其它双联病毒的比较及分子进化分析 | 第77-79页 |
·分离物中DNA β和DNA B组分的检测 | 第79-80页 |
3 讨论 | 第80-81页 |
总结与讨论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-88页 |
附录I 常见缓冲液的配制 | 第88-91页 |
附录II Genebank + EMBL序列登录号 | 第91-92页 |
致谢 | 第92页 |