摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-9页 |
1 引言 | 第9-22页 |
·小麦抗病毒病基因工程 | 第9-19页 |
·抗病毒病基因工程研究进展 | 第9-14页 |
·小麦遗传转化方法 | 第14-16页 |
·小麦遗传转化存在的问题及解决策略 | 第16-17页 |
·转基因植物中选择标记基因的去除 | 第17-19页 |
·植物抗逆基因工程 | 第19-21页 |
·渗透调节物质合成酶基因 | 第19-20页 |
·抗氧化系统酶类基因 | 第20页 |
·LEA 蛋白(late-embryogenesis-abundant protein) | 第20页 |
·转录因子基因 | 第20-21页 |
·本研究的目的意义 | 第21-22页 |
·主要研究内容 | 第22页 |
2 材料与方法 | 第22-34页 |
·材料及试剂 | 第22-24页 |
·供试材料 | 第22页 |
·质粒载体及其来源 | 第22-23页 |
·生化试剂 | 第23页 |
·所用培养基 | 第23页 |
·PCR 引物 | 第23-24页 |
·试验方法 | 第24-34页 |
·转基因小麦植株基因组DNA 提取 | 第24-25页 |
·转基因小麦PCR 扩增 | 第25-26页 |
·Southern 杂交分析方法 | 第26-27页 |
·转基因植株抗病性鉴定 | 第27页 |
·植物表达载体构建的基本方法 | 第27-30页 |
·基因枪法共转化小麦 | 第30-31页 |
·大豆材料的处理 | 第31页 |
·植物总RNA 的提取和纯化 | 第31-32页 |
·RT-PCR(Reverse Transcription PCR) | 第32-33页 |
·目的基因的克隆 | 第33页 |
·亚细胞定位载体的构建 | 第33页 |
·基因枪法转化洋葱表皮细胞 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-51页 |
·扬麦158 转复制酶基因N188 的T6代植株的分子检测及抗病性鉴定 | 第34-36页 |
·T_6 代转Nib8 基因株系PCR 扩增检测 | 第34-35页 |
·T_6 代转Nib8 基因株系Southern 杂交分析 | 第35页 |
·T_6 代转Nib8 基因株系Bar 基因检测 | 第35-36页 |
·转基因植株抗病性鉴定 | 第36页 |
·抗病ERF 基因W17 与N_(IB)8 基因共转化小麦 | 第36-43页 |
·转基因表达载体的构建 | 第36-39页 |
·转Nib8 和W17 基因小麦T_0 代植株的获得及分子检测 | 第39-41页 |
·转W17 基因小麦T_0 代植株的获得及分子检测 | 第41-43页 |
·抗逆相关DREB 转录因子基因的克隆及特性分析 | 第43-51页 |
·电子拼接 | 第43页 |
·同源进化分析 | 第43-44页 |
·植物材料总RNA 的检测 | 第44页 |
·RT-PCR 表达分析 | 第44-47页 |
·基因全长序列的获得 | 第47页 |
·基因编码的氨基酸序列分析及同源性比较 | 第47-49页 |
·亚细胞定位 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
·RNA 干扰 | 第51-52页 |
·无BAR 选择标记转基因小麦的获得 | 第52页 |
·影响小麦遗传转化率的重要因素 | 第52-53页 |
·双价功能基因转基因小麦的获得 | 第53页 |
·DREB 转录因子基因的克隆 | 第53页 |
·DREB 转录因子基因的表达特异性分析 | 第53页 |
·亚细胞定位 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
作者简介 | 第66页 |