棉花幼苗盐胁迫条件下Solexa转录组测序结果的分析及验证
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-30页 |
| ·盐胁迫对棉花植株生长的影响 | 第11-12页 |
| ·棉花的耐盐性及其机理 | 第12-17页 |
| ·棉花的耐盐特性 | 第12-13页 |
| ·耐盐机理 | 第13-17页 |
| ·盐离子在棉花体内的分布 | 第13-14页 |
| ·膜结构和功能的稳定性 | 第14页 |
| ·渗透调节作用 | 第14-16页 |
| ·无机渗透调节机制 | 第14-15页 |
| ·有机渗透调节机制 | 第15-16页 |
| ·分子机理 | 第16-17页 |
| ·Solexa 测序 | 第17-19页 |
| ·Solexa 测序的基本原理 | 第17-18页 |
| ·Solexa 测序的基本流程 | 第18页 |
| ·Solexa 测序的应用 | 第18-19页 |
| ·LEA蛋白 | 第19-29页 |
| ·LEA蛋白的存在 | 第20页 |
| ·LEA蛋白的结构与功能 | 第20-21页 |
| ·LEA蛋白的亚细胞定位 | 第21-22页 |
| ·LEA蛋白的分类 | 第22-27页 |
| ·植物LEA蛋白的分类 | 第23-26页 |
| ·拟南芥 LEA 基因的分类及其表达特性 | 第26-27页 |
| ·LEA基因的结构及其表达的调控 | 第27-29页 |
| ·LEA 基因的结构 | 第27页 |
| ·LEA 基因表达的调控 | 第27-29页 |
| ·本课题的目的和意义 | 第29-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-42页 |
| ·实验材料 | 第30-33页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·菌株与质粒 | 第30页 |
| ·酵母菌株与载体 | 第30页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第30页 |
| ·实验用的引物 | 第30-33页 |
| ·实验方法 | 第33-40页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第33页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·大肠杆菌细胞的转化 | 第33页 |
| ·大肠杆菌中质粒的提取 | 第33-34页 |
| ·植物基因组DNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·试剂盒法提取 RNA | 第35页 |
| ·TRIZOL 法提取 RNA | 第35页 |
| ·RNA 中基因组DNA 的去除 | 第35-36页 |
| ·RNA 反转录 | 第36页 |
| ·qRT-PCR | 第36-37页 |
| ·qRT-PCR 引物设计 | 第36页 |
| ·qRT-PCR 反应条件 | 第36-37页 |
| ·酵母表达载体的构建与转化 | 第37-40页 |
| ·试剂配制 | 第37-38页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第38页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第38页 |
| ·酵母感受态细胞转化 | 第38-39页 |
| ·酵母菌的培养 | 第39页 |
| ·酵母质粒提取(玻璃珠法) | 第39页 |
| ·酵母质粒提取(天根试剂盒法) | 第39-40页 |
| ·绘制进化树 | 第40页 |
| ·Clustal 的使用 | 第40页 |
| ·Mega4 构建系统发生树的方法 | 第40页 |
| ·网络资源 | 第40-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-68页 |
| ·棉花幼苗的表达谱分析 | 第42-54页 |
| ·Solexa 测序结果的获得 | 第42页 |
| ·Solexa 测序结果的分析 | 第42-43页 |
| ·差异表达基因的分析 | 第43-54页 |
| ·qRT-PCR 对测序结果的验证 | 第54-57页 |
| ·LEA 基因的表达模式分析 | 第57-59页 |
| ·LEA 蛋白的氨基酸序列比对及系统发生分析 | 第59-63页 |
| ·LEA 基因的功能研究 | 第63-68页 |
| ·LEA 基因在酵母中的功能验证 | 第63-66页 |
| ·LEA基因在拟南芥中的功能验证 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-70页 |
| 5 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
