| 第一部分 P2X_4嘌呤受体异体表达模型的建立 | 第1-23页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-8页 |
| 材料和方法 | 第8-17页 |
| 1 实验材料 | 第8-10页 |
| ·实验试剂 | 第8页 |
| ·溶液配制 | 第8-10页 |
| ·实验仪器 | 第10页 |
| 2 方法 | 第10-17页 |
| ·P2X_4 cDNA 表达载体的构建 | 第10-11页 |
| ·质粒cDNA 的提取纯化 | 第11-13页 |
| ·P2X_4cDNA 质粒的洗脱 | 第11页 |
| ·大肠杆菌(DH5α)的扩增 | 第11页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第11-12页 |
| ·P2X_4cDNA 转化到感受态大肠杆菌中 | 第12页 |
| ·P2X_4cDNA 菌落筛选 | 第12页 |
| ·P2X_4cDNA 质粒提取与纯化 | 第12-13页 |
| ·检测cDNA 纯度与浓度 | 第13页 |
| ·cDNA 的电泳和浓度的计算 | 第13-14页 |
| ·电泳检测 | 第13-14页 |
| ·cDNA 体外转录 | 第14-15页 |
| ·模板cDNA 线性化 | 第14-15页 |
| ·cDNA 体外转录 | 第15页 |
| ·转录反应的终止和mRNA 的纯化 | 第15页 |
| ·卵母细胞的准备 | 第15页 |
| ·mRNA 的注射及在卵母细胞的表达 | 第15-17页 |
| 结果 | 第17-19页 |
| ·P2X_4cDNA 纯化质粒和单酶切后的鉴定 | 第17页 |
| ·体外转录 | 第17-18页 |
| ·P2X_4cDNA 在卵母细胞中表达 | 第18-19页 |
| 讨论 | 第19-20页 |
| 参考文献 | 第20-23页 |
| 第二部分 pH 改变对大鼠P2X_4受体激活电流的调制 | 第23-33页 |
| 摘要 | 第23-24页 |
| Abstract | 第24-25页 |
| 前言 | 第25页 |
| 1 实验材料 | 第25-26页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| ·实验试剂 | 第25页 |
| ·溶液配制 | 第25-26页 |
| ·实验仪器 | 第26页 |
| 2 实验方法 | 第26-27页 |
| ·mRNA 的准备和卵母细胞的表达 | 第26页 |
| ·药物和仪器 | 第26-27页 |
| ·电生理记录 | 第27页 |
| ·数据处理 | 第27页 |
| 3 结果 | 第27-31页 |
| ·P2X_4 受体激活电流的特征 | 第27-28页 |
| ·pH 对ATP 激活电流的调制作用和浓度-效应关系 | 第28-30页 |
| ·pH 对ATP 激活电流的电流-电压关系曲线的影响 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31页 |
| 参考文献 | 第31-33页 |
| 第三部分 P2X_4受体研究进展(综述) | 第33-44页 |
| 摘要 | 第33页 |
| Abstract | 第33-34页 |
| 前言 | 第34页 |
| 1 P2X_4 的基因结构 | 第34页 |
| 2 P2X_4 受体的蛋白质结构 | 第34-36页 |
| 3 P2X_4 的激动剂,拮抗剂,穿透性 | 第36-37页 |
| 4 P2X_4 受体类似物的特点:人类,大鼠,小鼠P2X_4 受体 | 第37页 |
| 5 IVM 对P2X_4 受体通道的变够调制 | 第37-38页 |
| 6 金属,酸,乙醇对P2X_4 受体的调制 | 第38页 |
| ·金属对P2X_4 受体的调制 | 第38页 |
| ·酸对P2X 受体的调制 | 第38页 |
| ·乙醇对P2X_4 受体的调制 | 第38页 |
| 7 P2X_4 受体分布 | 第38-39页 |
| 8 P2X_4 受体的生物学功能 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 详细摘要 | 第45-46页 |