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禽流感病毒抗体检测间接竞争ELISA方法的建立及初步应用

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 引言第11-25页
   ·禽流感的历史及危害第11-14页
     ·禽流感的历史第11-13页
     ·禽流感在我国的分布与危害第13-14页
   ·禽流感的病原学特征第14-15页
     ·禽流感的分类和命名第14页
     ·禽流感病毒的形态结构第14页
     ·禽流感病毒的理化特性第14-15页
   ·禽流感的流行病学特征第15-16页
   ·禽流感病毒的体液免疫第16-17页
   ·禽流感病毒核蛋白和基质蛋白的研究概况第17-18页
     ·核蛋白((NP)研究概况第17-18页
     ·基质蛋白(M)研究概况第18页
   ·禽流感检测方法研究进展第18-22页
   ·禽流感的公共卫生意义第22-23页
   ·本试验目的和意义第23-25页
2 材料与方法第25-33页
   ·试验材料第25-26页
     ·试验动物及血清第25页
     ·检测用抗原第25页
     ·主要溶剂及其配制方法第25-26页
     ·仪器和设备第26页
   ·试验方法第26-33页
     ·M1蛋白的表达及纯化第26-28页
     ·兔抗 M1蛋白家兔高免血清的制备第28页
     ·以M1为抗原禽类 A型AI间接竞争 ELISA检测方法的建立第28-30页
     ·NP蛋白的表达纯化第30-31页
     ·兔抗 NP蛋白家兔高免血清的制备第31页
     ·以NP为抗原禽类 A型AI竞争 ELISA检测方法的建立第31-33页
3 结果与分析第33-46页
   ·M1蛋白的表达及纯化第33页
     ·诱导后菌液与纯化蛋白的SDS-PAGE分析第33页
     ·M1纯化蛋白的浓度测定第33页
   ·兔抗 M1蛋白家兔高免血清的制备第33-34页
     ·兔抗 M1血清效价的测定第33页
     ·纯化蛋白与家兔阳性血清的western-blotting分析第33-34页
   ·以M1为抗原禽类 A型AI间接竞争 ELISA检测方法的建立第34-39页
   ·NP蛋白的表达及纯化第39-40页
     ·诱导后菌液与纯化蛋白的SDS-PAGE分析第39-40页
     ·纯化蛋白的浓度测定第40页
   ·兔抗 NP高免血清的制备第40-41页
     ·兔抗 NP血清效价的测定第40页
     ·纯化蛋白与家兔阳性血清的western-blotting分析第40-41页
   ·以NP为抗原禽类 A型AI间接竞争 ELISA检测方法的建立第41-46页
4 讨论第46-50页
   ·以NP、M1为抗原的间接竞争 ELISAA型流感检测的特点第46页
   ·A型流感间接竞争 ELISA检测方法的建立第46-48页
     ·M1和 NP包被液的选择第46页
     ·血清反应条件的优化第46-47页
     ·竞争 ELISA阳性临界值的判定第47页
     ·关于异常的检测结果第47-48页
     ·ELISA试验操作注意点第48页
   ·关于检测 A型流感间接竞争 ELISA方法第48-50页
     ·竞争 ELISA方法的优势第48-49页
     ·本试验的后期工作中尚需完善的方面第49-50页
5 结论第50-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-58页
攻读硕士期间发表的学术论文第58页

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