| 摘要 | 第1-18页 |
| Abstract | 第18-21页 |
| 引言 | 第21-23页 |
| 第一篇 文献综述 | 第23-56页 |
| 第一章 赖氨酸及其营养 | 第23-32页 |
| 1 赖氨酸的理化特性 | 第23-24页 |
| 2 赖氨酸的生物学作用 | 第24页 |
| 3 赖氨酸在动物生产上的作用 | 第24-27页 |
| ·赖氨酸与动物生长 | 第24页 |
| ·赖氨酸与肉质 | 第24-25页 |
| ·赖氨酸与免疫 | 第25页 |
| ·赖氨酸与低蛋白日粮 | 第25-26页 |
| ·赖氨酸与繁殖性能 | 第26-27页 |
| 4 赖氨酸需要量的研究进展 | 第27-32页 |
| ·动物氨基酸需要量的研究方法 | 第27-28页 |
| ·剂量法 | 第27页 |
| ·氮平衡法 | 第27-28页 |
| ·血清尿素氮法 | 第28页 |
| ·析因法 | 第28页 |
| ·影响赖氨酸需要量的因素 | 第28-31页 |
| ·环境因素 | 第28-29页 |
| ·动物因素 | 第29页 |
| ·日粮因素 | 第29-31页 |
| ·肉兔的赖氨酸需要量 | 第31-32页 |
| 第二章 生长激素（GROWTH HORMONE, GH）－类胰岛素生长因子（INSULIN-LIKE GROWTH FACTOR, IGF）轴概况 | 第32-51页 |
| 1 生长激素（GH）、生长激素受体（GROWTH HORMONE, RECEPTOR, GHR）和生长激素结合蛋白（GROWTH HORMONE BINDING PROTEIN, GHBP） | 第34-37页 |
| ·生长激素（GH） | 第34页 |
| ·GH 的生化特性 | 第34页 |
| ·GH 的生理作用 | 第34页 |
| ·生长激素受体（GHR） | 第34-36页 |
| ·GHR 的生化特点 | 第35页 |
| ·GHR 的信号转导途径 | 第35-36页 |
| ·生长激素结合蛋白（GHBP） | 第36-37页 |
| 2 类胰岛素生长因子（IGFS）、类胰岛素生长因子受体（INSULIN-LIKE GROWTH FACTOR RECEPTOR, IGFR）和类胰岛素生长因子结合蛋白（INSULIN-LIKE GROWTH FACTOR BINDING PROTEINS, IGFBPS） | 第37-46页 |
| ·类胰岛素生长因子（IGFS） | 第37-42页 |
| ·IGFS 的生化特点 | 第38页 |
| ·IGFS 的体外生理功能 | 第38-39页 |
| ·IGFS 对动物体的生物学作用 | 第39-42页 |
| ·类胰岛素生长因子受体（IGFR） | 第42-44页 |
| ·IGFR 的生化特点 | 第42-43页 |
| ·IGFR 的信号转导途径 | 第43-44页 |
| ·类胰岛素生长因子结合蛋白(IGFBPs) | 第44-46页 |
| ·IGFBPs 的生化特点 | 第44-45页 |
| ·血液中的 IGFBPs 的生物作用 | 第45-46页 |
| ·组织中 IGFBPs 的生物作用 | 第46页 |
| 3 下丘脑－GH-IGF 轴的相互作用 | 第46-48页 |
| ·正向调节 | 第46-47页 |
| ·负反馈调节 | 第47-48页 |
| 4 营养对GH-IGF 轴的调控 | 第48-51页 |
| ·营养物质 | 第48页 |
| ·营养水平 | 第48-49页 |
| ·饲喂水平 | 第49页 |
| ·重组/外源GH 和IGF-I | 第49-51页 |
| 第三章 氨基酸对基因表达的调控 | 第51-56页 |
| 1 基因表达调控的基本理论 | 第51-52页 |
| 2 营养素对基因表达的作用特点 | 第52-53页 |
| 3 营养素对基因表达的调节方式 | 第53-54页 |
| 4 氨基酸对基因表达的典型调控 | 第54-56页 |
| ·氨基酸对CHOP 基因表达的影响 | 第54页 |
| ·氨基酸对 AS 基因表达的调控 | 第54-56页 |
| 第二篇 试验研究 | 第56-127页 |
| 试验一 生长期新西兰兔添加赖氨酸的生物学效应 | 第56-70页 |
| 1 试验材料与方法 | 第56-58页 |
| ·试验日粮 | 第56-57页 |
| ·试验动物 | 第57页 |
| ·饲养试验 | 第57页 |
| ·消化代谢试验 | 第57页 |
| ·血清样品的收集和保存 | 第57-58页 |
| ·样品分析 | 第58页 |
| ·数据统计与分析 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-63页 |
| ·日粮赖氨酸对断奶～90 日龄新西兰肉兔生长性能的影响 | 第58-59页 |
| ·日粮赖氨酸对断奶～90 日龄新西兰肉兔N 平衡的影响 | 第59-61页 |
| ·日粮赖氨酸对断奶～90 日龄肉兔血清生化指标的影响 | 第61页 |
| ·日粮赖氨酸对断奶～90 日龄新西兰肉兔血清激素水平的影响 | 第61-62页 |
| ·血液激素与日增重和N 代谢的关联 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-70页 |
| ·日粮赖氨酸水平与肉兔生长性能 | 第63-64页 |
| ·日粮赖氨酸水平对N 平衡的影响 | 第64-65页 |
| ·日粮赖氨酸水平对肉兔血清SUN 和 TP 含量的影响 | 第65页 |
| ·日粮赖氨酸水平对肉兔血清 Ins 和 Glu 含量的影响 | 第65-66页 |
| ·日粮赖氨酸水平对肉兔血清GH 和IGF-I 含量的影响 | 第66-67页 |
| ·内分泌激素与生长性能和N 代谢的关联 | 第67-70页 |
| 试验二 不同赖氨酸水平下生长期肉兔生长激素受体（GHR）、类胰岛素生长因子I（IGF-I）和类胰岛素生长因子结合蛋白1（IGFBP1）基因表达的半定量研究 | 第70-93页 |
| 1 GHR、IGF-I 和 IGFBP1 基因及内参3-磷酸甘油醛脱氢酶（GHPDH）基因的克隆 | 第70-80页 |
| ·克隆策略 | 第70-71页 |
| ·材料与方法 | 第71-73页 |
| ·动物组织材料来源 | 第71页 |
| ·菌株 | 第71页 |
| ·主要分子生物学数据库及软件 | 第71页 |
| ·主要仪器 | 第71-72页 |
| ·主要试剂与来源 | 第72页 |
| ·培养基、缓冲液与常用试剂的配制 | 第72-73页 |
| ·试验方法 | 第73-77页 |
| ·组织总 RNA 的提取 | 第73-74页 |
| ·反转录 | 第74页 |
| ·引物设计 | 第74-75页 |
| ·PCR 扩增 | 第75页 |
| ·琼脂糖电泳检测 | 第75页 |
| ·扩增产物的纯化、克隆和测序 | 第75-77页 |
| ·DNA 序列同源性检索鉴定 | 第77页 |
| ·试验结果 | 第77-80页 |
| ·总RNA 的提取与检测 | 第77-78页 |
| ·GHR、IGFF-I、IGFBP1 和GHPDH RT-PCR 产物电泳结果 | 第78-79页 |
| ·酶切鉴定 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80页 |
| 2 GHR、IGF-I 和 IGFBP1 基因及内参GHPDH 基因半定量RT-PCR 条件的优化 | 第80-84页 |
| ·试验材料 | 第80-81页 |
| ·试验方法 | 第81页 |
| ·总RNA 的提取及反转录 | 第81页 |
| ·相对定量聚合酶链式反应（PCR）条件的优化 | 第81页 |
| ·结果与分析 | 第81-83页 |
| ·退火温度对基因表达的影响 | 第81-82页 |
| ·MG~(2+)浓度对基因表达的影响 | 第82页 |
| ·循环数对基因表达的影响 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-84页 |
| 3 日粮赖氨酸水平影响生长期新西兰兔GHR、IGF-I、IGFBP1 基因表达的半定量研究 | 第84-93页 |
| ·试验材料与方法 | 第85页 |
| ·屠宰试验 | 第85页 |
| ·组织样品的收集和保存 | 第85页 |
| ·半定量PCR 检测GHR、IGF-I 和 IGFBP1 MRNA 丰度 | 第85页 |
| ·数据分析 | 第85页 |
| ·结果与分析 | 第85-89页 |
| ·不同赖氨酸水平70 日龄新西兰兔GHR、IGF-I 和IGFBP1 基因表达在肝脏和骨骼肌的变化规律 | 第86-87页 |
| ·不同赖氨酸水平下90 日龄新西兰兔GHR、IGF-I 和IGFBP1 基因表达在肝脏和骨骼肌的变化规律 | 第87-89页 |
| ·讨论 | 第89-93页 |
| 试验三 实时荧光定量PCR 技术检测不同日粮赖氨酸水平IGF-1 MRNA 在新西兰生长肉兔肝脏和骨骼肌的表达 | 第93-101页 |
| 1 试验材料 | 第93页 |
| ·试验样品来源 | 第93页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第93页 |
| 2 试验方法 | 第93-96页 |
| ·引物设计 | 第93-94页 |
| ·总 RNA 提取和 cDNA 的合成 | 第94页 |
| ·荧光定量PCR 反应体系及程序 | 第94页 |
| ·反应体系 | 第94页 |
| ·荧光定量 PCR 扩增条件 | 第94页 |
| ·相对定量分析（参照张驰宇等（2005）改进的荧光实时 RT-PCR 相对定量方法） | 第94-96页 |
| ·相对定量公式的推导 | 第94-95页 |
| ·相对定量方法的描述 | 第95-96页 |
| 3 结果与分析 | 第96-98页 |
| ·标准曲线图 | 第96页 |
| ·产物特异性的确定 | 第96-97页 |
| ·扩增曲线 | 第97页 |
| ·日粮赖氨酸对断奶～90 日龄新西兰兔肝脏和骨骼肌IGF-I 基因表达的影响 | 第97-98页 |
| 4 讨论 | 第98-101页 |
| ·实时荧光定量 PCR 法研究日粮赖氨酸水平对生长肉兔IGF-I 基因表达的影响 | 第98-99页 |
| ·IGF-I mRNA 含量与生长性能、N 存留和内分泌激素的相关研究 | 第99-101页 |
| 试验四 繁殖期新西兰母兔添加赖氨酸的生物学效应 | 第101-114页 |
| 1 试验材料与方法 | 第101-103页 |
| ·试验日粮 | 第101页 |
| ·试验动物 | 第101-102页 |
| ·饲养试验 | 第102页 |
| ·血清样品的收集和保存 | 第102页 |
| ·样品分析 | 第102-103页 |
| ·数据统计与分析 | 第103页 |
| 2 结果与分析 | 第103-107页 |
| ·日粮添加赖氨酸对母兔繁殖性能的影响 | 第103-104页 |
| ·日粮添加赖氨酸对繁殖期母兔血清 TP、SUN 和 Glu 含量的影响 | 第104-105页 |
| ·日粮添加赖氨酸对繁殖期母兔血清激素含量的影响 | 第105-107页 |
| ·血清 Ins、GH 和 IGF-I | 第105-106页 |
| ·血清生殖激素 | 第106-107页 |
| 3. 讨论 | 第107-114页 |
| ·日粮赖氨酸添加对母兔繁殖性能的影响 | 第107-109页 |
| ·日粮赖氨酸添加对繁殖期母兔血液生化指标的影响 | 第109-110页 |
| ·日粮赖氨酸添加对繁殖期母兔血液激素 Ins、GH 和 IGF-I 含量的影响 | 第110-112页 |
| ·日粮赖氨酸添加对繁殖期母兔血液生殖激素含量的影响 | 第112-114页 |
| 试验五 日粮中添加赖氨酸对繁殖期新西兰母兔 GHR、IGF-I 和 IGFBP1 基因表达影响的定量研究 | 第114-127页 |
| 1 试验材料与方法 | 第114-115页 |
| ·屠宰试验 | 第114页 |
| ·组织样品的收集和保存 | 第114页 |
| ·半定量 RT-PCR 检测 GHR,IGF-I 和 IGFBP1 mRNA 丰度 | 第114-115页 |
| ·实时荧光定量 PCR 技术检测 IGF-I mRNA 丰度 | 第115页 |
| 2 结果与分析 | 第115-123页 |
| ·日粮赖氨酸水平影响妊娠期末新西兰母兔 GHR、IGF-I 和 IGFBP1 基因在肝脏、乳腺和卵巢表达的半定量研究 | 第115-118页 |
| ·肝脏 | 第115-116页 |
| ·乳腺 | 第116-117页 |
| ·卵巢 | 第117-118页 |
| ·日粮赖氨酸水平影响哺乳期末新西兰母兔 GHR、IGF-I 和 IGFBP1 基因在肝脏、乳腺和卵巢表达的半定量研究 | 第118-121页 |
| ·肝脏 | 第118-119页 |
| ·乳腺 | 第119-120页 |
| ·卵巢 | 第120-121页 |
| ·日粮赖氨酸水平影响繁殖母兔 GHR、IGF-I 和 IGFBP1 基因在肝脏、乳腺和卵巢表达的实时荧光定量研究 | 第121-123页 |
| ·标准曲线图 | 第121-122页 |
| ·产物特异性的确定 | 第122页 |
| ·不同日粮赖氨酸水平下妊娠期新西兰母兔 IGF-I 在肝脏、乳腺和卵巢的表达含量 | 第122-123页 |
| ·不同日粮赖氨酸水平下哺乳期新西兰母兔 IGF-I 在肝脏、乳腺和卵巢的表达含量 | 第123页 |
| 3 讨论 | 第123-127页 |
| 总体小结 | 第127-129页 |
| 研究展望 | 第129-130页 |
| 参考文献 | 第130-143页 |
| 附录 测序报告 | 第143-146页 |
| 致谢 | 第146页 |
