| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一篇 综述 | 第10-27页 |
| 第一章 猪圆环病毒2型感染研究进展 | 第10-27页 |
| 1.PCV2分子生物学特性 | 第10-12页 |
| ·病毒基因组特性 | 第10-11页 |
| ·病毒基因组结构与功能 | 第11-12页 |
| 2.致病机理 | 第12-15页 |
| ·PCV2的靶细胞及其分布 | 第12-13页 |
| ·PCV2对PMWS组织细胞亚群的影响 | 第13页 |
| ·PCV2对PMWS细胞因子的影响 | 第13-14页 |
| ·影响PMWS的因素 | 第14-15页 |
| 3.免疫学研究 | 第15-16页 |
| ·免疫器官组织变化 | 第15页 |
| ·PMWS引起的免疫抑制 | 第15-16页 |
| 4.诊断方法 | 第16-18页 |
| ·病毒抗原检测技术 | 第16-17页 |
| ·病毒抗体的检测技术 | 第17-18页 |
| 5.PCV2疫苗研究 | 第18-20页 |
| 参考文献 | 第20-27页 |
| 第二篇 试验部分 | 第27-54页 |
| 第一章 猪圆环病毒2型Cap蛋白羧基端基因片段在大肠杆菌系统中的表达与抗原性分析 | 第27-39页 |
| 1.材料与方法 | 第28-31页 |
| ·PCV2阳性血清的制备 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌重组表达质粒的构建与鉴定 | 第29-30页 |
| ·目的蛋白表达与纯化 | 第30-31页 |
| ·SDS-PAGE和Westernblot鉴定 | 第31页 |
| ·包涵体溶解蛋白与可溶性蛋白ELISA方法检测PCV2抗体 | 第31页 |
| 2.结果 | 第31-35页 |
| ·PCV2纯化及抗体制备 | 第32页 |
| ·PCR | 第32页 |
| ·目的蛋白表达与条件优化 | 第32-33页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE及Westernblot结果 | 第34页 |
| ·ELISA | 第34-35页 |
| 3.讨论 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 第二章 PCV2 Cap和IFN α融合蛋白重组腺病毒的构建与鉴定 | 第39-54页 |
| 1.材料与方法 | 第40页 |
| ·细胞、病毒与质粒 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| 2.方法 | 第40-45页 |
| ·重组质粒pShuttle—CMV-ORF2-IFN α的构建与鉴定 | 第40-42页 |
| ·重组质粒rAd-ORF2一IFN α的构建与鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组质粒rAd—ORF2-IFN α转染 | 第43-44页 |
| ·重组腺病毒表达鉴定 | 第44-45页 |
| ·重组腺病毒TCID_(50)测定 | 第45页 |
| ·小鼠免疫实验 | 第45页 |
| ·ELISA检测PCV2抗体 | 第45页 |
| 3 结果 | 第45-48页 |
| ·重组质粒pShuttle-CMV-ORF2-IFN α的构建与鉴定 | 第45-46页 |
| ·重组质粒pAd-ORF2-IFN α的鉴定 | 第46页 |
| ·质粒转染和病毒收获 | 第46页 |
| ·重组腺病毒rAd-CAP-IFN α表达鉴定 | 第46-47页 |
| ·小鼠免疫实验 | 第47-48页 |
| 4.讨论 | 第48-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 全文总结 | 第54-55页 |
| 附录 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第60页 |
