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pDNAIL-1β、pDNAIL-16真核表达质粒构建及对H5亚型禽流感灭活疫苗的佐剂效应研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
1.前言第11-20页
   ·禽流感的流行现状第11-12页
   ·禽流感疫苗及疫苗免疫中存在的问题第12-13页
   ·细胞因子免疫佐剂进展第13-16页
   ·白细胞介素1B研究进展第16-17页
   ·白细胞介素16研究进展第17-18页
   ·本研究的前期工作基础第18-19页
   ·本研究目的意义第19-20页
2.实验材料第20-23页
   ·质粒与菌株第20-21页
   ·实验动物和疫苗第21页
   ·主要试剂第21页
   ·主要培养基第21-22页
   ·其它实验材料第22页
   ·主要仪器设备第22-23页
3.方法第23-30页
   ·CHIL-1B和CHIL-16基因的获取第23-24页
     ·引物设计第23页
     ·鸡IL-1β、IL-16基因PCR扩增第23-24页
     ·PCR产物的回收第24页
   ·重组质粒PDNAIL-1B和PDNAIL-16的构建及鉴定第24-27页
     ·载体pcDNA3.1的制备第24页
     ·chIL-1B、chIL-16片段和pcDNA3.1片段的连接第24-25页
     ·连接产物的转化第25页
     ·pDNAIL-1β、pDNAIL-16重组真核表达质粒的筛选及鉴定第25-27页
   ·质粒PDNAIL-1B、PDNAIL-16的大量制备第27页
     ·宿主菌的培养第27页
     ·质粒的大量提取及纯化第27页
   ·质粒PDNAIL-1B、PDNAIL-16脂质体复合物制备第27-28页
   ·实验动物的分组及免疫第28页
   ·分子免疫佐剂PDNAIL-1B和PDNA-IL16对禽流感疫苗的佐剂效应检测第28-30页
     ·禽流感HI抗体水平的测定第28-29页
     ·CD4+、CD8+、CD3+T淋巴细胞亚群数量测定第29-30页
4.结果第30-40页
   ·CHIL-1B和CHIL-16基因的获取第30页
   ·重组质粒PDNAIL-1B、PDNAIL-16的鉴定第30-33页
     ·菌落PCR第30页
     ·质粒双酶切鉴定第30-31页
     ·chIL-1β和chIL-16基因的序列测定第31-33页
   ·质粒PDNAIL-1B及PDNAIL-16的大量制备第33页
   ·PDNAIL-1B及PDNAIL-16真核表达质粒分子佐剂的制备结果第33-34页
   ·分子免疫佐剂PDNAIL-1B和PDNAIL-16对禽流感疫苗的佐剂效应测定结果第34-40页
     ·禽流感HI抗体水平测定结果第34-35页
     ·AI-pDNAIL1β、AI-pDNAIL16免疫后CD4+、CD8+及CD3+T淋巴细胞亚群数量测定第35-40页
5.分析与讨论第40-45页
   ·PDNAIL-1B、PDNAIL-16分子佐剂目的基因的选择第40页
   ·真核表达载体的选择第40-41页
   ·PDNAIL-1B、PDNAIL-16单独和联合使用对H5亚型禽流感灭活疫苗的佐剂效应第41-45页
     ·pDNAIL-1β对H5亚型禽流感灭活疫苗的佐剂效应第41-42页
     ·pDNAIL-16对H5亚型禽流感灭活疫苗的佐剂效应第42-43页
     ·pDNAIL-1β及pDNAIL-16的联合使用对H5亚型禽流感疫苗的免疫佐剂效应第43-45页
6.结论第45-46页
参考文献第46-51页
致谢第51-52页
附录第52-55页
在读期间发表的论文第55页

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