| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| ·海洋微生物的多样性 | 第11-13页 |
| ·海洋细菌和放线菌 | 第11-12页 |
| ·海洋真菌 | 第12-13页 |
| ·海洋细菌的鉴定 | 第13-14页 |
| ·常规鉴定 | 第13页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第13页 |
| ·系统发育信息学的研究方法 | 第13-14页 |
| ·海洋细菌活性物质的研究 | 第14-17页 |
| ·抗菌活性物质 | 第14-16页 |
| ·抗肿瘤抗病毒活性物质 | 第16-17页 |
| ·芽孢杆菌在植物病害生物防治中的应用 | 第17-19页 |
| ·植物病毒抑制物质的研究概况 | 第19-21页 |
| ·化学类抑制物质 | 第19-20页 |
| ·天然产物类抑制物质 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的意义 | 第21-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-33页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·样品 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·克隆和转化菌株及引物 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·供试植物寄主 | 第24-25页 |
| ·供试植物病原物 | 第25页 |
| ·植物病毒毒源 | 第25页 |
| ·植物病原真菌 | 第25页 |
| ·TMV抗血清 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-33页 |
| ·样品的采集 | 第25页 |
| ·样品处理 | 第25页 |
| ·菌种分离 | 第25页 |
| ·发酵液的制备 | 第25-26页 |
| ·菌种保藏 | 第26页 |
| ·培养物的离心 | 第26页 |
| ·抗烟草花叶病毒海洋细菌的筛选 | 第26页 |
| ·发酵产物体外抑制TMV复制作用 | 第26页 |
| ·发酵产物体外抑制TMV活性测定 | 第26页 |
| ·菌体形态观察和生化鉴定 | 第26页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第26-29页 |
| ·细菌总DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·PCR扩增 | 第27页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 | 第27页 |
| ·DNA片段的切胶纯化 | 第27页 |
| ·PCR扩增产物和pMD18-T克隆载体的连接 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·连接反应物对宿主感受态细胞的转化 | 第28页 |
| ·质粒提取 | 第28页 |
| ·重组克隆的酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·核苷酸序列测定 | 第29页 |
| ·序列测定结果的分析与比较 | 第29页 |
| ·发酵产物对TMV的活性测定 | 第29-30页 |
| ·发酵产物对TMV侵染心叶烟的保护作用的研究 | 第29页 |
| ·发酵产物喷施处理对普通烟草体内病毒浓度的影响测定 | 第29页 |
| ·发酵产物喷施处理对普通烟草体内多酚氧化酶及过氧化物酶活性的影响测定 | 第29-30页 |
| ·喷施处理对烟草体内叶绿素含量的影响测定 | 第30页 |
| ·抑制真菌活性检测 | 第30-31页 |
| ·对真菌生长的抑制作用检测 | 第30-31页 |
| ·菌丝形态观察 | 第31页 |
| ·抗TMV蛋白的分离纯化及性质分析 | 第31-33页 |
| ·菌株9a上清液有机溶剂的萃取 | 第31页 |
| ·菌株9a上清液(NH_4)_2SO_4沉淀 | 第31页 |
| ·DEAE-sepharose Fast Flow离子交换层析 | 第31页 |
| ·Sephadex G—50凝胶过滤层析 | 第31-32页 |
| ·蛋白质纯度测定 | 第32-33页 |
| ·SDS—PAGE分子量测定 | 第33页 |
| ·蛋白浓度的确定 | 第33页 |
| ·蛋白紫外吸收光谱 | 第33页 |
| ·茚三酮反应 | 第33页 |
| ·蛋白质对病毒抑制效果的温度稳定性测定 | 第33页 |
| ·不同酸碱条件对蛋白质抗病毒效果的影响 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-51页 |
| ·抗烟草花叶病毒(TMV)海洋细菌的分离筛选 | 第33-35页 |
| ·发酵产物体外抑制TMV复制作用 | 第33-34页 |
| ·发酵产物体外抑制TMV活性测定 | 第34-35页 |
| ·菌株9a和10b的表型特征和生化鉴定 | 第35-37页 |
| ·形态特征 | 第35页 |
| ·培养特征 | 第35-36页 |
| ·生理生化特征 | 第36-37页 |
| ·耐盐、耐碱特性 | 第37页 |
| ·分子鉴定结果 | 第37-40页 |
| ·PCR扩增 | 第37-38页 |
| ·PCR产物的酶切鉴定 | 第38-39页 |
| ·序列分析结果 | 第39-40页 |
| ·发酵产物活性的测定 | 第40-45页 |
| ·发酵产物对TMV侵染心叶烟的保护作用的研究 | 第40-41页 |
| ·发酵产物喷施处理对普通烟草体内病毒浓度的影响测定 | 第41页 |
| ·发酵产物喷施处理对普通烟草体内多酚氧化酶及过氧化物酶活性的影响 | 第41-42页 |
| ·喷施处理对烟草体内叶绿素含量的影响 | 第42-43页 |
| ·对真菌生长的抑制作用 | 第43-44页 |
| ·光学显微镜下对菌丝形态的影响 | 第44-45页 |
| ·抗病毒活性蛋白的分离纯化及性质分析 | 第45-51页 |
| ·抗病毒活性成分粗体液的制备条件的 | 第45-46页 |
| ·萃取结果 | 第45页 |
| ·上清液硫酸铵沉淀 | 第45-46页 |
| ·抗TMV活性蛋白的纯化及其特性 | 第46-51页 |
| ·70％盐析蛋白的DEAE-sepharose Fast Flow柱层析 | 第46-47页 |
| ·Sephadex G—50凝胶过滤层析 | 第47页 |
| ·Pa蛋白SDS-PAGE分析 | 第47-49页 |
| ·Pa蛋白的紫外吸收光谱 | 第49页 |
| ·茚三酮反应 | 第49页 |
| ·Pa蛋白浓度的确定 | 第49页 |
| ·Pa蛋白对TMV的抑制效 | 第49页 |
| ·Pa蛋白对病毒抑制效果的温度稳定 | 第49-50页 |
| ·不同酸碱条件Pa蛋白抗病毒效果的影响 | 第50-51页 |
| 4 问题和讨论 | 第51-56页 |
| ·关于活性菌株的分离和筛选 | 第51页 |
| ·菌株的鉴定 | 第51-53页 |
| ·发酵液对病毒的抑制机制 | 第53-54页 |
| ·发酵液对真菌的抑菌效果 | 第54页 |
| ·微生物药物产生菌的改良 | 第54-55页 |
| ·抗病毒蛋白的分离纯化 | 第55-56页 |
| 小结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
