| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-23页 |
| 第一章 药用石斛资源及其可持续利用现状 | 第23-48页 |
| 1.药用石斛应用及其资源现状 | 第23-28页 |
| 2.药用石斛资源再生现状 | 第28-33页 |
| ·药用石斛的野生变家种 | 第29-30页 |
| ·药用石斛的组织培养 | 第30-33页 |
| 3.药用石斛化学成分及药理作用 | 第33-36页 |
| 4.课题构想 | 第36-48页 |
| 第二章 霍山石斛类原球茎组织培养系的建立 | 第48-65页 |
| 1.实验材料 | 第48-49页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·主要仪器 | 第48-49页 |
| 2.实验方法 | 第49-54页 |
| ·霍山石斛无菌苗的诱导 | 第49页 |
| ·霍山石斛类原球茎的诱导 | 第49页 |
| ·类原球茎增殖 | 第49页 |
| ·霍山石斛类原球茎长期培养的品质稳定性考察 | 第49-54页 |
| ·霍山石斛无菌苗的诱导 | 第49-51页 |
| ·类原球茎总多糖单糖组成的稳定性 | 第51页 |
| ·类原球茎的遗传稳定性 | 第51-54页 |
| ·数据统计 | 第54页 |
| 3.实验结果 | 第54-60页 |
| ·霍山石斛类原球茎的诱导 | 第54-55页 |
| ·霍山石斛类原球茎的增殖 | 第55页 |
| ·霍山石斛类原球茎的品质稳定性分析 | 第55-60页 |
| 4.讨论 | 第60-65页 |
| 第三章 霍山石斛多糖增强机体免疫功能的研究 | 第65-79页 |
| 1.实验材料 | 第65-66页 |
| ·霍山石斛 | 第65页 |
| ·实验动物 | 第65页 |
| ·主要试剂 | 第65-66页 |
| ·主要仪器 | 第66页 |
| 2.实验方法 | 第66-69页 |
| ·HPS的提取及含量测定 | 第66页 |
| ·HPS的DEAE-Cellulose分级分离 | 第66页 |
| ·RPMI-1640培养液配制方法 | 第66-67页 |
| ·HBSS液的配制 | 第67页 |
| ·脾细胞悬液的制备 | 第67页 |
| ·腹腔巨噬细胞悬液的制备 | 第67-68页 |
| ·HPS联合Con A诱导小鼠脾细胞产生IFN-γ | 第68页 |
| ·HPS联合LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生TNF-α | 第68页 |
| ·总RNA的提取 | 第68页 |
| ·RT-PCR | 第68-69页 |
| ·统计分析 | 第69页 |
| 3.实验结果 | 第69-74页 |
| ·霍山石斛HPS的提取和蛋白脱除 | 第69页 |
| ·野生霍山石斛HPS对小鼠脾细胞产生IFN-γ的影响 | 第69-70页 |
| ·野生霍山石斛HPS对小鼠脾细胞IFN-γ mRNA表达的影响 | 第70-71页 |
| ·野生霍山石斛HPS对小鼠腹腔巨噬细胞产生TNF-α的影响 | 第71-72页 |
| ·野生霍山石斛HPS对小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α mRNA表达的影响 | 第72页 |
| ·野生霍山石斛HPS不同组分的活性 | 第72-73页 |
| ·野生霍山石斛多糖与类原球茎多糖组分及生物学活性比较 | 第73-74页 |
| 4.讨论 | 第74-79页 |
| 第四章 霍山石斛类原球茎液体培养碳氮代谢分析 | 第79-94页 |
| 1.实验材料 | 第79-80页 |
| ·霍山石斛类原球茎 | 第79页 |
| ·主要试剂 | 第79页 |
| ·主要仪器 | 第79-80页 |
| 2.实验方法 | 第80-83页 |
| ·类原球茎悬浮培养与生长的测定 | 第80页 |
| ·多糖提取和含量测定 | 第80页 |
| ·可溶性糖含量的测定 | 第80页 |
| ·蔗糖磷酸合成酶(SPS,EC 2.4.1.14)、蔗糖合成酶(SuSy,EC 2.4.1.13)和蔗糖酶(IT,EC 3.2.1.26)活性的测定 | 第80-81页 |
| ·可溶性离子NH_4~+、NO_3~-的含量测定 | 第81-82页 |
| ·硝酸还原酶(NR,EC 1.6.6.1)、谷氨酸合酶(GOGAT,EC 1.4.1.14)和谷氨酰胺合成酶(GS,EC 6.3.1.2)活性的测定 | 第82-83页 |
| ·实验参数 | 第83页 |
| 3.实验结果 | 第83-87页 |
| ·霍山石斛类原球茎的生长动态进程 | 第83-84页 |
| ·pH的动态变化 | 第84-85页 |
| ·胞内、胞外糖消耗的动态进程 | 第85页 |
| ·碳源代谢关键酶活性的动态变化 | 第85-86页 |
| ·胞内、胞外NH_4~+和NO_3~-消耗的动态进程 | 第86页 |
| ·氮源代谢相关酶活性的动态变化 | 第86-87页 |
| 4.讨论 | 第87-94页 |
| 第五章 霍山石斛类原球茎生长和多糖合成调控 | 第94-111页 |
| 1.实验材料 | 第94页 |
| ·霍山石斛类原球茎 | 第94页 |
| ·主要试剂 | 第94页 |
| ·主要仪器 | 第94页 |
| 2.实验方法 | 第94-96页 |
| ·类原球茎悬浮培养与生长的测定 | 第94页 |
| ·生长培养基优化方案设计 | 第94-95页 |
| ·多糖合成调节方案设计 | 第95页 |
| ·多糖提取与含量测定 | 第95页 |
| ·可溶性糖含量的测定 | 第95页 |
| ·霍山石斛多糖的DEAE-Cellulose分级分离与含量测定 | 第95页 |
| ·霍山石斛类原球茎多糖的生物学活性评价 | 第95页 |
| ·实验参数 | 第95-96页 |
| 3.实验结果 | 第96-104页 |
| ·类原球茎生长培养基的优化 | 第96-99页 |
| ·碳源对类原球茎生长的影响 | 第96页 |
| ·氮源对类原球茎生长的影响 | 第96-98页 |
| ·Ca~(2+)、Fe~(2+)、Mn~(2+)和Zn~(2+)对类原球茎生长的影响 | 第98-99页 |
| ·HPS合成的调控 | 第99-104页 |
| ·优化后霍山石斛类原球茎生长与多糖合成的动态分析 | 第99-101页 |
| ·培养过程中补加蔗糖对类原球茎生长和HPS合成的影响 | 第101-104页 |
| ·优化和调控条件下的HPS组分及生物活性评价 | 第104页 |
| 4.讨论 | 第104-111页 |
| 第六章 霍山石斛活性多糖的分离纯化及结构表征 | 第111-141页 |
| 1.实验材料 | 第111-112页 |
| ·霍山石斛类原球茎 | 第111页 |
| ·主要试剂 | 第111-112页 |
| ·主要仪器 | 第112页 |
| 2.实验方法 | 第112-116页 |
| ·HPS的提取和DEAE-Cellulose分级分离 | 第113页 |
| ·HPS-1的凝胶渗透色谱纯化 | 第113页 |
| ·多糖组分活性测定 | 第113页 |
| ·多糖的纯度及摩尔分子量测定 | 第113-114页 |
| ·HPS-1B23的比旋光度的测定 | 第114页 |
| ·HPS-1B23的扫描电镜观察 | 第114页 |
| ·刚果红实验 | 第114页 |
| ·紫外光谱分析 | 第114页 |
| ·HPS-1B23单糖组成成分分析 | 第114-115页 |
| ·外光谱分析 | 第115页 |
| ·高碘酸氧化反应 | 第115页 |
| ·Smith降解反应 | 第115页 |
| ·多糖甲基化分析 | 第115-116页 |
| ·多糖的部分酸水解分析 | 第116页 |
| ·多糖的核磁共振波谱分析 | 第116页 |
| 3.实验结果 | 第116-137页 |
| ·霍山石斛多糖的凝胶柱色谱分离纯化 | 第116-120页 |
| ·类原球茎多糖HPS-1B23纯度和分子量鉴定 | 第120-121页 |
| ·类原球茎多糖HPS-1B23比旋光度的测定 | 第121页 |
| ·类原球茎多糖HPS-1B23的表观形态学观察 | 第121页 |
| ·刚果红实验分析 | 第121-123页 |
| ·类原球茎多糖HPS-1B23紫外光谱分析 | 第123-124页 |
| ·类原球茎多糖HPS-1B23单糖组成成分分析 | 第124-125页 |
| ·类原球茎多糖HPS-1B23红外光谱分析 | 第125-127页 |
| ·类原球茎多糖HPS-1B23相邻单糖连接方式的分析 | 第127-137页 |
| ·高碘酸氧化和Smith降解分析 | 第127-131页 |
| ·甲基化分析 | 第131-133页 |
| ·核磁共振氢谱和碳谱分析 | 第133-136页 |
| ·部分酸水解分析 | 第136-137页 |
| 4.讨论 | 第137-141页 |
| 第七章 结论 | 第141-143页 |
| 攻读博士学位期间发表的研究论文及专利申请 | 第143页 |
