| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第8-16页 |
| ·TCTP 的空间结构特点 | 第9页 |
| ·TCTP 合成的调控 | 第9-10页 |
| ·TCTP 的生物学特性及功能 | 第10-13页 |
| ·与钙离子结合 | 第10-11页 |
| ·与微管蛋白结合 | 第11页 |
| ·作为翻译负调控因子 | 第11页 |
| ·作为Ig-E 依赖性组胺释放因子 | 第11-12页 |
| ·作为肿瘤逆转的靶标 | 第12页 |
| ·作为抗凋亡蛋白 | 第12-13页 |
| ·非哺乳动物TCTP 的研究 | 第13页 |
| ·日本七鳃鳗口腔腺分泌TCTP 的研究 | 第13-16页 |
| 第2章 日本七鳃鳗口腔腺分泌L-250 蛋白的基因克隆、表达及纯化 | 第16-31页 |
| ·日本七鳃鳗口腔腺分泌L-250 蛋白的基因克隆 | 第16-22页 |
| ·材料和方法 | 第16-20页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-20页 |
| ·引物设计 | 第16页 |
| ·总RNA 的提取 | 第16-17页 |
| ·逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR） | 第17-18页 |
| ·目的片段与载体相连并进行筛选 | 第18-20页 |
| ·结果 | 第20-22页 |
| ·RT-PCR 结果 | 第20页 |
| ·阳性转化子筛选和双酶切鉴定 | 第20-22页 |
| ·重组日本七鳃鳗口腔腺分泌L-250 蛋白的诱导表达、鉴定与纯化 | 第22-31页 |
| ·材料和方法 | 第22-26页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-26页 |
| ·从克隆菌DH5α中提取含有目的蛋白的重组质粒 | 第22页 |
| ·重组质粒pET236-L250 转化入表达菌E.coli BL21 中 | 第22页 |
| ·对重组表达菌的鉴定 | 第22页 |
| ·对阳性重组子进行终浓度0.5 mmol/L 的IPTG 诱导表达 | 第22页 |
| ·诱导蛋白的提取及鉴定 | 第22-23页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定 | 第23-25页 |
| ·重组蛋白L-250 的纯化 | 第25-26页 |
| ·纯化蛋白的浓度测定 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-29页 |
| ·对重组菌进行低温过夜IPTG 诱导表达 | 第26-27页 |
| ·蛋白质亲和层析纯化 | 第27-28页 |
| ·蛋白标准曲线的绘制 | 第28-29页 |
| ·纯化蛋白的浓度 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第3章 兔抗七鳃鳗血清L-250 蛋白多克隆抗体的制备及免疫印迹分析 | 第31-37页 |
| ·兔抗七鳃鳗血清L-250 蛋白多克隆抗体的制备 | 第31-32页 |
| ·材料和方法 | 第31-32页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-32页 |
| ·抗原制备 | 第31页 |
| ·抗体制备 | 第31-32页 |
| ·ELISA 法测多克隆抗体的效价 | 第32页 |
| ·结果 | 第32页 |
| ·免疫印迹分析 | 第32-35页 |
| ·材料和方法 | 第33-34页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第4章 重组日本七鳃鳗口腔腺分泌L-250 蛋白的HRF 活性 | 第37-42页 |
| ·材料和方法 | 第37-38页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-38页 |
| ·细胞培养 | 第37页 |
| ·组胺检测 | 第37-38页 |
| ·数据分析 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| 第5章 结论 | 第42-43页 |
| ·主要结论 | 第42页 |
| ·发现了存在于日本七鳃鳗口腔腺中的TCTP 模体蛋白新基因并将其命名为L-250 | 第42页 |
| ·获得特异性较高的L-250 蛋白多克隆抗体 | 第42页 |
| ·L-250 蛋白具有组胺释放因子活性 | 第42页 |
| ·创新点 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
